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Barrett上皮発生におけるCDX2の役割解析の研究-CDX2遺伝子導入によるヒト食道上皮の腸上皮化生の試みとCDX2 transgenic mouseの作成-

CDX2在Barrett上皮发育中的作用分析研究 - 尝试通过CDX2基因转移诱导人食管上皮肠化生并创建CDX2转基因小鼠 -

基本信息

批准号：
15659311
负责人：
嶋田裕
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

1.培養細胞へのCDX-2強制発現ベクター導入を目指し、ヒト正常大腸組織から得たcDNAをもとにCDX2遺伝子のサブクローニングを行ったが、正常食道上皮細胞の培養に必要な牛下垂体抽出物を含む特殊な培養液が狂牛病対策によって入手が困難となり、実験の中断を余儀なくされた。2.Barrett食道の発生機序を生体を用いて解明するため、(1)CAG promoter-LoxP CAT LoxP-lacZ-CDX2 transgenic mouse(2)CK14promoter-Cre transgenic mouseの交配によるCK14-CDX-2 transgenic mouseの作成を進めている。現在までに(1)K14 promoter constructをProfessor Elaine Fuchs (Laboratory of Mammalian Cell Biology and Development, The Rockefeller University)(2)Mouse CDX-2 cDNAを青木正博博士(京都大学医学研究科遺伝薬理学教室)(3)CAG promoter-LoxP CAT LoxP-lacZ-plasmidを宮崎純一教授(大阪大学大学院医学系研究科未来医療開発専攻幹細胞制御分野)(4)nls.Cre ERTM cassetteをProfessor Mark A.Magnuson (Department of Molecular Physiology and Biophysics, Vanderbilt University School of Medicine)よりそれぞれ供与を受けトランスジーンコンストラクトを作成中である。コンストラクト作成ののち培養細胞における発現確認を行い、トランスジェニックマウスの作成を行う予定である。

1. CDX-2 stress expression in cultured cells is indicated by the expression of CDX-2 gene in normal colon tissue and the expression of CDX-2 gene in bovine pituitary extract, which is necessary for the culture of normal esophageal epithelial cells. 2. The development of Barrett's esophagus in vivo was studied.(1)CAG promoter-LoxP CAT LoxP-lacZ-CDX2 transgenic mouse.(2) The development of CK14-CDX-2 transgenic mouse. Now in (1)K14 promoter construct Professor Elaine Fuchs (Laboratory of Mammalian Cell Biology and Development, The Rockefeller University)(2)Mouse CDX-2 cDNA Dr. Masahiro Aoki (Department of Genetics, Graduate School of Medicine, Kyoto University)(3)CAG promoter-LoxP CAT LoxP-lacZ-plasmid Professor Junichi Miyazaki (Division of Future Medical Development, Stem Cell Therapy, Osaka University Graduate School of Medicine)(4)nls.Cre ERTM cassette Professor Mark A.Magnuson (Department of Molecular Physiology and Biophysics, Vanderbilt University School of Medicine). To confirm the occurrence of cell culture, to create a culture, to determine the occurrence of cell culture.