多彩な遺伝子異常に対応可能な風邪ウイルスを用いた癌の治療

使用可治疗各种基因异常的感冒病毒进行癌症治疗

基本信息

批准号：
12877187
负责人：
砂村眞琴
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12877187/
关键词：
アデノウイルス遺伝子治療癌 P53遺伝子 RB遺伝子

项目摘要

【背景】アデノウイルスベクターを用いた癌の遺伝子治療ではいかに多くの腫瘍細胞にウイルス感染を誘導できるかが問題となる。解決策の一つとして制限増殖型のE1B55kを欠失した変異アデノウイルス(ONYX-015)が開発され、その有用性が既に報告されている。しかし、ONYX-015はP53経路に異常のある癌細胞でのみ有効て、全ての癌に適応があるとはいえない。癌細胞ではP53経路またはRB経路に異常が存在するため、RB経路を標的とする治療戦略も有用と考える。【目的】早期発現遺伝子E1Aに変異が存在すると、アデノウイルスはRB/E2F解離が誘導できずに正常細胞では増殖しない。しかし、RB経路に異常が存在する癌においてはRBからE2Fが遊離するため、このE1A変異アデノウイルスは増殖可能となり殺腫瘍効果を示すことが報告されている。本研究ではE1B55kのみならず、E1Aにも変異の存在するアデノウイルス(AxdAdB-3)を作製し、膵癌に対する抗腫瘍効果を検討レた。さらに、E1Aの血管新生抑制作用についても検討を加えた。【結果】1)cytopathic effect assayでヒト膵癌細胞8株(PK-1, PK-8, AsPC-1, PANC-1, BxPC-3, PCl-19, PCl-35, MiaPaCa-2)の膵癌細胞に対する殺細胞効果が認められ、ヒト正常線維芽細胞Wl-38では認められなかった。2)in vitroでのウイルス増殖能、感染効率はhexon proteinを用いた免疫染色にてONYXと同程度であることが確認された。3)アポトーシス誘導能はflow CytometoryにてONYXよりも強いことが確認された。4)SCiDマウスPCモデルで抗腫瘍効果はONYX-015よりも強いことが確認された(n=10per groups)。5)E1AはVEGFの発現を抑制し、血管新生を抑制した。【まとめ】変異アデノウイルスは癌細胞で特異的に増殖し、癌の遺伝子変異の違いに関わらず強い抗腫瘍作用を示した。この変異アデノウイルスをベクターとして活用する遺伝子治療を開発したい。

[背景]问题是使用腺病毒载体的癌症基因治疗如何在许多肿瘤细胞中诱导病毒感染。一种解决方案是一种突变腺病毒（Onyx-015），它删除了E1B55K的限制性生长，其实用性已经报道。但是，Onyx-015仅在p53途径异常的癌细胞中有效，不能说是所有癌症的适应症。由于癌细胞中p53或RB途径中存在异常，因此靶向RB途径的治疗策略也被认为是有用的。目的：当突变存在于早期表达的基因E1a中时，腺病毒不能诱导RB/E2F解离，并且在正常细胞中不会增殖。但是，在RB途径异常的癌症中，E2F从RB中释放出来，该E1A突变腺病毒可能会增殖，并据报道表现出肿瘤化学作用。在这项研究中，我们产生了腺病毒（AXDADB-3），该病毒不仅在E1B55K中而且在E1A中也具有突变，并检查了针对胰腺癌的抗肿瘤作用。此外，还研究了E1A的抗血管生成作用。 [结果] 1）细胞质效应测定法显示了八个人胰腺癌细胞（PK-1，PK-8，ASPC-1，PANC-1，PANC-1，BXPC-3，PCL-19，PCL-35，MIAPACA-2）的细胞杀死作用，对胰腺癌细胞没有对正常的人体纤维纤维纤维纤维纤维纤维菌WL-38的观察。 2）通过使用己酮蛋白进行免疫染色，证实体外病毒增殖能力和感染效率与Onyx相似。 3）已经证实，诱导凋亡的能力强于流式细胞仪中的玛瑙。 4）在SCID小鼠PC模型中，证实抗肿瘤效应比Onyx-015的抗肿瘤效应（n = 10％）。 5）E1a抑制了VEGF的表达并抑制了血管生成。 [摘要]突变腺病毒在癌细胞中特异性增殖，并表现出强烈的抗肿瘤作用，而与癌症遗传突变的差异无关。我想开发一种使用这种突变腺病毒病毒作为载体的基因疗法。