下垂体前葉ホルモン分泌の情報伝達に関するイオンチャネルの研究

垂体前叶激素分泌信息传递相关离子通道的研究

• 批准号: 06671004
• 负责人: 山下 直秀
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06671004/
• 关键词: 下垂体前葉; Ca^<2+>; SRIF; K^+チャネル

下垂体前葉ホルモンの分泌にはcAMP、IP3、c-kinase、Ca^<2+>等の細胞内セカンドメッセンジャーが重要な役割を果している。これらのセカンドメッセンジャーの中でも細胞内Ca^<2+>が前葉細胞からのホルモン分泌に密接に関わっていることは良く知られた事実である。下垂体前葉は神経細胞と同様に活動電位を発生する。細胞内Ca^<2+>濃度はこの活動電位発生の際、電位依存性Ca^<2+>チャネルを通るインフラックスや細胞内Ca^<2+>プールからの動員によって調節されている。特に持続的なホルモン分泌には細胞外からのCa^<2+>インフラックスが重要であるが、このインフラックスの調節には活動電位の発射頻度と電位依存性Ca^<2+>チャネル電流の大きさの2つが関与している。本年度はヒトTSH産生腫瘍をとりあげSRIFの作用機構について検討した。ヒトTSH産生腫瘍ではSRIF投与によりTSH分泌が抑制されるが、その抑制反応にイオンチャネルが関与しているかを電気生理学的手法を用いて検討した。手術的に得られたヒトTSH産生腫瘍を酵素的に単離し、10%牛胎児血清を含むDME培地で培養した。電気生理学的手法としてはwhole cell clamp法を用いた。電流固定法下でTSH産生細胞は自発的活動電位を発射していた。SRIF投与により膜は過分極し、活動電位の発生が抑制された。この時膜の抵抗は減少しており、何らかのイオン透過生が亢進したと考えられた。電圧固定法で調べると、この透過性の変化するイオンの反転電位は約-80mVであり、細胞外液のカリウム濃度を変化させるとNernstの式に従って反転電位がシフトした。よって透過性が亢進したチャネルはカリウムチャネルであると結論された。細胞内にGTPγSを投与するとSRIFの存在なしにカリウムチャネルが開口した。また細胞内にGDPβSを投与するとSRIFによるカリウムチャネルの活性化が抑制された。百日咳毒素の前処置もSRIFによるカリウムチャネルの活性化を抑制した。以上よりヒトTSH産生細胞においてSRIFは百日咳毒素感受性G蛋白を介してカリウムチャネルを活性化することが明らかとなった。このチャネルの活性化によりCa依存性活動電位が抑制され、TSH分泌が減少すると結論された。

The secretion of cAMP, IP3, c-kinase and Ca^<2+> in the anterior lobe of the pituitary gland is an important part of the intracellular process. In the middle of the cell, Ca^<2+> is secreted from the anterior lobe cells. The anterior lobe of the pituitary gland generates the same activity potential. Intracellular Ca ^<2+> concentration is regulated during activation potential generation and potential-dependent Ca^<2+> generation. The regulation of extracellular Ca^<2+> 2 +-Ca^<2+> 2 +-Ca^<2+> 2 +^<2+ This year, TSH has caused swelling, and SRIF's role has been discussed. TSH production is inhibited by SRIF administration, and the inhibition of TSH secretion is investigated by electrophysiological methods. TSH was produced in the presence of 10% fetal bovine serum. The whole cell clamp method is used in electrophysiology. Under the current fixation method, TSH producing cells emit activity potentials spontaneously. SRIF is applied to the membrane to inhibit the generation of active potential. This time the membrane resistance is reduced, how to open the door, through the production of high temperature. The reverse potential of the membrane is about-80 mV when the membrane is regulated by the voltage fixation method, and the reverse potential of the membrane is about-80 mV when the membrane concentration of the extracellular fluid is changed. The result is that there is no such thing as a transparent process. The existence of SRIF in the intracellular GTPγS release process The activation of intracellular GDPβS is inhibited by SRIF. Pertussis Toxin (PT) is a precursor to SRIF. SRIF mediates the activation of pertussis toxin-sensitive G proteins in TSH producing cells. Conclusion: Ca-dependent activity potential was inhibited and TSH secretion was decreased during the activation of the cell.

项目成果

Naohide Yamashita,Tomoe Ishii,Etsuro Ogato,toshio Matsumoto: "Inhbition of inwardly roctitpry k^+ carrnt by external Ca^<2+> ions in freshly isolated rafbit osteochsts" Journal of phyoiology. 480. 217-224 (1994)

Naohide Yamashita、Tomoe Ishii、Etsuro Ogato、toshio Matsumoto：“新鲜分离的拉夫比特骨箱中外部 Ca^<2> 离子对内向 roctitpry k^ 的抑制”《植物学杂志》。

Koji Takano,Etsuro Ozato,Naohide Yamashita: "Effect of activin A on ionic channels in human FSH-secreting-tumor cells" Journal of physiology. 474. 65-73 (1994)

Koji Takano、Etsuro Ozato、Naohide Yamashita：“激活素 A 对人类 FSH 分泌肿瘤细胞离子通道的影响”生理学杂志。

Koji Takano,Shigetaka Osano,Naohide Yamashita: "Activation of G protein-coupled k^+ by dozamoru in human FSH-producing cells" American Journal of phyoiology. 266. E318-E325 (1994)

Koji Takano、Shigetaka Osano、Naohide Yamashita：“在人类 FSH 产生细胞中 dozamoru 激活 G 蛋白偶联 k^”美国生理学杂志。