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多機能ウイルス遺伝子EIAを用いた転写因子制御の膵癌転移抑制療法

利用多功能病毒基因EIA进行转录因子调节的胰腺癌转移抑制治疗

基本信息

批准号：
16659349
负责人：
砂村眞琴
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16659349/
关键词：
転写因子 E1A HIF p300 アデノウイルス VEGF 血管新生

项目摘要

【目的】癌細胞の悪性形質に関わる複数の遺伝子発現を調節するには、遺伝子発現を支配する転写因子を制御することにより可能になる。我々が着目したのは、アデノウイルスが増殖に際して発現するE1A遺伝子である。本研究で、VEGF等の血管新生因子やMMPなどの浸潤関連遺伝子の発現に重要な転写因子Hypoxia Inducible Factor(HIF), Etsなどに共通して必須な因子p300にE1Aが結合することを利用し、腫瘍血管新生や浸潤能を制御することである。さらにウイルスのファイバーノブをRGD構造に改変しアデノウイルスベクターの導入効率を改善させる。【方法】膵癌細胞4種に対し様々なE1Aをもつアデノウイルスベクター5種を感染させ、1)ウイルス感染、低酸素負荷時のVEGF濃度の測定(ELISA法),VEGF mRnAの発現(RT-PCR法)、2)E1A, p300による免疫沈降実験、3)皮下腫瘍モデルにおける腫瘍血管新生の検討を行った。また、4)RGD改変ファイバーを有するアデノウイルスの感染効率を野生型ウイルスと比較した。【結果】1)低酸素刺激によりp300結合部位をもたないE1A発現細胞ではVEGF蛋白,mRNAの発現が高まり、野生E1A発現細胞では未刺激時の時同等に抑制された。2)免疫沈降実験でp300結合部位をもたないE1A発現細胞ではp300との結合が低下し、E1A発現細胞での低酸素時VEGF低下にはE1A, p300の結合の関与が示唆された。3)in vivoでもp300結合部位をもたないウイルス感染細胞では野生E1A群に比べ血管新生が強く認められた。4)RGD改変ファイバーを有するアデノウイルスでは有意に感染効率が改善した。【考察】野生E1Aを発現する制限増殖型アデノウイルスにより腫瘍血管新生を抑制できる可能性が示唆された。また、改変RGDファイバーを有する制限増殖型アデノウイルスは効果的な治療手段となると考えられた。

[Objective] Cancer cell morphology is related to the regulation of multiple gene expression, and gene expression is controlled by gene expression. We are looking forward to seeing you again and again. In this study, VEGF and other angiogenic factors, MMP and MMP are important factors in the development of invasion-related genes. Hypoxia Inducible Factor(HIF), Ets and p300, E1A are common factors in tumor angiogenesis and invasion inhibition. In addition, the introduction rate of RGD structure is improved. [Methods] Four kinds of E1A were detected in four kinds of cancer cells, five kinds of E1A were detected in five kinds of cancer cells, 1) VEGF concentration was measured in four kinds of cancer cells infected with E1A and hypoallergenic load (ELISA method),VEGF mRnA expression was detected by RT-PCR method, 2) E1A, p300 was detected by immunoprecipitation, 3) angiogenesis in subcutaneous tumor cells was studied. 4) The infection rate of RGD is higher than that of wild type. [Results] 1) VEGF protein and mRNA expression were higher in E1A-expressing cells when p300 binding sites were activated by hypoxia stimulation, and wild E1A-expressing cells were equally inhibited when not stimulated. 2)The binding site of p300 in E1A-producing cells was detected by immunoprecipitation. The binding of p300 was decreased in E1A-producing cells. VEGF was decreased in E1A-producing cells when the binding site of p300 was detected. 3)In vivo, p300 binding sites are identified in infected cells, which are stronger than wild-type E1A angiogenesis. 4)RGD modification has a negative impact on infection rates. [Investigation] The possibility of inhibiting angiogenesis in wild E1A is shown. The RGD is the most effective method of treatment.

项目成果

期刊论文数量（10）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

制限増殖型アデノウイルスによる癌治療

使用限制性腺病毒治疗癌症

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Surgery Frontier 12(1)
影响因子：
0
作者：
元井冬彦;江川新一;他
通讯作者：
他

Antiangiogenic activity of BAI1 in vivo:: implications for gene therapy of human glioblastomas

DOI：
10.1038/sj.cgt.7700898
发表时间：
2006-04-01
期刊：
CANCER GENE THERAPY
影响因子：
6.4
作者：
Kang, X;Xiao, X;Tani, K
通讯作者：
Tani, K

Oncolytic Virotherapy as a Novel Strategy for Pancreatic Cancer

DOI：
10.1097/00006676-200404000-00022
发表时间：
2004-04
期刊：
Pancreas
影响因子：
2.9
作者：
M. Sunamura;H. Hamada;F. Motoi;M. Oonuma;H. Abe;Y. Saitoh;T. Hoshida;Shigeru Ottomo;N. Omura;S. Matsuno
通讯作者：
M. Sunamura;H. Hamada;F. Motoi;M. Oonuma;H. Abe;Y. Saitoh;T. Hoshida;Shigeru Ottomo;N. Omura;S. Matsuno

Oncolytic replication-competent adenovirus suppresses tumor angiogenesis through preserved E1A region