新しい発想にもとづくRNA血液診断システムの構築

基于新思路构建RNA血液诊断系统

• 批准号: 16651101
• 负责人: 野島 博
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16651101/
• 关键词: 自己免疫疾患; 段階的サブトラクション法; 血液細胞; DNAチップ; アンフィレギュリン; リアルタイムPCR; 慢性関節リウマチ; 遺伝子診断; 段階的サブトランクション法; 動脈炎; 遺伝子マーカー

自己免疫疾患患者の血液細胞あるいは骨髄液細胞で特異的に過剰発現している遺伝子群を、独自に開発した段階的サブトラクション法(多段差引法)を主とし、DNAチップ解析(Agilent, Hu44K)を補完的に用いて、包括的に単離・同定することにより、自己免疫疾患の発症に深く関わっている遺伝子を見出して解析することを目的として研究を進めてきた。最終的な判定は、患者血液から抽出したRNAを混合し、それをcDNA化したサンプルをテンプレートとしたRT-PCR法によって行い、このうち、発現レベルの再現性チェックに合格したものだけを採用した。対象とした自己免疫疾患は慢性関節リウマチ(RA)、全身性エリテマトーデス(SLE)、自己免疫性血小板減少性紫斑病(ITP)、顕微鏡的多発血管炎(MPA)、高安動脈炎(TA)、ウエゲナー肉芽腫症(WG)、抗リン脂質抗体症候群(APS)、アレルギー性肉芽腫血管炎(AGA)、悪性関節リウマチ(MRA)、側頭動脈炎(GCA)、バージャー病(BD)、結節性多発動脈炎(PN)である。単離した遺伝子については転写レベルを個々の患者で調べることによって病態との関連付けを行った。そのうちアンフィレギュリン遺伝子はSLE, ITP, RAという3つの自己免疫疾患において多くの患者で数十倍の過剰発現が認められた。RAの骨髄液細胞では各患者においてさらに数倍以上の過剰発現が見出された。そこでRAをモデルとして分子細胞生物学的な手法を用いて詳細に解析したところ、アンフィレギュリンがRA患者の滑膜細胞においてEGF受容体シグナル伝達経路の活性化を誘導することで、滑膜細胞の増殖の亢進を誘起していることを見出した。

Their immune disorders の blood cells あ る い は で specific bone marrow fluid cells に through turning 発 now し て い る heritage 伝 subgroup を, alone に 発 し た Duan Jie of サ ブ ト ラ ク シ ョ ン method by poor (more) を main と し, DNA チ ッ プ parsing (Agilent, Hu44K) を fill out に with い て, including に 単 leaves, with fixed す る こ と に よ り, their immune disorders の 発 disease に deep く masato わ っ て い る heritage 伝 を son see a し て parsing す る こ と を purpose と し を て research into め て き た. Eventually な determine は, patient blood か ら spare し た RNA を mixed し, そ れ を cDNA change し た サ ン プ ル を テ ン プ レ ー ト と し た rt-pcr method に よ っ て い, こ の う ち, 発 now レ ベ ル の reproducibility チ ェ ッ ク に qualified し た も の だ け を using し た. Like と seaborne し た himself immune disorders は chronic masato section リ ウ マ チ (RA), systemic エ リ テ マ ト ー デ ス (SLE), their immune thrombocytopenic purple spot (ITP), 顕 micro mirror more 発 vasculitis (MPA), gaoan arteritis (TA), ウ エ ゲ ナ ー granulomatous disease (WG), anti リ ン lipid antibody syndrome (APS), ア レ ル ギ ー granulomatous vasculitis (AGA), 悪 masato section リ ウ マ チ (MRA), side head arteritis (GCA), バ ー ジ ャ ー disease (BD), nodular 発 arteritis (PN) で あ る. 単 from し た posthumous son 伝 に つ い て は planning write レ ベ ル を a 々 の で patients with adjustable べ る こ と に よ っ て pathological と の masato even pay け を line っ た. そ の う ち ア ン フ ィ レ ギ ュ リ ン posthumous son 伝 は SLE, ITP, RA と い う 3 つ の himself immune disorders に お い て more く の patients で の dozens of times before turning 発 が now recognize め ら れ た. RA bone marrow fluid cells で で in each patient にお てさらに てさらに several times more than the number of <s:1> passing, が is found to be された. そ こ で RA を モ デ ル と し て な molecular and cellular biology technique を with い て detailed analytical し に た と こ ろ, ア ン フ ィ レ ギ ュ リ ン が RA patients の synovial cells に お い て EGF is let body シ グ ナ ル 伝 の activeness of 経 road を induced す る こ と で, synovial cell の raised colonization の hyperthyroidism を induced し て い る こ と を shows し た.

项目成果

A derivative of oleamide potently inhibits the spontaneous metastasis of mouse melanoma BL6 cells

• DOI: 10.1093/carcin/bgh208
• 发表时间: 2004-10-01
• 期刊: CARCINOGENESIS
• 影响因子: 4.7
• 作者: Ito, A;Morita, N;Nojima, H
• 通讯作者: Nojima, H

慢性関節リウマチに罹患したヒト由来の骨髄又は末梢血細胞で特異的に発現亢進している遺伝子群

一组在类风湿性关节炎患者的骨髓或外周血细胞中特异性上调的基因

• 发表时间: 2006

Mcp6, a meiois-specific coiled-coil protein of Schizosaccharomyces pombe, localizes at the spindle pole body and is required for horsetail movement.

Mcp6 是粟酒裂殖酵母 (Schizosaccharomyces pombe) 的一种减数分裂特异性卷曲螺旋蛋白，定位于纺锤体极体，是马尾运动所必需的。

• 发表时间: 2005
• 期刊: J.Cell Sci. 118(2)
• 作者: Saito;T.T.;Tougan;T.;Okuzaki;D.;Kasama;T.;Nojima;H.
• 通讯作者: H.

血管炎(anglitis)患者の血液細胞特異的遺伝子群

血管炎患者的血细胞特异性基因簇

• 发表时间: 2005

末梢血液細胞に示差的に発現されている遺伝子群、およびそれを用いた診断方法とアッセイ方法

外周血细胞中差异表达的基因组以及使用它们的诊断和测定方法

• 发表时间: 2003