ヒト培養胎盤細胞を用いた血管新生に関する研究

利用培养的人胎盘细胞进行血管生成研究

• 批准号: 16659239
• 负责人: 山下 直秀
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16659239/
• 关键词: 胎盤細胞; hVEGF; bFGF; angiopoietin; 虚血マウス

私達はヒト胎盤を酵素的に処理して培養し、その上清中あるいは細胞抽出物中のヒト血管内皮成長因子(human vascular endothelial growth factor : hVEGF)を測定した。その結果、胎盤由来間葉系細胞(human placenta-derived mesenchymal cells : hPDMC)が多量のhVEGFを産生することを見い出している。胎盤は、これまで医療廃棄物として処理されてきた。しかし胎盤は有効利用可能な臓器であり、再生医療や血管新生療法のための細胞資源として極めて有用であると考えられるが、このような発想は文献や学会報告を見る限りなされていない。本研究の目的は、(1)hPDMCから産生されるhVEGFの生物活性をヒト臍帯静脈血管内皮細胞(human umbilical vein endothelial cell: hUVEC)の増殖で検討してこれを証明する、(2)hPDMCからhVEGF以外の増殖因子が産生されていないかを検討する、(3)虚血動物モデルを用い、hPDMCの細胞移植が血流を改善するか否かを検討する、の3つである。移植されたhPDMCは局所でhVEGFを産生した後、最終的には拒絶されると考えられるが、幹細胞の性質を有していれば血管内皮細胞に分化する可能性もある。これについても免疫組織化学で検討する予定である。hPDMCの細胞移植は虚血部位での局所作用性、安全性、低侵襲性の全て点から、これまで報告されているいずれの治療法よりもすぐれている。また胎盤からは大量に細胞が調整できるので、本研究の成果は、ヒトに対する副作用がなく有効で、かつ医療経済的効率の良い血管新生治療を確立させることにつながると期待される。昨年度に研究目的の(1)と(3)を中心に研究を行ったが、本年度は研究目的の(2)を中心に検討を行った。その結果、胎盤細胞の培養上清はhVEGFは、ELISAで測定したhVEGFよりも高い活性を示した。このことは胎盤細胞が産生するhVEGFが生理活性を有すことだけでなく、hUVECを増殖させる他の因子も産生していることを示唆した。他の血管新生因子をELISAやRT-PCRで検討したところbFGFやangiopoietinなども産生していることが判明した。これらの結果から、hVEGFの細胞溶解液を親水軟膏に混ぜ、マウス皮膚創傷モデルに投与したところ、創傷治癒が促進されることが明らかとなった。これらの結果より、培養胎盤細胞の用途として皮膚外用剤の可能性が示唆された。

Human vascular endothelial growth factor (hVEGF) was measured in cell extracts from cultured human placenta and supernatant. As a result, human placenta-derived mesenchymal cells (hPDMC) produce a large amount of hVEGF. Placenta, placenta, placenta The placenta has the potential to be used as a resource for regenerative medicine, angiogenesis therapy, and research. The objectives of this study were: (1) to demonstrate the proliferation of human umbilical vein endothelial cells (hUVEC) by hPDMC,(2) to investigate the production of proliferation factors other than hVEGF,(3) to investigate the use of hPDMC in hypoglycemic animals, and (3) to investigate whether hPDMC cell transplantation improves blood flow. After the transplanted hPDMC produces hVEGF, it is ultimately rejected and the nature of stem cells may change the possibility of differentiation into vascular endothelial cells. The results of immunohistochemical staining were as follows: hPDMC cell transplantation is safe, less invasive and effective in all areas of the body. The results of this study indicate that there are side effects, the effectiveness of medical treatment, and good angiogenesis therapy. Last year's research objectives (1) and (3) were conducted centrally, and this year's research objectives were conducted centrally. Results: hVEGF activity in culture supernatant of placental cells was detected by ELISA. hVEGF is physiologically active in placental cells, and hUVEC is physiologically active in other cells. His angiogenesis factor was detected by ELISA and RT-PCR. As a result, it is clear that hVEGF cell lysate can be mixed with hydrophilic ointment and administered to skin wounds, which can promote wound healing. These results indicate that placental cell culture can be used as an external skin preparation.

项目成果

A potential pro-angiogenic cell therapy with human placenta-derived mesenchymal cells.

使用人胎盘来源的间充质细胞进行潜在的促血管生成细胞疗法。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Biochem.Biophysic Res.Commun. 325
• 作者: Nishishita;T.;Ouchi;K.;Zhang;X.;Inoue;M.;Inazawa;T.;Yoshiura;K.;Kuwabara;K.;Nakaoka;T.;Watanabe;N.;Igura;K.;Takahashi;T.A.;Yamashita;N.
• 通讯作者: N.