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KATPおよびCaチャネルは心筋細胞のアポトーシスに重要な役割を演ずる。

KATP 和 Ca 通道在心肌细胞凋亡中发挥重要作用。

基本信息

批准号：
12770340
负责人：
土屋邦彦
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Gifu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

项目摘要

(背景)心筋細胞のapoptosisにおいて種々のイオンチャネル、特に電位依存性Caチャネルがその進展に重要な役割を演じるという報告がある。しかしapoptosis誘導細胞においてイオン電流の変化を直接的に捉えた報告は少ない。(目的)1.Fas-ligandあるいはceramideの投与によりapoptosisを誘導したラット心筋細胞を用いて、KATPチャネルおよび電位依存性Caチャネルの変化の有無をパッチクランプ法を用いて明らかにする。2.ApoptosisのブロッカーであるZ-VAD-fmk投与後にKATPチャネルあるいは電位依存性Caチャネルがどのような反応を示すかを検討する。さらに前もってKATPチャネルあるいは電位依存性Caチャネルの抑制及び拮抗薬を投与した際のFas-ligandあるいはceramideのapoptosis誘導率を検討する。(方法)ランゲンドルフ法を用いてラット単離心室筋細胞を作成。この心筋細胞にFas-ligandやceramideを投与してapoptosisを誘導する。Apoptosisの確認は細胞保存液であるKRB溶液の灌流下に光学顕微鏡を用いて細胞の形態変化及びapoptotic bodyの確認により行った。これらのapoptosisが誘導された単離心筋細胞にパッチクランプ法を行い、イオン電流を観察した。(結果)1.KATPチャネルについてapoptosis誘導心筋細胞では通常時や代謝抑制が軽度でもすでに、KATPチャネルはほぼ全開口しており、さらにKチャネル開口薬を投与しても電流量に影響はなかった。2.電位依存性Caチャネルについてapoptosis誘導心筋細胞ではapoptosis非誘導細胞に比し、電位依存性Caチャネルの活性化が非常に困難であり、数少ない活性化された場合には電流量が高度に減少していた。このことはCa電流が過剰に活性化された後のrun-downしたチャネル活性を観察しているものと考えられた。3.Fas-ligandあるいはceramideのapoptosis誘導率についてZ-VAD-fmk投与とverapamilで前処理しておくとFas-ligandとceramideのapoptosis誘導は認められなくなったがglibenclamideの前処理ではapoptosis誘導は同様に認められた。(考察)Fas-ligandとceramideのラット心筋細胞に対するapoptosis誘導には電位依存性Caチャネルが大きく関与しており、KATPチャネルはapoptosis誘導心筋細胞で強く開口していたことからその進展阻止にむしろ働いているのではと考えられた。

Background: The development of apoptosis in cardiac muscle cells, especially potential-dependent Ca ~(2 +) generation, is reported as an important process. The changes in current induced by apoptosis are reported directly. (Objective)1.Fas-ligand, in the presence or absence of ceramide administration, apoptosis, induction, and potential-dependent Ca ~(2 +) generation in cardiac muscle cells. 2. The potential dependence of KATP generation after the activation of Z-VAD-fmk is discussed. The inhibition and antagonism of potential-dependent Ca ~(2 +) production were investigated in the presence of Fas-ligand and in the presence of ceramide. (Method) The method of centrifugal chamber tendon cells is used to make the sample. Fas-ligand and ceramide are used to induce apoptosis in these cells. Identification of Apoptosis by perfusion of KRB solution with optical microscopy The apoptosis was induced by a centrifugal force and the electric current was detected. (Results) 1. KATP induced apoptosis induced cardiac muscle cells to inhibit metabolism in normal time. KATP induced apoptosis induced cardiac muscle cells to inhibit metabolism in normal time. 2. Potential-dependent Ca ~(2 +)-induced cardiomyocytes are more difficult to activate than potential-dependent Ca ~(2 +)-induced cardiomyocytes, and the amount of current is highly reduced. This is the first time that I've seen this. 3.Fas-ligand (Investigation)Fas-ligand and ceramide in the induction of apoptosis in cardiac muscle cells, potential-dependent Ca ~(2 +) generation and KATP generation in cardiac muscle cells induced by apoptosis, strong opening and inhibition of progression.