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ラット新生仔脳及びCD38ノックアウトマウス脳のADPリボシルシクラーゼの精製

新生大鼠脑和 CD38 敲除小鼠脑中 ADP 核糖基环化酶的纯化

基本信息

批准号：
16650068
负责人：
東田陽博
金额：
$ 1.98万
依托单位：
Kanazawa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16650068/
关键词：
ADPリボシールシクラーゼ CD38 膜分画 NAD 薄層クロマトグラフィー大脳

项目摘要

細胞内のCaをセカンドメッセンジャーとするCaシグナリングは、数多くの受容体の下流に存在する重要な信号伝達機構の一つである。T型リンパ球や脳にも存在するADPリボシルシクラーゼ活性の大部分はCD38抗原であることがわかってきた。しかし、脳内にはCD38以外の新しいADPリボシルシクラーゼ活性を持つ分子が存在することを考え、脳型ADPリボシルシクラーゼの精製を行うため、野性株マウス脳内のシクラーゼ活性を比較した。(1)ジクラーゼ活性は、驚いた事に視床下部に高く、続いて小脳や下垂体後葉であった。(2)CD38のメッセンジャーRNA発現を調査したところ、活性値の分布と同じであった。(3)CD38ノックアウトマウスでは、シクラーゼ活性は極端に低く、視床下部でもほとんど活性やmRNAは検出できなかった。(4)シクラーゼの酵素活性産物であるサイクリックADPリボース(cADPR)濃度は、野生型マウスに比して、CD38ノックアウトマウスでは低かった。(5)視床下部に細胞外からcADPRを与えたところ、オキシトシンの分泌は見られたが、ノックアウトの視床下部からは検出できなかった。この事から、CD38がcADPRのトランスポート活性を有している事も判明した。(Nature 446,41-45,2007)以上、脳型シクラーゼの90%がCD38である事を種々の方法で証明した。当初の目的のCD38以外のシクラーゼの精製は、非常に困難な課題である事が判明した。

Ca ~(2 +) in cells is an important signaling mechanism for the downstream presence of numerous receptors. Most of the CD38 antigens are present in the T-cell. A new type of ADP outside of CD38 is present. A new type of ADP is present. (1)The lower part of the pituitary gland is high and the lower part of the pituitary gland is small. (2) CD38 mRNA expression was investigated. (3) CD38 activity is extremely low, and mRNA activity is extremely low in the lower part of the retina. (4)The concentration of enzyme activity products is lower than that of wild-type and CD38. (5)In the lower part of the optic bed, the extracellular cADPR is secreted in the lower part of the optic bed. CD-38 is the most active component of cADPR. (Nature 446, 41 - 45, 2007) More than 90% of CD38 cases are proved by methods. The original purpose of CD38 is to refine, very difficult to determine the problem.