血管内造血発生に関わる新規血液幹細胞因子の同定

鉴定参与血管内造血发育的新型血液干细胞因子

• 批准号: 12877160
• 负责人: 高倉 伸幸
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kanazawa University (2001)Kumamoto University (2000)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12877160/
• 关键词: 造血幹細胞; 自己複製; クローニング; 発生; 臍腸間膜動脈; P-Sp

造血幹細胞の自己複製を誘導する幹細胞因子を同定する目的で、発生初期のマウス胎仔において造血幹細胞が発生、増殖する領域を探索し、その限局した領域から造血幹細胞の発生・維持・自己複製に関与する分子の単離を試みた。マウス胎生9日目の臍腸間動脈内において、血管内皮細胞を支持細胞として造血幹細胞の自己複製、増殖が営まれることが明らかとなり、本血管内皮細胞より幹細胞因子の単離を開始した。臍腸間膜動脈の内皮細胞からcDNAライブラリーを作製し、酵母発現ベクターを用い、cDNAの中で細胞外に分泌される可能性のある遺伝子をsignal sequence trap法により選択した。現在までに新規及び既知の遺伝子が25クローン同定された。そこでこれら遺伝子に関してはin situ hybridizationにて臍腸間膜動脈、背側大動脈、胎仔肝に特異的に発現する遺伝子に絞り込み、未知のものに関しては全長の遺伝子クローニングを行った。その結果CD34と類似した新しいsialomucin分子、kunitz inhibitor domainを有するproteinase inhibitor様分子などが同定された。これら遺伝子に関しては造血幹細胞の発生や自己複製に必須のものかをこれら遺伝子のノックアウトマウスを作成することにより確認中である。さらに最近既知の遺伝子であるがpodoplaninという糖蛋白が本血管内造血の現場の内皮細胞から同定された。本分子は骨髄では骨芽細胞に発現していることが知られており、また最近リンパ管内皮細胞に特異的に発現することも報告された。本分子は造血において骨形成あるいは骨髄形成そして血管形成の共通分子基盤として機能する可能性があり、今後詳細に解析を行なう予定である。

The aim of stem cell factor regulation in the induction of hematopoietic stem cell replication is to explore and limit the field of hematopoietic stem cell development and proliferation in the early stage of development. In the umbilical artery on the 9th day of birth, vascular endothelial cells support the replication and proliferation of hematopoietic stem cells. Endothelial cells of umbilical artery are selected for cDNA sequence trap, yeast expression, and extracellular secretion of cDNA. Now we have new rules and established rules. In addition, it is necessary to carry out site hybridization for the development of umbilical artery, dorsal artery and fetal liver. The results are similar to those of CD34, sialomucin and kunitz inhibitor domain. This information is related to the development and replication of hematopoietic stem cells, which is necessary for the development and replication of hematopoietic stem cells. Recently, it has been known that glycoproteins are involved in endothelial cells at the site of hematopoiesis in blood vessels. This molecule is reported to be specific to the development of bone bud cells. The possibility of this molecule's common molecular basis for hematopoiesis, bone formation, and angiogenesis is discussed in detail in the future.

项目成果

Takakura N: "A role for hematopoietic stem cells in promoting angiogenesis."Cell. 102. 199-209 (2000)

Takakura N：“造血干细胞在促进血管生成中的作用。”细胞。

Sano H: "Functional blockade of platelet-derived growth factor receptor-beta but not of receptor-alpha prevents vascular smooth muscle cell accumulation in fibrous cap lesions in apolipoprotein E-deficient mice."Circulation. 103. 2955-2960 (2001)

Sano H：“功能性阻断血小板衍生生长因子受体-β，但不阻断受体-α，可防止载脂蛋白 E 缺陷小鼠的纤维帽病变中血管平滑肌细胞积聚。”循环。

Takakura N: "Critical role of the TIE2 endothelial cell receptor in the development of definitive hematopoiesis."Immunity. 9. 677-686 (1998)

Takakura N：“TIE2 内皮细胞受体在最终造血发育中的关键作用。”免疫。

Koga K: "Expression of angiopoietin-2 in human glioma cells and its role for angiogenesis."Cancer Res. 61. 6248-6254 (2001)

Koga K：“人神经胶质瘤细胞中血管生成素 2 的表达及其对血管生成的作用。”癌症研究。

Yamada Y: "Exogenous clustered neuropilin-1 enhances vasculogenesis and angiogenesis."Blood. 97. 1671-1678 (2001)

Yamada Y：“外源性簇状神经毡蛋白-1 增强血管生成和血管生成。”血液。