HIV中和単クローン抗体のエピトープの解析

HIV 中和单克隆抗体的表位分析

• 批准号: 06770226
• 负责人: 吉山 裕規
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770226/
• 关键词: エイズ; ワクチン; 中和抗体; ウイルス変異

HIV-1のワクチン開発の目的で中和単クローン抗体の中和活性に関わるエピトープの決定を行った。gp120分子上のV2領域を認識する抗体からのエスケープウイルスはV2領域内の単一アミノ酸が置換した2種類の変異が認められた(Y177HとL179P)。親株への同変異の導入実験によりエスケープウイルスを作製することができた。次に作製した3次構造で形成されるCD4結合領域を含む不連続なエピトープを認識するヒト型抗体21hの中和エスケープウイルスはC1領域(T55A)、V2領域(N167D)そしてV3領域(N295SとR306S)に変異が認められた。N295SはN結合糖鎖を欠失させる変異であり、3次構造で形成されるエピトープを認識する抗体の結合性はgp120分子全体としての立体構造に影響されると考えられた。1)V3領域(N295SとR306S)の変異と同じ変異を親NL4-3株に導入したウイルスを作製した。変異導入ウイルスは親株よりも増殖速度が増加していた。しかし、21hの中和に対しては感受性があった。このことからC1領域とV2領域の変異が21h抗体のgp120分子に対する結合性に重要なのかもしれない。2)CD4結合領域を含む不連続なエピトープを認識する他のヒト型単クローン抗体(F91,15e)についても中和エスケープウイルスを作製した。現在、エスケープウイルスのgp120領域の塩基配列を決定中である。

为了HIV-1疫苗的发育，确定了中和中和单克隆抗体活性的表位。在识别GP120分子上V2区域的抗体中观察到了两个突变，其中替换了V2区域中的单个氨基酸（Y177H和L179P）。通过将相同突变纳入父菌株的实验产生逃生病毒。接下来，观察到识别包含由第三纪结构形成的CD4结合区域的不连续的表位的中和逃逸病毒，观察到突变C1区域（T55A），V2区（N167D）和V3区（N295S和R306S）。 N295S是一种删除N连接的聚糖的突变，人们认为识别识别三级结构中形成的表位的抗体的结合特性受到整个GP120分子的3D构象的影响。 1）生成一种病毒，其中与V3区域（N295S和R306s）中的突变相同，引入了父nl4-3菌株中。诱变病毒的生长速率比母体菌株增加。但是，它对中和21小时敏感。这可能是C1和V2区域中的突变对于21H抗体与GP120分子的结合很重要。 2）还为其他人类单克隆抗体（F91,15E）生成中和逃生病毒，这些抗体识别含有CD4结合区域的不连续表位。目前，正在确定逃生病毒的GP120区域的基本序列。