樹状細胞への細胞融合及びゲノム導入を用いた腫瘍免疫療法に関する研究

利用细胞融合和基因组导入树突状细胞进行肿瘤免疫治疗的研究

• 批准号: 11770739
• 负责人: 谷口 雄司
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770739/
• 关键词: 樹状細胞; 細胞障害性Tリンパ球; 肺癌; tumor lysate; 腫瘍免疫

HLA-A2陽性者の健常人ドナーから採取した末梢血より単核球分画を採取し,GM-CSF,IL-4を添加して培養し,DCを誘導した.肺癌培養細胞株PC-14を粉砕したものをtumor lysateとしてこれに加え,TNF-αを添加して培養した.以上の方法にて誘導した抗原負荷DC(pulsed DC)を抗原提示細胞とし,自己リンパ球を培養した.その後リンパ球を回収し,IL-2を添加した培地で培養した.DCのフローサイトによる解析では,誘導・刺激後では,CD14の発現率は低下し,代わってCD83,CD80,ICAM-1,CD-86,HLA class IIの発現率が上昇していた.HLA class Iは,培養の前後とも高率に発現していた.また,誘導した腫瘍特異的細胞障害性Tリンパ球(CIL)は高いIFN-γの産生能力を有していた.以上より健常人末梢血単球由来のDCからヒト肺癌細胞に対するCILを誘導する系を確立した.これをふまえて,癌性胸膜炎にて再発している肺腺癌患者において実験した.同様の方法で,患者の末梢血から単球由来DCを誘導し,胸水から採取した肺腺癌細胞をtumor lysateとして誘導したpulsed DCを抗原提示細胞として自己リンパ球からCILを誘導したところ,高いIFN-γ産生能を有していた.また,DCの誘導に用いるサイトカインについては,GM-CSFを基本として,IL-1,IL-3,IL-4,IL-6,TNF-αを用いて検討したが,健常人,患者ともにGM-CSF,IL4,TNF-αの組合せが,最も効率よくDCが誘導された.実際の臨床応用に向けては,tumor lysateとして用いる癌細胞が一定量必要となる.実際には,手術症例や一部の癌性胸膜炎以外の患者以外では必要量の採取が困難である.よって,現在は生検等の少量の癌細胞による効率的なCILの誘導方法について検討中である.

の health human HLA - A2 positie ド ナ ー か ら take し よ た peripheral blood り 単 を take し nuclear ball picture, gm-csf, IL - 4 を add し て cultivate し, DC を induced し た. Cultivate lung cancer cell line PC - 14 を powder 砕 し た も の を tumor lysate と し て こ れ に え, TNF alpha を add し て cultivate し た. The above <s:1> method にて induces the antigenic load DC(pulsed) of た た DC) を antigen tip cells と し, oneself リ ン パ ball を cultivate し た. そ の after リ ン パ を ball back 収 し, IL - 2 を add し た petty で cultivate し た. DC の フ ロ ー サ イ ト に よ る parsing で は, after induction, stimulate で は, CD14 の 発 rate low は し, generation わ っ て CD83, CD80, ICAM - 1, CD - 86, HLA class II の 発 rate rising が し て い た. HLA class I は, before and after training の と も high rate に 発 now し て い た. ま た, induced し た swollen sores specific T cells handicap of sex リ ン パ ball (CIL) は high い IFN - gamma の produce skills を し て い た. Above よ り 単 ball origin の health human peripheral blood DC か ら ヒ ト lung cancer cells に す seaborne る CIL を induced す を る department establish し た. こ れ を ふ ま え て, cancerous pleurisy に て again 発 し て い る lung adenocarcinoma patients に お い て be 験 し た. With others in の way で, の peripheral blood in patients with か ら 単 ball origin DC induced し を, hydrothorax か ら take し た lung adenocarcinoma cancer cell を tumor lysate と し て induced し た pulsed DC を antigen tip cells と し て himself リ ン パ ball か ら CIL を induced し た と こ ろ, high い IFN - gamma can produce を し て い た. ま た, DC の induced に with い る サ イ ト カ イ ン に つ い て は, gm-csf を basic と し て, IL - 1, 3, IL - IL - 6, IL - 4 that TNF alpha を with い て beg し 検 た が Normal person, patient と に にGM-CSF,IL4,TNF-α <s:1> combination せが, most effective よくDCが induction された. In clinical practice, 応 is used for に to けて となる,tumor lysateと て is used for て る, and cancer cells が are used for a certain amount of となる. Be interstate に は, surgery cases outside の pleurisy patients with や a の outside で は necessary amount の take が difficulties で あ る. よ っ て, now は の a few の cancer cells such as unripe 検 に よ る sharper rate な CIL の induction method に つ い て 検 beg in で あ る.

项目成果

目次裕之: "ヒト肺癌細胞tumor lysate負荷樹状細胞による細胞障害性リンパ球誘導の基礎的検討"米子医学雑誌. 51巻1号. 39-49 (2000)

Hiroyuki 内容：“人肺癌细胞的肿瘤裂解物负载树突状细胞诱导细胞毒性淋巴细胞的基础研究”米子医学杂志，第 51 卷，第 1. 39-49 期（2000 年）。

目次裕之: "ヒト肺癌細胞 tumor lysate 負荷樹状細胞による細胞障害性リンパ球誘導の基礎的検討"米子医学雑誌. 51巻1号. 39-49 (2000)

Hiroyuki 内容：“人肺癌细胞肿瘤裂解物负载树突状细胞诱导细胞毒性淋巴细胞的基础研究”米子医学杂志，第 51 卷，第 1. 39-49 期（2000 年）。