1分子イメージングによる生体分子の時間的・空間的動態の解析

使用单分子成像分析生物分子的时空动态

• 批准号: 11780542
• 负责人: 後藤 聡
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: National Institute of Genetics
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11780542/
• 关键词: Notch; GFP; 発生; ショウジョウバエ; 細胞運動

分泌蛋白や膜蛋白の多くは、Golgi体において多様な糖鎖修飾を受けている。近年のショウジョウバエを用いた遺伝学的な解析から、糖鎖修飾が発生において重要な役割果たしていることが明らかとなってきた。申請者は、Golgi体に局在する新規の糖核酸輸送体(UST74C)を同定し、その変異体の解析を行った。変異体の表現型は、多様な細胞間相互作用に用いられているNotch受容体の変異形質によく似ていた。糖核酸は糖鎖修飾の基質であるので、この変異体においては糖修飾に異常が生じていると考えられた。そこで、変異体の蛋白質の糖鎖構造を幅広く調べたところ、Notch受容体上の糖鎖構造に特に異常が生じていた。なぜ、特定の蛋白質の糖鎖構造に異常が生じるかについて解析するために、この分子の細胞における分布を調べたところ、すべてのGolgi体ではなく一部のGolgi体にのみ局在していることがわかった。UST74Cが一部のGolgi体に局在する過程を観察するために、UST74CにGFP(Green Fluorescent Protein)を融合した遺伝子をもつトランスジェニックショウジョウバエを作成し、Golgi体の細胞内での動態を観察する計画を進めている。このことにより、Golgi体の多様性を生み出すメカニズムを解くことができると考えている。この研究は、細胞内小器官の動態を遺伝学的にアプローチできる系として、非常にユニークなものである。

Secretory proteins や membrane proteins <s:1> are mostly く く, Golgi bodies にお にお て て multiple な glycolock modifications を are affected by けて る る る. Recent の シ ョ ウ ジ ョ ウ バ エ を with い た but 伝 learn な parsing か ら, sugar lock modification が 発 raw に お い て important cut fruit た な service し て い る こ と が Ming ら か と な っ て き た. The applicant に and the Golgi body に bureau, in the する new regulation of <s:1> glycolic acid transporter (UST74C)を, are the same as <s:1> and そ <s:1> variant <s:1> analysis を row った. The variant <s:1> phenotype, multiple な, intercellular interaction に with <s:1> られて る るNotch receptor <s:1> variant によく is similar to て た た た. Sugar nucleic acid は sugar lock modified の matrix で あ る の で, こ の - variant に お い て は modified に abnormal が raw sugar じ て い る と exam え ら れ た. そ こ で の sugar, 1 - の protein lock structure of を hiroo く adjustable べ た と こ ろ, a Notch is の sugar on lock capacity body structure に, abnormal に が raw じ て い た. な ぜ, specific の protein の lock structure abnormal に が raw sugar じ る か に つ い て parsing す る た め に, こ の molecular の cell に お け る distribution を adjustable べ た と こ ろ, す べ て の Golgi body で は な く a の Golgi body に の み bureau in し て い る こ と が わ か っ た. UST74Cが a <s:1> Golgi body に bureau in the する process を観 observe するために, UST74CにGFP(Green Fluorescent Fusion Protein) を し た posthumous son 伝 を も つ ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク シ ョ ウ ジ ョ ウ バ エ を し consummate, the Golgi body の intracellular で の dynamic を 観 examine す る project を into め て い る. こ の こ と に よ り, Golgi body の multiple others born を み out す メ カ ニ ズ ム を solution く こ と が で き る と exam え て い る. は こ の research, small cell organs の dynamic を but 伝 learn に ア プ ロ ー チ で き る department と し て, very に ユ ニ ー ク な も の で あ る.

项目成果

Goto, S., Hayashi, S.: "Proximal to distal cell communication in the Drosophila leg provides a basis for an intercalary mechanism of limb patterning"Development. 126. 3407-3413 (1999)

Goto，S.，Hayashi，S.：“果蝇腿部的近端到远端细胞通讯为肢体模式的嵌入机制提供了基础”的发展。

Kubota K,Goto S,Eto K,Hayashi,S.: "EGF receptor attenuates Dpp signaling and helps to distinguish the wing and leg cell fates in Drosophila"Development. 127. 3769-3776 (2000)

Kubota K，Goto S，Eto K，Hayashi，S.：“EGF 受体减弱 Dpp 信号传导，有助于区分果蝇的翼细胞和腿细胞命运”开发。