複数の性的表現型を持つ性転換魚類の遺伝様式解析のための実験モデル創出

多性表型变性鱼遗传模式分析实验模型的建立

基本信息

批准号：
19658078
负责人：
松山倫也
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

前年度に高密度培養したS型ワムシをホシササノハベラ仔魚に与えたが、開口直後の仔魚はワムシを食べず、本種仔魚の初期餌料としてワムシは不適切であることが判明した。20年度は、初期餌料としてイワガキのトロコフォア幼生を用いた仔魚飼育を試みた。9月中旬にホシササノハベラIPメスとTPオスのから得た受精卵を50リットル水槽に投入し、酸素通気を行った止水で飼育した。開口前の孵化後2日目に餌の投入を開始した。水産実験所周辺に自生するイワガキを採集し、卵巣と精巣をメスでカットしたのち、にじみ出てきた卵と精子を用いて人工授精を行った。イワガキは受精後約1日でトロコフォア幼生になり、活発な遊泳が認められた。30μm径のネットで集め、10,000個/50L程度のトロコフォア幼生を仔魚飼育水槽に投入した。その結果、80%以上の仔魚において摂餌が認められた。実験はイワガキの繁殖期が終わる9月下旬まで、計4回行ったが、孵化後約2週間を過ぎて生存する仔魚は認められなかった。このように、ホシササノハベラの孵化仔魚は、イワガキのトロコフォア幼生を摂餌したが、アルテミア等の次の餌料系列に入るまで、生存させることができなかったため、本研究期間において、当初の計画を達成することができなかった。しかしながら、本種の日周配偶子形成における生殖腺刺激ホルモン(GtH)の制御機構において、きわめて興味深い発見がなされた。すなわち、卵濾胞における2種GtH受容体(FSHRおよびLHR) mRNAの発現量をReal-time PCRにより調べた結果、卵黄形成前期の卵濾胞で高く発現していたfshr量は卵黄形成後期では低下した。一方、lhrの発現量は卵黄形成前期の卵濾胞では低かったが、卵黄形成後期および核移動前期で増大した後、核移動後期で急激に減少した。このように、血中に放出されている2種のGtEに同時に曝露される各種卵濾胞では、発達段階に応じたGtH受容体の発現調節によりGtHの作用が制御されていることが明らかとなった。

上一年以高密度培养的S型romatophyllum被喂给幼虫，但是开放后立即幼虫没有吃过romatophyllum，并且发现romatophyllum是这种幼虫物种的初始饲料。在2020年，我们试图使用沙丁鱼的tro鼠幼虫作为初始饲料来饲养幼虫。在9月中旬，将从Hoshisasanohabera的IP雌性和TP雄性获得的受精卵倒入一个50升水族馆中，并将其保存在止水器中，并通风。喂食是在孵化前的第二天开始的。收集了渔业实验室周围野生蜡的风暴蜡，并用雌性切割卵巢和睾丸后，然后使用渗出的卵和精子人为地将它们人为地聚合在一起。施肥后约一天，沙丁鱼变成了tro片幼虫，并能够积极游泳。他们将它们收集在直径30μm的网中，并将约10,000个大约50升的小子幼虫放在幼虫繁殖罐中。结果，在超过80％的幼虫中观察到喂养。该实验进行了四次，直到9月下旬，当时沙丁鱼的繁殖季节结束了，但是在孵化后约两周内没有发现幼虫生存。因此，Hoshisasanohabera的孵化幼虫给了沙丁鱼的tro片幼虫，但是直到他们进入下一个喂养系列（例如Artemia），他们才能生存，因此在本研究期间无法实现最初的计划。然而，在该物种的昼夜配子发生中，促性腺激素（GTH）的调节机理中已经提出了非常有趣的发现。换句话说，通过实时PCR检查了卵子卵泡中两个GTH受体（FSHR和LHR）mRNA的表达水平，而在Yolk形成的早期阶段，在卵形的早期阶段，FSHR的量在卵形的晚期下降。另一方面，在蛋黄形成的早期卵泡中，LHR的表达水平较低，但在蛋黄形成和核前迁移的后期增加，然后在核迁移的后期急剧下降。因此，已经揭示了在各种卵子中，同时暴露于血液中释放的两种类型的GTE中，GTH的作用是通过根据发育阶段控制GTH受体的表达来调节的。