アポトーシス反応を用いた内分泌攪乱化学物質の胎児期生体影響評価法の開発

开发利用细胞凋亡反应评估内分泌干扰化学物质对胎儿生物效应的方法

• 批准号: 16655061
• 负责人: 藏崎 正明
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16655061/
• 关键词: 内分泌撹乱化学物質; PC12細胞; アポトーシス; ビスフェノールA; ノニフェノール; トリブチルスズ; ノニルフェノール

従来の内分泌撹乱化学物質に関する研究は主として性ホルモン作用の生体影響とその作用機序に関して力が注がれ、生体内における他の重要な生理的機能、ことに胎児期において重要な要素である細胞の分化や増殖等にどのような影響を与えるか否かに関する研究はほとんど行なわれていない。本研究では、培養細胞系の実験系を用いて、その培養細胞に内分泌撹乱化学物質を含む環境汚染化学物質を低濃度曝露することにより、細胞の分化や増殖に重要な役割を果たしているアポトーシスにどのような影響を与えるのかを検討し、併せてその作用機序を解明することにより、環境汚染化学物質の発生分化に及ぼす影響評価法を構築しようとするものである。本年度はまず種々の濃度の内分泌撹乱化学物質(ビスフェノールA、ノニルフェノール、トリブチルスズ)をPC12細胞に加え、それらの化学物質自体がアポトーシスを誘起させるか否かを、ラダー法およびTunel法により検討したところ、その化学物質自体ではアポトーシスは誘起されないことが確かめられた。次にPC12細胞の培養培地から牛胎児血清を除いた培地を用いる系および6 Hydroxyl dopamineを培地に添加した系等アポトーシスが誘起される条件下で種々の内分泌撹乱化学物質を低濃度曝露させると、ビスフェノールAでは変化がなかったがトリブチルスズでは誘起させたアポトーシスがほぼ抑制され、ノニルフェノール添加ではアポトーシスが増強されていた。また、アポトーシス誘導に影響を与えることが確認された化学物質がどのアポトーシス経路に影響を与えているかについて検討を進めたところ、トリブチルスズはアポトーシス促進因子であるBax発現量が抑制され、ノニルフェノールはCaspaseの活性が上昇していることが確かめられた。これらの結果を併せ、環境汚染化学物質の影響評価法構築にアポトーシス反応およびアポトーシス関連因子の増減を用いることが有効であることが明らかになった。

The study of endocrine disrupting chemicals in the future is mainly related to biological effects and mechanisms of action, such as stress, other important physiological functions in vivo, important factors in fetal life, cell differentiation and proliferation, etc. In this study, we investigated the effects of endocrine-disrupting chemicals on cell differentiation and proliferation in cultured cell lines, and explained the mechanism of action of endocrine-disrupting chemicals and environmental pollutants at low concentrations. Environmental Pollution and Environmental Impact Assessment This year, the concentration of endocrine-disrupting chemicals (such as A, B, C) in PC12 cells was increased, and all chemicals in PC12 cells were induced by themselves. In culture of PC12 cells, bovine fetal serum was removed from culture medium and 6-hydroxydopamine was added to culture medium to induce low concentrations of endocrine disrupting chemicals. In addition to the above, it is possible to increase the strength of the system. The effect of chemical substances on the production of Bax and the increase of Caspase activity were confirmed. If these results are combined, it will be clear that the use of loss-related feedback and the increase or decrease of loss-related factors in the construction of the impact assessment method for environmental polluting chemicals will be effective.

项目成果

Nonylphenol enhances apoptosis induced by serum deprivation in PC12 cells.

• DOI: 10.1016/j.lfs.2003.09.066
• 发表时间: 2004-03
• 期刊: Life sciences
• 影响因子: 6.1
• 作者: M. Aoki;M. Kurasaki;T. Saito;Sayaka Seki;T. Hosokawa;Yasumitsu Takahashi;H. Fujita;T. Iwakuma

Protective effect of dietary azuki bean (Vigna angularis) seed coats against renal interstitial fibrosis of rats induced by cisplatin

• DOI: 10.1016/j.nut.2004.07.019
• 发表时间: 2005-04-01
• 期刊: NUTRITION
• 影响因子: 4.4
• 作者: Sato, S;Hori, Y;Hatai, A
• 通讯作者: Hatai, A