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异丙肾上腺素启动大鼠腮腺细胞分裂的机制

• 批准号: 06771644
• 负责人: 吉垣 純子
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Nihon University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06771644/
• 关键词: Ras; GTP結合タンパク質; Raf-1; 細胞増殖

本研究では,細胞内シグナル伝達において重要な役割を果たしているRasタンパク質について,その作用機構の解明を目指した。RasのTyr32-Tyr40はエフェクター領域と呼ばれ,シグナル伝達に必須な領域である。本研究では,今までのエフェクター領域のC末端側に隣接する領域に,新たなエフェクター領域が存在することを示し,その役割の解析を行った。RasはGTP結合タンパク質であり,グアニンヌクレオチド交換により構造変化を起こす。特に大きな構造変化を起こす領域の一つが,switch I領域(Asp30-Tyr40)であり,今までのエフェクター領域とほぼ一致している。しかし,今回見いだしたエフェクター領域は,ヌクレオチドの交換ではほとんど構造変化を起こさない領域であった。このことから,この二つのエフエクター領域は性質が異なると考え,大きな構造変化を起こす今までのエフェクター領域をswitch effector(E_S)領域,構造の変化しない新たなエフェクター領域をconstitutive effector(E_C)領域と呼ぶことにした。次に,二つのエフェクター領域のそれぞれのシグナル伝達における役割について,検討した。Rasは,直接Raf-1と結合し,そのキナーゼ活性を上昇させ,MAPキナーゼをリン酸化し活性化することによって,細胞増殖を引き起こすが,Raf-1キナーゼ活性の上昇には,Ras以外に何らかの因子が必要であると考えられている。本研究において,E_S領域の変異体はRaf-1との結合能を失っていたが,E_C領域の変異体はRaf-1との結合能を保っているにも関わらず,MAPキナーゼの活性化が見られなくなっていた。このことから,E_S領域はRaf-1との結合に必要であり,E_C領域はRaf-1の活性化に必要な因子との結合に関わっている可能性が示唆された。このような複数のエフェクター領域の存在は,Rasのシグナル伝達経路の多様性を裏付けるものであると考えられる。

在这项研究中，我们旨在阐明Ras蛋白的作用机理，该作用在细胞内信号传导中起着重要作用。 Ras'Tyr32-Tyr40称为效应区域，是信号转导的重要区域。在这项研究中，我们表明在与先前效应区域的C末端相邻的区域中存在一个新的效应区域，并分析了其作用。 RAS是一种GTP结合蛋白，由于鸟嘌呤核苷酸交换而引起结构变化。开关I区域（ASP30-TYR40）是一个特别大的结构变化的区域，该区域几乎与先前的效应区域一致。然而，这段时间发现的效应区域是在进行核苷酸交换时几乎不会发生结构变化的区域。因此，我们认为这两个效应子区域具有不同的特性，并且我们决定称呼先前的效应区域，该区域会导致重大的结构变化，开关效应子（E_S）区域以及没有结构变化的新效应区域，作为宪法效应器（E_C）区域。然后检查两个效应器区域中每个效应区域中每个效应区域的作用。 RA直接与RAF-1结合，增加其激酶活性，并磷酸化并激活MAP激酶，从而导致细胞增殖，但认为RAF-1激酶活性增加还需要其他因素。在这项研究中，E_S区域中的突变体失去了与RAF-1结合的能力，但是E_C区域中的突变体仍然能够与RAF-1结合，但是不再观察到MAP激酶的激活。这表明E_S区域是与RAF-1结合所必需的，并且E_C区域可能与激活RAF-1所需的因素有关。人们认为这种多个效应器区域的存在支持RAS中信号通路的多样性。

项目成果

吉垣純子: "A constitutive effectorregion on the C-terminal side of switch I of the Ras protein." Journal of Biological Chemistry. in press. (1995)

Junko Yoshigaki：“Ras 蛋白开关 I 的 C 端的组成型效应区”，《生物化学杂志》已出版（1995 年）。