ヒト培養胎盤細胞を用いた血管新生に関する研究

利用培养的人胎盘细胞进行血管生成研究

• 批准号: 16659239
• 负责人: 山下 直秀
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16659239/
• 关键词: 胎盤細胞; hVEGF; bFGF; angiopoietin; 虚血マウス

私達はヒト胎盤を酵素的に処理して培養し、その上清中あるいは細胞抽出物中のヒト血管内皮成長因子(human vascular endothelial growth factor : hVEGF)を測定した。その結果、胎盤由来間葉系細胞(human placenta-derived mesenchymal cells : hPDMC)が多量のhVEGFを産生することを見い出している。胎盤は、これまで医療廃棄物として処理されてきた。しかし胎盤は有効利用可能な臓器であり、再生医療や血管新生療法のための細胞資源として極めて有用であると考えられるが、このような発想は文献や学会報告を見る限りなされていない。本研究の目的は、(1)hPDMCから産生されるhVEGFの生物活性をヒト臍帯静脈血管内皮細胞(human umbilical vein endothelial cell: hUVEC)の増殖で検討してこれを証明する、(2)hPDMCからhVEGF以外の増殖因子が産生されていないかを検討する、(3)虚血動物モデルを用い、hPDMCの細胞移植が血流を改善するか否かを検討する、の3つである。移植されたhPDMCは局所でhVEGFを産生した後、最終的には拒絶されると考えられるが、幹細胞の性質を有していれば血管内皮細胞に分化する可能性もある。これについても免疫組織化学で検討する予定である。hPDMCの細胞移植は虚血部位での局所作用性、安全性、低侵襲性の全て点から、これまで報告されているいずれの治療法よりもすぐれている。また胎盤からは大量に細胞が調整できるので、本研究の成果は、ヒトに対する副作用がなく有効で、かつ医療経済的効率の良い血管新生治療を確立させることにつながると期待される。昨年度に研究目的の(1)と(3)を中心に研究を行ったが、本年度は研究目的の(2)を中心に検討を行った。その結果、胎盤細胞の培養上清はhVEGFは、ELISAで測定したhVEGFよりも高い活性を示した。このことは胎盤細胞が産生するhVEGFが生理活性を有すことだけでなく、hUVECを増殖させる他の因子も産生していることを示唆した。他の血管新生因子をELISAやRT-PCRで検討したところbFGFやangiopoietinなども産生していることが判明した。これらの結果から、hVEGFの細胞溶解液を親水軟膏に混ぜ、マウス皮膚創傷モデルに投与したところ、創傷治癒が促進されることが明らかとなった。これらの結果より、培養胎盤細胞の用途として皮膚外用剤の可能性が示唆された。

我们在其上清液或细胞提取物中对人体胎盘和培养的人血管内皮生长因子（HVEGF）进行了培养。结果，已经发现了人物衍生的间充质细胞（HPDMC）产生大量的HVEGF。胎盘先前已被视为医疗废物。但是，胎盘是一种可以有效使用的器官，被认为是再生医学和血管生成疗法的细胞资源非常有用，但是尚未基于文献或有关社会的报道提出这一想法。这项研究的目的是（1）通过检查HPDMC在人脐静脉内皮细胞增殖中产生的HVEGF的生物学活性（HUVEC）（2），以检查HVEGF以外的HVEGF以外的HPDMCS和（3）是否使用ISCHEMINE ARMEN模型来检查HPDMECTIM模型是否均未进行HPDMCTMCTMCTMCTMCTMCTMCTMCTMCTMCTMCTMCTMCTMCTMCTMCTMCTMCTMCTM。据认为，植入的HPDMC在局部产生，然后最终被拒绝，但是如果它们具有干细胞特性，它们可能会分化为血管内皮细胞。这也将通过免疫组织化学进行检查。 HPDMC细胞移植在缺血部位的局部作用，安全性和微创性方面优于任何先前报道的治疗方法。此外，由于可以从胎盘中调节大量细胞，因此这项研究的结果有望导致为人类建立有效，有效且经济高效的新生血管疗法。去年，出于研究目的，我们专注于（1）和（3），但是今年我们专注于（2）出于研究目的。结果，胎盘细胞培养上清液中的HVEGF的活性高于ELISA测量的HVEGF。这表明由胎盘细胞产生的HVEGF不仅具有生理活性，而且是其他生长HUVEC的因素。使用ELISA和RT-PCR检查了其他血管生成因子，并发现还产生了BFGF和血管生成素。这些结果表明，当将HVEGF细胞裂解物与亲水性软膏混合并给予小鼠皮肤伤口模型时，促进了伤口愈合。这些结果表明，可以将外部皮肤药物用于培养的胎盘细胞。

项目成果

A potential pro-angiogenic cell therapy with human placenta-derived mesenchymal cells.

使用人胎盘来源的间充质细胞进行潜在的促血管生成细胞疗法。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Biochem.Biophysic Res.Commun. 325
• 作者: Nishishita;T.;Ouchi;K.;Zhang;X.;Inoue;M.;Inazawa;T.;Yoshiura;K.;Kuwabara;K.;Nakaoka;T.;Watanabe;N.;Igura;K.;Takahashi;T.A.;Yamashita;N.
• 通讯作者: N.