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小胞構成蛋白の網羅的解析による糖輸送担体の制御機構および糖尿病における障害の解明

通过囊泡组成蛋白的综合分析阐明糖转运载体和糖尿病疾病的控制机制

基本信息

批准号：
17659273
负责人：
浅野知一郎
金额：
$ 1.92万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

GLUT4、LDL受容体、インスリン受容体含有小胞特異的蛋白の構造及び機能の解析GLUT1及びGLUT4のC末端にMEFタグを取り付けた蛋白をコードするcDNAを作成し、これらを発現するアデノウイルスを作製した。これを3T3-L1脂肪細胞や培養筋肉細胞に発現させ、MEFタグによって、高純度の蛋白含有小胞を精製する計画であったが、局所へのアデノウイルス注入で、高い効率での発現が容易には得られなかった。そこで、LacZのアデノウイルスを用い、多くの条件で検討することによって、副睾丸上脂肪組織全体に高い効率で発現させる条件を樹立できた。これから、GLUT1及びGLUT4を脂肪組織に発現させる検討を行う段階である。GLUT1とGLUT4が細胞内で際だって異なる分布を示すことから、脂肪細胞から特異的な含有小胞を分離できれば、有望な計画である。この困難点は、脂肪細胞に高い効率で発現させることである。我々は、この困難を克服するために、LacZのアデノウイルスを多くの条件でマウス脂肪組織に導入し、ついに、副睾丸上脂肪組織全体に比較的高い発現を得る条件設定を得た。しかし、1年間という短い期間にしては、研究は進展し、これからの成果が楽しみな状況になっており、今後も最善の努力を行っていきたいと考えている。

Analysis of the structure and function of GLUT4, LDL receptor, and insulin receptor containing cellular-specific proteins The C-terminal MEF segments of GLUT1 and GLUT4 are extracted from the protein to produce cDNA, and the devices used to develop them have been developed. The 3T3-L1 adipocytes and muscle cells were found to have high purity protein and cell purification. The conditions for the occurrence of high percentage of total epididymal fat are established. GLUT1 and GLUT4 are found in subcutaneous fat. GLUT1 and GLUT4 show the distribution of intracellular differences, adipocytes contain specific vesicles, and are expected to be isolated. The difficulty point is that fat cells are highly effective. We have to overcome these difficulties and set the conditions for the introduction of subcutaneous fat into the testis and the appearance of subcutaneous fat in the testis. 1 year, 1 year, 1