PLC活性のリアルタイム測定法を用いた細胞内シグナルのクロストニクの解析
使用实时测量 PLC 活动来分析凝集细胞内信号
基本信息
- 批准号:17650112
- 负责人:
- 金额:$ 1.98万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Exploratory Research
- 财政年份:2005
- 资助国家:日本
- 起止时间:2005 至 2007
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
1.細胞内シグナル伝達系間のクロストークを調べるために,1個の細胞内のシグナル伝達の大きさをリアルタイムでモニターする方法の開発を試みた。初年度は,PLCの代謝産物であるジアシルグリセロールにより活性化されるチャネル(TRPC6チャネル,を培養海馬ニューロンに強制発現させ,PLC活性をモニターする方法を用いて実験を行った。その過程で,内因性カンナビノイド放出量がGq共役型受容体-PLCbetaシグナル伝達系の活性を反映することが明らかとなった。そこで次年度は1個の細胞から放出される内因性カンナビノイド量を電気生理学的方法によりモニターするという方法を用いて,Gq共役型受容体-PLCbetaシグナル伝達系とNMDA型グルタミン酸受容体-Ca2+シグナル伝達系の聞のクロストークについて調べた。本年度は,Gq共役型受容体-PLCbetaシグナル伝達系をモニターする別の系の開発を試みた。2.培養海馬ニューロンにmAChRアゴニストを投与すると、多くの細胞では一過性の脱分極が発生した。この効果は、PLC阻害剤により抑制されることから、Gq共役型受容体-PLCbetaシグナル伝達系を介していると考えられた。またmAChRアゴニスト投与による脱分極の大きさが細胞内Ca2+濃度に依存すうことが判明した。よって、Gq共役型受容体-PLCbetaシグナル伝達系とMDA型グルタミン酸受容体-Ca2+シグナル伝達系の間のクロストークを、この脱分極信号を指標にして調べることも可能であると考えられた。PLCbetaの基質であるPIP2の濃度変化に鋭敏に反応するチャネルを強制発現することにより、より感度の高いモニター系を開発することができると期待される。
1. The development of a new method for the regulation of intracellular protein expression in a cellular system was studied. In the early years, the method of PLC activity regulation was carried out by using the method of PLC metabolite regulation (TRPC6), stress regulation in cultured hippocampus and PLC activity regulation. In the process, the intrinsic emission is reflected in the activity of the receptor-PLCbeta. In the next year, one cell was released from the cell. The method of electrophysiology was used. Gq co-active receptor-PLCbeta receptor-NMDA-type receptor-Ca 2+ receptor-NMDA-type Ca2+ receptor-Ca This year, the development of Gq shared receptors-PLCbeta-is being tested. 2. In cultured hippocampus, the mAChR cells were injected into the medium, and many cells were transiently depolarized. The result is that the PLC-beta receptor system can be used to inhibit the proliferation of PLC-beta receptors. The concentration of Ca2 + in cells depends on the concentration of Ca2 + in cells. A common service receptor-PLCbeta type receptor-MDA type receptor-Ca2 + type receptor-Ca Changes in the concentration of PIP2 in PLCbeta matrix cause acute reaction, stress, and high sensitivity to the development of the system.
项目成果
期刊论文数量(16)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Pharmacological evidence for the involvment of diacylglycerol lipase in depolarization-induced endocannabinoid release
二酰甘油脂肪酶参与去极化诱导的内源性大麻素释放的药理学证据
- DOI:
- 发表时间:2008
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Seya;T.;et al.;Yuki Hashimotodani
- 通讯作者:Yuki Hashimotodani
Presynaptic monoacylglycerol lipase activity determines basal endocannabinoid tone and terminates retrograde endocannabinoid signaling in the hippocampus
- DOI:10.1523/jneurosci.4159-06.2007
- 发表时间:2007-01-31
- 期刊:
- 影响因子:5.3
- 作者:Hashimotodani, Yuki;Ohno-Shosaku, Takako;Kano, Masanobu
- 通讯作者:Kano, Masanobu
Calcium signaling and synaptic modulation: Regulation of endocannabinoid-mediated synaptic modulation by calcium
- DOI:10.1016/j.ceca.2005.06.014
- 发表时间:2005-09-01
- 期刊:
- 影响因子:4
- 作者:Ohno-Shosaku, T;Hashimotodani, Y;Kano, M
- 通讯作者:Kano, M
Endocannabinoid signalling triggered by NMDA receptor-mediated calcium entry into rat hippocampal neurons
NMDA 受体介导的钙进入大鼠海马神经元触发内源性大麻素信号传导
- DOI:
- 发表时间:2007
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Ohno-Shosaku T;Hashimotodani Y;Ano M;Takeda S;Tsubokawa H;Kano;M
- 通讯作者:M
逆行性シナプス伝達抑制における内因性カンナビノイドである2-アラキドノイルグリセロールの産生と分解
2-花生四烯酰甘油(一种内源性大麻素)的产生和降解,抑制逆行突触传递
- DOI:
- 发表时间:2008
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:原田武志;鳴島円;谷村あさみ;河村吉信;谷村あさみ;上阪直史;上窪 裕二;橋本谷裕樹
- 通讯作者:橋本谷裕樹
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少作 隆子
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