グルタミン酸トランスポーター賦活化遺伝子の網羅的探索と神経保護メカニズムの解明

全面寻找谷氨酸转运蛋白激活基因并阐明神经保护机制

• 批准号: 19659455
• 负责人: 原田 高幸
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19659455/
• 关键词: 遺伝子; 発現制御; 神経保護; 網膜; グルタミン酸; 緑発現制御

これまでに我々は、培養Muller細胞にグルタミン酸を負荷した場合の遺伝子発現の変化をマイクロアレイで網羅的に探索し、その結果として複数の遺伝子発現が上昇することを見出した。このうちインターロイキン-1b(IL-1b)およびtumor necrosis factor a(TNFa)の蛋白発現量は虚血網膜のMuller細胞において有意に上昇していた。さらにその後の細胞レベルでの検討からIL-1bおよびTNFaの両者が、GLASTおよびGLT-1によるMuller細胞へのグルタミン酸取りこみ量を増大させることを突き止めた。本年度はIL-1bおよびTNFaからグルタミン酸トランスポーターへの作用機序の検討を行った。その後GLASTおよびGLT-1欠損マウスから作製した培養Muller細胞を用いて、両者の標的となる分子と各々の貢献度を検討した。また、培養Muller細胞へIL-1bを投与するとCaspase-11,TNFaなどのmRNAが増加することを確認した。Caspase-11はCaspase-1を切断することによってIL-1bの分泌を促すことが知られていることから、IL-1bが自らの作用を増強するためのautocrine loopの存在が考えられる。またIL-1bによるTNFaの増加は、やはり更なるグルタミン酸トランスポーターの活性化に結びつく可能性があることから、IL-1b投与がMuller細胞におけるIL-1bおよびTNFaの産生・分泌に与える影響をウェスタンブロットおよび細胞外液を用いたELISA法を用いて定量化し、GLAST活性化に至るメカニズムの詳細を細胞レベルでさらに検討した。以上の結果を学術論文の原著としてまとめ、国際的に評価の高い分子生物学研究雑誌であるMolecular and Cellular Biologyに掲載された。

こ れ ま で に I 々 は, cultivating Muller cells に グ ル タ ミ ン acid を load し た occasions の heritage 伝 son 発 の now - the を マ イ ク ロ ア レ イ で snare に explore し, そ の results と し て plural の heritage 伝 son 発 now rising が す る こ と を shows し た. こ の う ち イ ン タ ー ロ イ キ ン - 1 b (IL - 1 b) お よ び tumor necrosis factor a (TNFa) の protein 発 now quantity は virtual blood retinal の Muller cells に お い て intentionally に rise し て い た. さ ら に そ の の cells after レ ベ ル で の 検 please か ら IL - 1 b お よ び TNFa の struck が, GLAST お よ び GLT 1 に よ る Muller cells へ の グ ル タ ミ ン acid take り こ を raised large amount of み さ せ る こ と を tu き check め た. This year は IL - 1 b お よ び TNFa か ら グ ル タ ミ ン acid ト ラ ン ス ポ ー タ ー へ の function machine sequence の 検 line for を っ た. After そ の GLAST お よ び GLT 1 owe loss マ ウ ス か ら cropping し た を culture Muller cells with い て, struck の mark と な る molecular と each 々 の contribution を beg し 検 た. ま た, cultivating Muller cells へ IL - 1 b を cast with す る と Caspase - 11, TNFa な ど の mRNA が raised plus す る こ と を confirm し た. Caspase - 11 は Caspase 1 を cut す る こ と に よ っ て secretion of IL - 1 b の を promote す こ と が know ら れ て い る こ と か ら, IL - 1 b が since ら の role を raised strong す る た め の autocrine loop の is が exam え ら れ る. ま た IL - 1 b に よ る TNFa の raised は, や は り more な る グ ル タ ミ ン acid ト ラ ン ス ポ ー タ ー の activeness に knot び つ く possibility が あ る こ と か ら, IL - 1 b cast and が Muller cells に お け る IL - 1 b お よ び TNFa の に, secretion and え る influence を ウ ェ ス タ ン ブ ロ ッ ト お よ び extracellular fluid を with い た を ELISA method with い て quantitative し, GLAST activeness に to る メ カ ニ ズ ム の detailed を cells レ ベ ル で さ ら に beg し 検 た. の above results を academic papers と の original し て ま と め and international に review 価 の high Molecular Biology 雑 い tzu で あ る Molecular and Cellular Biology に first white jasmines load さ れ た.

项目成果

The potential role of glutamate transporters in the pathogenesis of normal tension glaucoma

• DOI: 10.1172/jci30178
• 发表时间: 2007-07-01
• 期刊: JOURNAL OF CLINICAL INVESTIGATION
• 影响因子: 15.9
• 作者: Harada, Takayuki;Harada, Chikako;Tanaka, Kohichi
• 通讯作者: Tanaka, Kohichi

Neuroprotective effect of geranylgeranylacetone against ischemia-induced retinal injury.

香叶基香叶基丙酮对缺血引起的视网膜损伤的神经保护作用。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Molecular Vsion 13
• 作者: Namekata;K.;原田知加子;Namekata K.;Harada T.;Nakamura K.;楯川幸弘;Harada C.
• 通讯作者: Harada C.

nterleukin-1 stimulates glutamate uptake in glial cells by accelerating membrane trafficking of Na+/K+-ATPase via actin depolymerization.

nterleukin-1 通过肌动蛋白解聚加速 Na /K -ATP 酶的膜运输，从而刺激神经胶质细胞中谷氨酸的摄取。

• 发表时间: 2008
• 期刊: Molecular and Cellular Biology (in press)
• 作者: Namekata;K.;原田知加子;Namekata K.
• 通讯作者: Namekata K.

緑内障における神経保護研究

青光眼的神经保护研究

• 发表时间: 2009
• 期刊: あたらしい眼科 26(1)
• 作者: Satoshi Mohri;Yuki Katanosaka;Akira Yamada;and Keiji Naruse;Ohguro H;大黒 浩;大黒 浩;大黒 浩;Hashimoto M;Ohguro I;Nishikiori N;Ohba M;Hashimoto M;Maeda K;Nishikiori N;Ohguro H;Ohguro H;Ohguro H;Ohguro H;Ohguro H;大黒 浩;大黒 浩;原田知加子
• 通讯作者: 原田知加子

正常眼圧緑内障とグルタミン酸輸送体

正常眼压青光眼和谷氨酸转运蛋白

• 发表时间: 2008
• 期刊: あたらしい眼科 25(12)
• 作者: Namekata;K.;原田知加子
• 通讯作者: 原田知加子