耳下腺腺房細胞におけるVAMP2を介するアミラーゼ分泌の制御機構

VAMP2介导的腮腺腺泡细胞淀粉酶分泌的控制机制

• 批准号: 11771148
• 负责人: 吉垣 純子
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Nihon University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11771148/
• 关键词: 耳下腺; VAMP2; cAMP; 開口放出; 分泌; 唾液腺; 分泌顆粒

我々は、ラット耳下腺腺房細胞において、非刺激時には分泌顆粒膜に存在する何らかのタンパク質がVAMP2に結合しており、t-SNAREとの結合を妨げていることをすでに報告している。このタンパク質は分泌顆粒膜上に存在するSNARE複合体ではなく、今までに報告されていない新しい複合体であると考えられる。本研究では、タンパク質の相互作用の解析に実績のある酵母のtwo-hybridシステムを用いて、VAMP2と結合するタンパク質の同定を試みた。その結果、ラット耳下腺のcDNAライブラリーから、VAMP2の細胞質ドメインに対して結合能を持つ2つのクローンを単離した。現在、得られたクローンについて解析を行っている。一般に開口放出の過程は、分泌顆粒が細胞膜にドッキングするステップと、膜同士が融合して内容物が放出されるステップに分けられると考えられている。我々は、アミラーゼ分泌の制御機構に対する生化学的な解析から、アミラーゼ分泌のドッキングステップはcAMPにより促進され、膜融合のステップは細胞内カルシウム濃度により調節されているとの着想を得た。そこで、そのような仮説に基づいた数理解析を試みた。その結果、アミラーゼ分泌の速度変化は、反応速度論における2段階の逐次反応でよく説明できることが明らかになった。その解析の中で、ドッキングが完了している分泌顆粒は全体の1%程度であり、ほとんどの分泌顆粒はドッキング前の段階で待機していることが推測された。このことが、耳下腺におけるアミラーゼ分泌が主にcAMP刺激によって引き起こされる理由であると考えられる。このような数理解析により、分泌制御に関わる分子の性質の予測が可能になると期待される。

In the absence of stimulation, the secretory granule membrane is present in the auricular glandular cells, and in the absence of stimulation, the secretory granule membrane is present in the cells. The SNARE complex exists on the secretory granule membrane of the protein. In this study, we performed the analysis of two-hybrid system of yeast and the identification of two-hybrid system of VAMP2. The results showed that the cDNA of the ear gland was isolated from the cytoplasm of VAMP2, and the binding energy of VAMP2 was maintained. Now, you have to analyze it. In general, the process of release and secretion of particles from the cell membrane is a process of fusion and release of contents. We are concerned about the biochemical analysis, regulation and regulation of intracellular cAMP concentrations in the regulation of cAMP secretion. A mathematical analysis of the basic theory of mathematics. The result is that the speed of secretion changes, and the speed of inversion changes. In the analysis, the secretory granules are completed to the extent of 1% of the total. The reason for this is that the auricular gland secretes cAMP. Mathematical analysis, secretion control and molecular properties prediction are possible and expected.

项目成果

J Fijita-Yshigaki,Y Dohke,M Hara-Yokoyama et al: "Presence of a complex containing vesicle-associated membrane protein 2 in rat parotid・・・・"Journal of Biological Chemistry.

J Fijita-Yshigaki、Y Dohke、M Hara-Yokoyama 等人：“大鼠腮腺中存在含有囊泡相关膜蛋白 2 的复合物......”《生物化学杂志》。

J.Fujita-Yoshigaki: "Simulation of regulated exocytosis of amylase from salivary parotid acinar cells by a consecutive reaction model comprising two sequential first-order reactions."Journal of Theoretical Biology. 204(2). 165-177 (2000)

J.Fujita-Yoshigaki：“通过包含两个连续一级反应的连续反应模型模拟唾液腮腺腺泡细胞淀粉酶的调节胞吐作用。”理论生物学杂志。

J Fujita-Yoshigaki: "Stimulation of regulated exocytosis of amylase from salivary parotid acinar cells by a consecuticve reaction model・・・・"Journal of Theoretical Biology. (in press).

J Fujita-Yoshigaki：“通过连续反应模型刺激唾液腮腺腺泡细胞淀粉酶的调节胞吐作用......”理论生物学杂志（正在出版）。