神経幹細胞および血管幹細胞から精子形成細胞への分化誘導の試み

尝试诱导神经干细胞和成血管细胞分化为生精细胞

• 批准号: 15659384
• 负责人: 郡 健二郎
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Nagoya City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15659384/
• 关键词: 神経幹細胞; 血液幹細胞; 精子形成細胞; 生殖細胞

条件設定を変えることにより、昨年度に引き続き、神経幹細胞、血液幹細胞から精子形成細胞への分化誘導の試みをまずin vitro実験で行った.神経幹細胞を脳線条体および海馬組織より血液幹細胞を骨髄組織より採取した。胎仔精巣からSertoli細胞およびLeydig細胞から採取し、神経幹細胞と血液幹細胞とマトリゲル内で共培養を行った。昨年までは増殖因子であるEGF、bFGF、KGF、トランスフェリン、androgen binding protein、アクチビン、インヒビンを加え精子への分化誘導を試み失敗に終わったため、今回は生殖腺分化に関わる転写因子Ad4BP/SF-1とDAX-1の発現ベクターを用いて、遺伝子導入を行いSertoli細胞とLeydig細胞の賦活化をはかったが、精子形成細胞への分化誘導はうまくいかなかった。また昨年同様に、実際に精巣内へ移植することより、分化誘導が可能かどうかを検討した。8週齢GFP発現オスマウスにブズルファンを投与し、精子形成細胞を除去した男子不妊症マウスを作製した。上記により得た神経幹細胞および血液幹細胞を1x10^6細胞を精巣網から微小ガラス管をもちいて注入し、注入後7日、14日、28日後に精巣を取り出し、精細管内の変化を光学顕微鏡により観察した。注入後7日の精巣において、精細管内に生殖細胞用の細胞が散在することを確認した。そこで、これら生殖細胞を採取し、GFPの発現を調べたが、確認できず、これらの生殖細胞は宿主由来のものと考えられ、生殖細胞への分化誘導は結果的にうまくいかなかった。

Conditions set を - え る こ と に よ り, yesterday's annual に き 続 き, god 経 stem cells, blood stem cells か ら sperm cells へ の induction の try み を ま ず in vitro be 験 で line っ た. Shinken stem cells を脳 linear body および hippocampal tissue よ grafted hematopoietic stem cells を bone marrow tissue よ よ taken た た. Tire wang jing 巣 か ら Sertoli cells お よ び Leydig cells か ら take し と blood stem cells, god 経 stem cells と マ ト リ ゲ ル で trained in line を っ た. Last year まで まで proliferating factors であるEGF, bFGF, KGF, トラ スフェリ スフェリ, androgen binding Protein, ア ク チ ビ ン, イ ン ヒ ビ ン を plus え sperm へ の induction を try み に failure eventually わ っ た た め, today back to は gonad differentiated に masato わ る planning write factor Ad4BP/SF - 1 と DAX - 1 の 発 now ベ ク タ ー を with い て line, but 伝 import を い Sertoli cells と の fu Leydig cells activation を は か Youdaoplaceholder0, spermatogenic cell へ <s:1> differentiation induction うまく うまく な な った った. ま た yesterday in with others in に, essence of the event be に 巣 へ transplant す る こ と よ り, induced differentiation が may か ど う か を beg し 検 た. Eight weeks 齢 GFP 発 now オ ス マ ウ ス に ブ ズ ル フ ァ ン を cast form with し, sperm cells を remove し た disease of man is not a perfect マ ウ ス を cropping し た. Written に よ り た god 経 stem cells お よ び blood stem cells を 1 x10 ^ 6 cells を fine 巣 net か ら tiny ガ ラ ス tube を も ち い て injection し, injection after 7, 14, 28 に fine 巣 を の take り し, fine tube - the を optical 顕 micromirror に よ り 観 examine し た. Seven days after injection, the sperm nests were にお て て, and the に germ cells in the fine tubes were confirmed by <s:1> cell が scattered in する とを とを とを. そ こ で, こ れ ら germ cell を し, GFP の 発 now を adjustable べ た が, confirm で き ず, こ れ ら の germ cell は host origin の も の と exam え ら れ, reproductive cells へ の differentiation inducing は results に う ま く い か な か っ た.