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生体膜間オリゴ糖輸送におけるキャリアリピドのフリップ-フロップ転移過程の分子解析

生物膜间寡糖转运过程中载体脂质翻转过程的分子分析

基本信息

批准号：
18655067
负责人：
古山種俊
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

真正細菌のペプチドグリカン層やリポ多糖などの生合成においては、糖キャリア脂質と呼称されるポリプレニルリン酸が親水性のペンタペプチドオリゴ糖などの輸送体として機能しており、高度に疎水的なリン脂質で構成される細胞膜間の動的反転輸送を行なっている。この、フリップ・フロップと呼ばれる細胞膜間の動的糖鎖輸送によって、細胞質で生合成された親水性のペンタペプチドオリゴ糖などを細胞表面にフリップ・フロップ輸送した後に、ウンデカプレニルリン酸の細胞質側への回収反応を触媒する酵素が存在しないと、細菌の高度に効率的な細胞分裂に伴う生活環を維持できない。この糖キャリア脂質の回収のためのフリップ・フロップ反応の存在を証明するために、NBD基を蛍光団とした蛍光ラベル基質を合成した。この蛍光プローブ基質を用いて、生体脂質二重膜の内層および外層に蛍光プローブ基質を導入させた後インキュベーションし、さらにジチオナイトを添加して細胞外層表面の蛍光を消失させ、その状態における蛍光光度を定量化することによる回収反応の測定法を確立したので、この測定法を枯草菌Bacillus Subtilisの細胞膜の内側に取り込ませたプローブの蛍光強度から蛍光プローブの取り込み活性を評価した。この系にトリプシンを添加してプロテアーゼ処理を行うと、プローブの取り込み活性が低下したが、この系にプロテアーゼ阻害薬を加えると取り込み活性の低下は回復した。このことから、このプローブの取り込み過程にはある種のタンパク質が関与していることを示唆する証明がなされた。

In true bacteria, there is a complex of polysaccharides, polysaccharides, lipids, and hydrophilic acids. The complex of polysaccharides, polysaccharides, and lipids is a functional, highly hydrophilic lipid complex that is responsible for the transport of intracellular lipids. The presence of enzymes in the cytosolic chain reaction between the cellular membrane and the cellular surface, in the cytosolic chain reaction between the cytosolic chain reaction and the cytosolic chain reaction, in the The existence of sugar and lipid complexes is demonstrated by the synthesis of NBD and NBD. The measurement method of fluorescence intensity of the outer layer of the cell surface was established after the introduction of the fluorescence intensity matrix into the inner and outer layers of the lipid double membrane. This assay evaluates the activity of light from the inner membrane of Bacillus Subtilis. This is the first time that we've had a chance to recover. This is the first time I've ever seen a woman.

项目成果

期刊论文数量（17）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

ファイバー:スーパーバイオミメテックス〜近未来の新技術創生〜

纤维：超级仿生~不久的将来创造新技术~

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
影响因子：
0
作者：
江川晴香;市川善康;高橋征司
通讯作者：
高橋征司

Novel fluorescent analogues for transmembtrane movement study of polyprenyl phosphates

用于聚异戊二烯磷酸酯跨膜运动研究的新型荧光类似物

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
Bioorg. Med. Chem. Lett. 17
影响因子：
0
作者：
Tamiyo KONDO;近藤民代;近藤民代;近藤民代;K. Fujikura;K. Koseki;A. Phatthiya;K.Koseki
通讯作者：
K.Koseki

Novel fluorescent analogues for transmembrane movement study of polyprenyl phosphates

用于聚异戊二烯磷酸酯跨膜运动研究的新型荧光类似物

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
Bioorg. Med. Chem. Lett. 17
影响因子：
0
作者：
伊藤耕一;Takehiro Suzuki;Keitaro Fujikura;K. Fujikura;K. Fujikura;T. Suzuki;K. Koseki
通讯作者：
K. Koseki

Structure and function of cis-prenyl chain elongating enzymes