チトクロムP450(CTP)2A6遺伝子多型が喫煙者の健康に及ぼす影響

细胞色素P450（CTP）2A6基因多态性对吸烟者健康的影响

• 批准号: 12770184
• 负责人: 北川 恭子
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Hamamatsu University School of Medicine (2001)University of Occupational and Environmental Health, Japan (2000)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770184/
• 关键词: ニコチン; CYP2A6; 遺伝子多型

CYP2A6には酵素不活性となる遺伝子多型が複数種同定されており、これら多型保持者ではニコチンのコチニンへの代謝が阻害されている可能性がある。そこでCYP2A6遺伝子型判定方法を確立し、健常日本人894名の遺伝子型を調べた。その結果約96%は活性型である野生型(CYP2A6^*1)保持者であったが、他の殆どは両アレル欠失者でそれ以外の多型は一例も見つからなかった。また判定過程で4名に同一の1アミノ酸置換を伴う新規の遺伝子多型が同定された。そこでこの新規多型をCYP2A6^*6と定義し、その酵素学的特徴をリコンビナント蛋白を作成して検討した。CYP2A6の特異的基質の一つであるクマリンに対する水酸化能はCYP2A6^*6はCYP2A6^*1の約10%程度に留まっており、またKm,Vmax値の算出結果から酵素の活性および基質特異性が著しく減弱している事がわかった。この原因を明らかにするため、まずヘム蛋白であるチトクロムP450のヘム含量をHPLCによって測定した。その結果CYP2A6^*6はCYP2A6^*1と同一の条件下で蛋白発現させたにもかかわらずヘム含量は約1/2しかなく、これがCYP2A6^*6酵素活性減弱の一因であると考えられた。しかしその低下レベルは酵素失活の原因全てを説明できる程度のものではなく、他にも影響因子があると思われた。そこで次にCO差スペクトラムを測定した。CYP2A6^*6においてヘムは正常状態の約半分量が保持されていたにも関わらず、活性型構造のP450が示す吸収ピークは全く認められなかった。よってこの多型では1アミノ酸置換によって活性発現に必須のフォームがとれなくなっていると考えられた。以上の結果から遺伝子欠損型多型のみならずCYP2A6^*6保持者もニコチン代謝能は低下していると考えられ、今後は生体レベルでの代謝能の解析が必要である。

CYP2A6 enzyme inactive mutant polymorphisms replicate several homotypic mutants, and those who hold the same phenotype are responsible for preventing the possibility of causing damage. The method of determining the subtype of CYP2A6 was established and healthy. The results showed that about 96% of the active wild type (CYP2A6 ^ * 1) had a positive phenotype, while the holder of the active wild type (CYP2A6 ^ * 1) had an abnormal phenotype. It was determined that there were 4 patients with the same disease in the process, and the new regulations were associated with the same type of disease. The new multi-type CYP2A6 ^ * 6 is defined, and the special enzyme of enzyme is made into the protein of enzyme. The basic characteristic of CYP2A6 is that the acidification of water is about 10% higher than that of CYP2A6 ^ * 6CYP2A6 ^ * 1. The results show that the enzyme activity is very sensitive to the activity of enzymes. The reason is that the content of the P450 protein is determined by the determination of the content of HPLC. The results showed that the content of CYP2A6 ^ * 6 CYP2A6 ^ * 1 was lower than that of CYP2A6 ^ * 6 and CYP2A6 ^ * 6. The results showed that the enzyme activity of CYP2A6 ^ * 6 was weak. The reason for the inactivation of enzymes is that there is no difference in the degree of enzyme inactivation, but there is no difference in the degree of enzyme inactivation. This is the second time that the CO has been tested. CYP2A6 ^ * 6 is in a normal state and half a component is maintained. Active P450 is used to show that it is absorbed. In order to realize the activity of multi-type system, it is necessary to make sure that there is a high level of activity in the system. The above results show that the holder of CYP2A6 ^ * 6 is able to analyze the necessary information in the future.

项目成果

Kyoko Kitagawa: "Aldehyde dehydrogenase (ALDH) 2 associates with oxidation of methoxyacetaldehyde; in vitro analysis with liver subcellular fraction derived from human and Aldh2 gene targeting mouse"FEBS Letters. 476. 306-311 (2000)

Kyoko Kitakawa：“乙醛脱氢酶 (ALDH) 2 与甲氧基乙醛的氧化相关；利用源自人类和 Aldh2 基因靶向小鼠的肝亚细胞组分进行体外分析”FEBS Letters。

Kitagawa, K. et al.: "CYP2A6^*6, a novel polymorphism in Cytochrome P450 2A6, has a single amino acid substitution (R128Q) that inactivates enzymatic activity"Journal of Biological Chemistry. 276. 17830-17835 (2001)

Kitakawa, K. 等人：“CYP2A6^*6 是细胞色素 P450 2A6 中的一种新型多态性，具有单个氨基酸取代 (R128Q)，可导致酶活性失活”《生物化学杂志》。

Yang, M. et al.: "Individual differences in urinary cotinine levels in Japanese smokers : relation to genetic polymorphism of drug-metabolizing enzymes"Cancer Epidemiology Biomarkers prevention. 10. 589-593 (2001)

Yang, M. 等人：“日本吸烟者尿可替宁水平的个体差异：与药物代谢酶的遗传多态性的关系”癌症流行病学生物标志物预防。