キメラ受容体遺伝子導入による白血病細胞療法の効果増強

通过引入嵌合受体基因增强白血病细胞治疗的功效

• 批准号: 14030082
• 负责人: 久米 晃啓
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14030082/
• 关键词: 遺伝子治療; 移植・再生医療; トランスレーショナルリサーチ; 癌; 免疫学

同種造血幹細胞移植およびドナーリンパ球輸注療法などの「細胞療法」は難治性造血器腫瘍に対する切り札的治療法であるが、その成功・不成功の鍵を握っているのがドナー細胞の生着確保と、副作用である移植片対宿主病(GVHD)の制御である。これら細胞療法を安全かつ効果的に施行するため、キメラ受容体遺伝子導入により人為的に造血細胞増殖を促進したり細胞死を誘導するシステムを開発した。1.移植した血液細胞の増殖促進装置として、エストロゲンに反応して顆粒球コロニー刺激因子受容体シグナルを発するキメラ分子(GcRER)と、エリスロポエチンに反応してトロンボポエチン受容体(Mpl)のシグナルを発するキメラ分子(EpoRMpl)を構築し、X連鎖型慢性肉芽腫症(X-CGD)モデルマウスを用いて生体内増幅効果を検討した。X-CGD骨髄細胞に治療用gp91遺伝子をGcRER遺伝子またはEpoRMpl遺伝子と共に導入後、X-CGDレシピエントに移植し、エストロゲンまたはエリスロポエチンを投与した。薬剤投与群では機能回復した好中球が有意に増加し、遺伝子導入細胞の体内増幅が可能であることを示した。2.移植片対宿主病の克服のために、アポトーシス誘導分子Fasにエストロゲンに反応する分子スイッチをつけた融合蛋白質(MfasER)遺伝子を構築し、細胞傷害性Tリンパ球株CTLL-2に導入した。MfasER発現CTLL-2にエストロゲンを添加して融合蛋白質を活性化すると急激な細胞死が誘導され、これに伴ってキラー活性が大きく阻害された。同時に、細胞傷害活性に与る機能分子であるパーフォリン及びFasリガンドの発現も著減した。MfasER融合蛋白質を利用した細胞死誘導はエストロゲン投与後極めて短時間のうちにおこり、しかも単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼ遺伝子とガンシクロビルを組み合わせた自殺誘導系と異なり細胞のDNA合成に依存しないため、急性だけでな慢性移植片対宿主病の制御にも適すると考えられる。

Allogeneic hematopoietic stem cell transplantation and allogeneic infusion therapy have been used to treat refractory hematopoietic tumors. The key to success and failure is to ensure the survival of allogeneic stem cells and to control graft versus host disease (GVHD). This cell therapy is safe for the implementation of the results, including the introduction of receptor genes, the promotion of hematopoietic cell proliferation, and the induction of cell death. 1. Transplantation of blood cells to promote the growth of the device, and to promote the development of granulocyte stimulating factor receptor (GcRER), and to promote the development of granulocyte stimulating factor receptor (Mpl), and X-linked chronic granulomatosis (X-CGD), and to promote the development of in vivo amplification effect. X-CGD bone marrow cells are treated with gp91 gene, GcRER gene and EpoRMpl gene. After introduction, X-CGD bone marrow cells are transplanted, and the gene is transferred. The function of the cell and the group is restored. The cell is intentionally increased. The cell is introduced into the body. 2. Transplantation to overcome host disease, the induction of Fas gene, anti-Fas gene, fusion protein (MfasER) gene construction, cell injury T gene and CTLL-2 gene introduction MfasER expresses CTLL-2 in the presence of fusion proteins that stimulate cell death and inhibit its activity. At the same time, cell injury activity and the development of functional molecules are reduced. MfasER fusion protein is used to induce cell death, and to control acute and chronic graft host diseases.

项目成果

Kume A et al.: "In vivo expansion of transduced murine hematopoietic cells with a selective amplifier gene"The Journal of Gene Medicine. (in press).

Kume A 等人：“用选择性放大器基因对转导的小鼠造血细胞进行体内扩增”《基因医学杂志》。

Hanazono Y et al.: "In vivo selective expansion of gene-modified hematopoietic cells in a nonhuman primate model"Gene Therapy. 9(16). 1055-1064 (2002)

Hanazono Y 等人：“在非人类灵长类动物模型中体内选择性扩增基因修饰造血细胞”基因治疗。

Asano T et al.: "Highly efficient gene transfer into primate embryonic stem cells with a simian lentivirus vector"Molecular Therapy. 6(2). 162-168 (2002)

Asano T 等人：“用猿猴慢病毒载体将基因高效转移到灵长类胚胎干细胞中”分子疗法。

Kume A et al.: "Selective expansion of transduced cells for hematopoietic stem cell gene therapy"International Journal of Hematology. 76(4). 299-304 (2002)

Kume A 等人：“用于造血干细胞基因治疗的转导细胞的选择性扩增”国际血液学杂志。

Kume A et al.: "Selective growth advantage of wild-type lymphocytes in X-linked SCID recipients"Bone Marrow Transplantation. 30(2). 113-118 (2002)

Kume A 等人：“X 连锁 SCID 受体中野生型淋巴细胞的选择性生长优势”骨髓移植。