新規EBウイルスレセプターの性状解析

新型 EB 病毒受体的表征

• 批准号: 15659108
• 负责人: 吉山 裕規
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15659108/
• 关键词: EBウイルス; ウイルス感染; レセプター; 上皮細胞; CD21

EBウイルス(EBV)は唾液を介してBリンパ球に感染し、潜伏感染する。潜伏感染したEBVは、宿主の免疫応答によるBリンパ球の活性化に伴い、再活性化する。Bリンパ球から放出されたEBVは上皮細胞に感染し、上皮細胞での増殖を経て、唾液中に放出される。Bリンパ球へのEBV感染はBリンパ球特異的に発現するCD21をレセプターとしてEBVのgp350をリガンドとして成立する。上皮細胞へのEBVの感染機構については、殆ど何もわかっていなかった。しかし、申請者らは薬剤マーカーを組み込んだEBVを用いて、CD21陰性のAGS胃上皮細胞にEBVを感染させることに成功した。次に、CD21陰性であるAGS胃上皮細胞のcDNAライブラリーをイヌのMDCK細胞に導入発現させた後に、ネオマイシン耐性遺伝子とGFP遺伝子を組み込んだEBVを感染させ、PCR法を用いて、ネオマイシン耐性MDCK細胞クローン中のcDNAを増幅し、遺伝子を同定した。本研究では、同定された新規EBVレセプター遺伝子の性状解析等を行った。新しいレセプター遺伝子を100%発現するMDCK細胞を作製し、GFP遺伝子を組み込んだEBVを感染させて、GFP陽性細胞数を測定し、EBV感染効率を調べる実験により、新しいレセプターはCD21に較べてEBVに対する親和性が100分の1以下であることが明らかとなった。また、新規レセプターとIgGのFc部分との融合蛋白質による中和実験を行い、感染がブロックされることが確認された。現在、レセプターに対するEBVリガンドも決定する。gp85、gp25等のエンベロープ遺伝子のノックアウトEBVを作製し、AGS細胞への感染性を確認することにより、EBVリガンド分子の決定を行なっている。

EBウ ウ ス ス(EBV) を salivation を media <s:1> てBリ パ パ globules に infection する latent infection する. Latent infection たEBV, host <s:1> immunity 応 response によるBリ <s:1> パ globule <s:1> activation に accompanied by に, reactivation する. B リ ン パ ball か ら release さ れ た EBV は epithelial cells し に infection, epithelial cells で の raised colonization を 経 て, saliva に discharges the さ れ る. B リ ン パ ball へ の EBV infection は B リ ン パ ball specific に 発 now す る CD21 を レ セ プ タ ー と し て EBV の gp350 を リ ガ ン ド と し て established す る. Epithelial cells へ <s:1> EBV <e:1> infect the site に った て て て った, almost <s:1> he わ わ って な な った った った. し か ら し, applicants は 薬 tonic マ ー カ ー を group み 込 ん だ EBV を with い て, CD21 negative の AGS gastric epithelial cells に EBV を infection さ せ る こ と に successful し た. Time に, CD21 negative で あ る AGS gastric epithelial cells の cDNA ラ イ ブ ラ リ ー を イ ヌ の MDCK cells に import 発 now さ せ た に, after ネ オ マ イ シ ン patience heritage 伝 son と GFP heritage 伝 son を group み 込 ん だ EBV infection を さ を せ, PCR method with い て, ネ オ マ イ シ ン patience MDCK cells ク ロ ー ン の in cDNA を rights Both the banner and the positor 伝 zi を jointly determined the banner た. This study で で, the analysis of the <s:1> traits of the 伝 offspring of EBVレセプタ レセプタ in accordance with the された new regulations, etc. を conducts った. New し い レ セ プ タ ー posthumous son 伝 を 100% 発 now す る し the MDCK cells を cropping, GFP but 伝 を group み 込 ん だ EBV infection を さ せ て, determination of GFP positive cells number を し, EBV infection rate of unseen を べ る be 験 に よ り, new し い レ セ プ タ ー は CD21 に more べ て EBV に す seaborne る affinity が の 1 で under 100 points Youdaoplaceholder0 ある とが Ming ら となった となった. ま た, new rules レ セ プ タ ー の と IgG Fc part と の fusion protein に よ る neutralization be 験 を い, infection が ブ ロ ッ ク さ れ る こ と が confirm さ れ た. Now, レセプタ レセプタ に に is determined to する against するEBVリガ する ド する. Gp85, gp25 の エ ン ベ ロ ー プ posthumous son 伝 の ノ ッ ク ア ウ ト EBV を cropping し, AGS cell へ の infectious を confirm す る こ と に よ り, EBV リ ガ ン ド molecular の decided to line を な っ て い る.

项目成果

吉山 裕規: "EBウイルス"診断と治療社(東京). 13 (2003)

Hiroki Yoshiyama：“EB 病毒”诊断和治疗（东京）13（2003 年）。

Okamoto T.: "A change in PBP1 is involved in amoxicillin resistance of clinical isolates of Helicobacter pylori."Journal of Antimicrobial Chemotherapy. 50. 849-856 (2002)

Okamoto T.：“PBP1 的变化与幽门螺杆菌临床分离株的阿莫西林耐药性有关。”抗菌化疗杂志。

吉山 裕規: "新規EBウイルスベクターの開発について"ウイルス感染症セミナー. 4. 25-31 (2002)

Hiroki Yoshiyama：“新型 EB 病毒载体的开发”病毒传染病研讨会。 4. 25-31 (2002)