EBウイルスベクターを用いたエイズワクチンに関する研究

利用EB病毒载体进行艾滋病疫苗的研究

• 批准号: 07277214
• 负责人: 吉山 裕規
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07277214/
• 关键词: EBウイルス; エイズ; ワクチン; 遺伝子治療; ウイルスベクター

われわれは世界で初めてEBV増殖に許容性の細胞を分離し、EBVベクターによる遺伝子導入法を確立した。本研究の目的は、この新たに確立したEBVベクター系を用いてHIV特異的CTLを誘導し、エイズに対する特異的免疫療法を開発することである。今年度は以下の研究を行った。1.HIVのevn遺伝子を組み込んだEBVの作製:HIVのNL4-3株のevn遺伝子とネオマイシン抵抗性遺伝子をEBV DNAのBamHI-I_1/W_1領域へ組み込んだプラスミドを作製した。次いで本プラスミドをEBV陰性B細胞株BJABヘトランスフェクトし、HIV env蛋白質が発現することをHIV感染者血清を用いた蛍光抗体法により確認した。現在、本プラスミドを組み込んだEBVを作製中である。2.HIVのほぼ全ゲノム(HIV粒子ができないようにパッケージングシグナル、LTRの一方を欠失させたもの)及びネオマイシン抵抗性遺伝子をEBV DNAのBanHI-I_1/W_1領域へ組み込んだプラスミドの作製を試みた。しかし挿入するDNAが10kbpと大きいためかクローニングはできても大量増殖を行うと挿入DNAが抜けてしまい上手くいかなかった。現在、ベクターを変更して引き続きクローニングを試みている。

わ れ わ れ は め the early で て EBV raised colonization に allowable し を の cell separation, EBV ベ ク タ ー に よ る heritage 伝 son を import method to establish し た. は の purpose, this study こ の new た に establish し た EBV ベ ク タ を ー department with い て HIV specific CTL induced を し, エ イ ズ に す seaborne る specific immunotherapy を open 発 す る こ と で あ る. This year を the following を research lines った. 1. HIV の evn heritage 伝 son を group み 込 ん だ EBV の cropping: HIV の NL4-3 strains の evn heritage 伝 son と ネ オ マ イ シ ン resistance heritage 伝 son を EBV DNA の BamHI へ group - I_1 / W_1 field み 込 ん だ プ ラ ス ミ ド を cropping し た. Time い で this プ ラ ス ミ ド を EBV negative B cell lines BJAB ヘ ト ラ ン ス フ ェ ク ト し, HIV env protein が 発 now す る こ と を people living with HIV serum を い た 蛍 light antibody technique に よ り confirm し た. At present, the プラス ドを ドを group み込んだEBVを is working on である. 2. HIV の ほ ぼ full ゲ ノ ム (HIV particles が で き な い よ う に パ ッ ケ ー ジ ン グ シ グ ナ ル, LTR を owe の party lost さ せ た も の) and び ネ オ マ イ シ ン resistance heritage 伝 son を EBV DNA の BanHI へ group - I_1 / W_1 field み 込 ん だ プ ラ ス ミ ド の cropping を try み た. し か し scions into す る DNA が 10 KBP と big き い た め か ク ロ ー ニ ン グ は で き て も lots of good breeding line を う と scions into DNA が sorting け て し ま い overhand く い か な か っ た. Now, ベ ク タ ー を - more し て lead き 続 き ク ロ ー ニ ン グ を try み て い る.

项目成果

Yoshiyama.H.,Shimizu,N.and Takada,K.: "Peresistent Epstein-Barr virus infection in a human T-cell line : unique program of latent virus expression." The EMBO Journal. 14. 3706-3711 (1995)

Yoshiyama.H.、Shimizu,N. 和 Takada,K.：“人类 T 细胞系中持续的 Epstein-Barr 病毒感染：潜在病毒表达的独特程序。”