权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

神経細胞でサイクリックADPリボースは真のセカンドメッセンジャーか

环状 ADP-核糖是神经细胞中真正的第二信使吗？

基本信息

批准号：
12877007
负责人：
東田陽博
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Kanazawa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

项目摘要

サイクリックADPリボース(ADPR)が細胞内Caプールであるリアノジン受容体に作用する、セカンドメッセンジャーないしは、Caのモジュレーターとされて久しいが、神経細胞をはじめ種々の横紋筋や平滑筋組織で作用が一定しないところがあり、その役割がいまひとつあきらかではない。その最大の理由はリアノジン受容体サブタイプの分布であるが、それに加えて、すでに存在するcADPRに影響されて不一致を生じるものと思われる。そこで神経や心臓組織におけるcADPRが真にセカンドメッセンジャーであることを証明するためには、生細胞ではなく、膜分画でcADPTの合成過程が受容体刺激によりコントロールされていることを実証すればよいと考た。今年度は、メタボトロピックなグルタミン酸受容体(mGluR)とcADPR産成酵素とのカップリングをmRluR cDNAをトランスフェクトしたNG108-15細胞と網膜および上頚神経節神経組織で観察した。mRluR cDNAをNG108-15ニューロブラストーマXグリオーマ雑種神経様神経腫瘍細胞を培養した。DNAとリポフェクタミンをNG108-15細胞に添加し、DNAを導入した。数日増殖させ培養し、異なるmGluRを発現する細胞を集めた。粗膜分画を得、それを酵素源とし、[^3H]NADを含む液とグルタンミン酸存在、非存在下反応し、2分後過塩素酸を添加し反応を止めた。薄層クロマトグラフィーにて、産物の[^3H]cADPRを分離し、放射活性を測定した。mGluR1、mGluR5、mGluR3とmGluR6がADPリボシールシクラーゼ活性を上昇させることがわかった。ラットの網膜では、mGluR6を介して、上頚神経節では、mGluR1あるいはmGluR5を介して上昇させることがわかった。以上の結果はmGlurのシグナル伝達にcADPリボースが関与していることを示唆する。

ADP receptor (ADPR) is a kind of intracellular Ca receptor. It can be used to regulate the expression of Ca in neurons. The biggest reason for this is that the distribution of the receptor is not consistent. The synthesis of cADPR in the brain tissue is stimulated by the host cell and membrane. This year, the expression of mGluR and cADPR producing enzymes and mGluR cDNA was detected in NG108-15 cells and in the upper nervous system. mRluR cDNA was cloned into pG108 -15 cells. DNA is introduced into NG108-15 cells. A few days later, the cells were cultured. Coarse membrane separation, enzyme source,[^3H]NAD solution, presence, absence, addition of peracetic acid The separation of the product [^3H]cADPR and the determination of its radioactivity mGluR1, mGluR5, mGluR6 and ADP activity increased. The membrane, mGluR6, mGluR5, mGluR1, mGluR5, mGluR6, mGluR5, mGluR5, mGluR6, mGluR5, mGluR5, mGluR6, mGluR5, mGluR6, mGluR5, mGluR5, mGluR6, mGluR6, mGluR5, mGluR5, mGluR6, mR6, mGluR6, mR6, mGluR6, mR5, mGluR6, mR6, mGluR6, mR6, m The above results show that the relationship between mGlur and cADP is very close.