JAB、STAT3遺伝子導入によるin vivo血管平滑筋細胞増殖抑制について

JAB和STAT3基因导入抑制体内血管平滑肌细胞增殖

• 批准号: 11770383
• 负责人: 関 幸彦
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kurume University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770383/
• 关键词: Stat3; 血管リモデリング; 遺伝子治療; 細胞増殖; アポトーシス; JAB; Jak; STAT; 血管平滑筋細胞; 再狭窄

(1)JAB cDNA組込みアデノウイルス・ドミナントネガティブSTAT3 cDNA組込みアデノウイルス作成JAB cDNAおよびドミナントネガティブSTAT3 cDNAをpAdCMVLink-1に組換え、pAdCMVJAB,pAdCMVDNS3を作成。それぞれをアデノウイルスベクターADVCMVLacZと293細胞にco-transfectionし、組換えアデノウイルスADVCMVJAB,ADVCMVDNS3を作成を試みた。この過程でpAdCMVJABは293細胞の増殖を著しく抑制することが見いだされ本方法ではpAdCMVJABの大量精製は不可能であると判断した。そこでADVCMVDNS3についてのみ組換えアデノウイルスDNAを抽出しPCR法により組換えを確認後、ウイルスを大量精製した。(2)再生内膜肥厚に対するADVCMVDNS3遺伝子導入の効果検討ラット頸動脈バルーン傷害時に傷害局所の内腔から特殊バルーンカテーテルを用いてDNS3遺伝子を導入した。傷害血管におけるDNS3発現とそれに伴うStat3リン酸化の抑制をウエスタンブロット法を用いて確認した。DNS3遺伝子導入により新生内膜形成が著しく抑制された。その機序として、新生内膜における平滑筋細胞増殖の抑制と(BrdUラベル法)、アポトーシスの亢進(TUNEL法)が関与することが明らかとなった。全身臓器の炎症所見や多臓器におけるDNS3遺伝子発現はみられず明らかな副作用はなかった。以上から、Stat3が新生内膜平滑筋細胞の増殖亢進・アポトーシス抑制を介して血管傷害によるリモデリングに重要な役割を果たしており、Stat3活性を制御する遺伝子治療が有効である可能性が示された。今後、大同物を用いた実験を行い臨床応用に結びつけたい。

(1) JAB cDNA group 込 み ア デ ノ ウ イ ル ス · ド ミ ナ ン ト ネ ガ テ ィ ブ STAT3 cDNA group 込 み ア デ ノ ウ イ ル ス made JAB cDNA お よ び ド ミ ナ ン ト ネ ガ テ ィ ブ STAT3 cDNAをpAdCMVLink-1に is composed of え, pAdCMVJAB and pAdCMVDNS3を. そ れ ぞ れ を ア デ ノ ウ イ ル ス ベ ク タ ー ADVCMVLacZ と に co - 293 cell transfection し, group in え ア デ ノ ウ イ ル ス ADVCMVJAB, ADVCMVDNS3 を done try を み た. こ の process で pAdCMVJAB は の raised 293 cells reside を the し く inhibit す る こ と が see い だ さ れ this method で は pAdCMVJAB の lots of refined は impossible で あ る と judgment し た. そ こ で ADVCMVDNS3 に つ い て の み group in え ア デ ノ ウ イ ル ス を DNA extraction し PCR method に よ り group in え を confirmed, ウ イ ル ス を lots of refined し た. (2) regeneration membrane hypertrophy に す seaborne る ADVCMVDNS3 posthumous son 伝 import の unseen fruit beg ラ 検 ッ ト carotid バ ル ー ン damage に damage bureau の lumen か ら special バ ル ー ン カ テ ー テ ル を with い て DNS3 heritage 伝 son を import し た. Damage blood vessels に お け る DNS3 発 now と そ れ に with う Stat3 リ ン acidification の inhibit を ウ エ ス タ ン ブ ロ ッ を ト method with い て confirm し た. The DNS3 exitons 伝 are introduced into the によ によ new endometrium to form が <s:1> inhibition された. そ の machine sequence と し て, neointimal に お け る の inhibit smooth muscle cells raised colonization と (BrdU ラ ベ ル method), ア ポ ト ー シ ス の hyperthyroidism (TUNEL method) が masato and す る こ と が Ming ら か と な っ た. Systemic visceral inflammation reveals や multiple visceral におけるDNS3 remains 伝 present や みられず symptoms ら な な side effects な った った った った った Above か ら, Stat3 が neointimal smooth muscle cells の raised colonization hyperthyroidism, ア ポ ト ー シ ス inhibit を interface し て vascular damage に よ る リ モ デ リ ン グ に important な "を cut fruit た し て お り, Stat3 activity を suppression す る heritage 伝 son treatment が unseen で あ が る possibility in さ れ た. In the future, Datong will use を た for laboratory research and を for <s:1> clinical practice and 応 for に.

项目成果

Shibata R,Seki Y, 他9名2番目.: "Adenovirus-mediated in vivo gene transfer of dominant negative STAT3 inhibits neointimal formation after vascular injury."Circulation. 102号. II-317 (2000)

Shibata R、Seki Y 和其他 9 人第 2 篇：“腺病毒介导的显性负性 STAT3 体内基因转移抑制血管损伤后的新内膜形成。”循环。