新しい自己抗体,抗ILー1α抗体の定量的測定法の確立と臨床的意義に関する研究

新型自身抗体抗IL-1α抗体定量测定方法的建立及临床意义研究

• 批准号: 02454218
• 负责人: 柏木 平八郎
• 金额: $ 3.58万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-02454218/
• 关键词: インタ-ロイキン1(ILー1); 慢性関節リウマチ; 抗サイトカイン自己抗体; 抗ILー1α自己抗体

抗ILー1α自己抗体の定量的測定法を開発して、リウマチ性疾患の多数の症例で測定した。我々が開発した方法は、proteinAセファロ-スに一定量の血清IgGを結合させ、 ^<125>IーILー1αと反応させることによって抗体と結合したILー1αの量をガンマカウンタ-によって測定した。その結果、正常人では抗ILー1α自己抗体陽性血清の頻度は約5%であるのに対し、慢性関節リウマチ疾者では約15%と3倍の陽性頻度を示した。全身性エリテマト-デス患者や強皮症患者では、ほぼ正常人と同程度の陽性頻度であった。リウマチ性滑膜炎と抗ILー1α自己抗体の出現の関係を明らかにするため、数人の患者について、2ー3年にわたって血清の抗ILー1α抗体の抗体価と疾患活動性との関係を調べた。その結果、大部分の症例では抗ILー1α抗体価は滑膜炎の程度と相関した。この結果は、リウマチ性滑膜炎において出現するILー1αが、抗原として作用し、抗体産生を誘導したことを示唆する。しかし、正常人でも5%とかなり高い頻度でこの自己抗体が出現することから、最初の抗原刺激がILーαそのものであるかどうかは、はっきりしない。そこで、この自己抗体が認識するILー1α分子上のエピト-プを、βガラクトシダ-ゼとILー1αの融合蛋白を大腸菌に作成させ、抗体との反応性を検討することにより決定することを試みた。しかし、融合蛋白の精製の過程でILー1α部分を含む蛋白の変性がおこってしまうこと、それにより、変性ILー1αが非特異的にFc部分を介してIgGに結合してしまうことがわかり、この方法ではエピト-プの決定ができないことが判明した。そこで、現在、ILー1αの色々な部分の合成ペプチドを作成し、これらと抗ILー1αとの反応性を調べることによりエピト-プの決定を試みている。

A quantitative method for measuring anti-IL-1α autoantibodies has been developed and used to measure many cases of HIV-related sexual diseases. I'm using the method to open the hair, proteinA is a certain amount of serum IgG and is combined with it, ^<125>IーILー1αとanti-antibodyさせることによってantibody bindingしたILー1αのquantityをガンマカウンタ-によってmeasurementした. As a result, the frequency of anti-IL-1α autoantibody-positive serum in normal people is about 5%, and the frequency of positive serum in patients with chronic joint disease is about 15% and 3 times the positive frequency. The frequency of positivity is the same as that of patients with systemic Erythromycin, and that of normal people. There is a relationship between Roma synovitis and the emergence of anti-ILー1α autoantibodies, and there are several patients with it.いて, 2ー3 years old にわたって serum の anti-ILー1α antibody のantibody 価 と disease activity と の relationship を べ た. As a result, in most cases, anti-IL-1α antibodies were correlated with the degree of synovitis.このRESULTS は、リウマチ synovitis においてappearance するILー1αが、antigen としてactionし、antibody production をinducing したことをshows する.しかし、5% of normal people have high frequency of autoantibodies. することから、The initial antigen stimulation is がILーαそのものであるかどうかは、はっきりしない.そこで、このAutoantibodies するILー1α molecule のエピト-プを、βガラクトシダ-ゼとILー1α fusion protein is produced by Escherichia coli, and antibodies and anti-reactive antibodies are determined and tested.しかし, fusion protein purification process でILー1α part をcontaining むprotein の変性がおこってしまうこと, それにより, 変性ILー1αが不The specific にFc part is introduced and the IgG is combined with the してしまうことがわかり、この法ではエピト-プのdeterminationができないことがdeterminationした.そこで、Now、ILー1αの色々なpartの综合ペプチドを成し、これらとAnti-ILー1αとのreflexivityを Adjustmentべることによりエピト-プのdeterminationをtrialみている.

项目成果

Hiroshi Suzuki: "Demonstration of neutralizing autoantibodies against ILー1α in sera from patients with rheumatoid arthritis" Journal of Immunology. 145. 2140-2146 (1990)

Hiroshi Suzuki：“类风湿性关节炎患者血清中和 IL-1α 自身抗体的演示”《免疫学杂志》145. 2140-2146 (1990)。

Hiroyuki Takemura: "Increased freguency of antiーILー6 autoantibodies in systemic sclerosis" Arthritis and Rheumatism.

Hiroyuki Takemura：“系统性硬化症中抗 IL-6 自身抗体的频率增加”关节炎和风湿病。

Hiroshi Suzuki: "Antiーinterleukin 1α autoantibodies in rheumatic diseases and in normal subjects" Clinical Experimental Immunology.

Hiroshi Suzuki：“风湿性疾病和正常受试者中的抗白细胞介素 1α 自身抗体”临床实验免疫学。

Hiroshi Suzuki: "Molecular Biology of cytokine effects on vascular endothelial cells.International Review of Experimental Pathology vol.32" Academic Press, (1981)

铃木浩：“细胞因子对血管内皮细胞作用的分子生物学。国际实验病理学评论第 32 卷”学术出版社，（1981 年）

鈴木 博史: "リウマチ性疾患と抗インタ-ロイキン1自己抗体" リウマチ科. 3. 199-204 (1990)

Hiroshi Suzuki：“风湿性疾病和抗白介素-1自身抗体”风湿病学系，3. 199-204 (1990)。