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glucose transporterのtranslocationに関する研究

葡萄糖转运蛋白转运的研究

基本信息

批准号：
02454508
负责人：
葛谷英嗣
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

3T3ーL1脂肪細胞を用いて、インスリンによる糖輸送担体のtranslocationの機序およびその調節因子に関して次の点を明らかにした。1.ミオシン軽鎖リン酸化酸素の阻害剤とされているMLー9は2ーdeoxyglucoseのbasal uptakeには影響しないが、insulinーstimulated uptakeを抑制した(最大で約80%阻害、IC_<50>は約25μM)。2.細胞分画を行ない、各分画の糖輸送担体を、筋/脂肪型糖輸送担体(GLUT4)に対する抗体を用いたウエスタンブロッティングにより測定した。インスリンにより細胞内プ-ルのGLUT4は減少するが、MLー9は容量依存性にインスリンによるGLUT4の減少を抑制した。即ち、MLー9によるinsulinーstimulated 2ーdeoxyーglucose uptakeの抑制はGLUT4の細胞内プ-ルから細胞膜へのtranslocationの抑制に基くことが示唆された。3.MLー9はインスリン結合、インスリンによる受容体の自己リン酸化、内因性基質(160kDa蛋白)のリン酸化には影響を及ぼさなかった。従って、MLー9はインスリン受容体のチロシンキナ-ゼよりあとのステップに働いてtranslocationを抑制していると考えられた。4.細胞をインスリンあるいはインスリン+MLー9で処理してもミオシンのリン酸化状態には変化がなかった。一方、MLー9と処理しておくと、サイトゾ-ル内のcaseinーphosphorylating activityのインスリンによる上昇が阻止された。5.ジギトニンにてpermealizeした細胞を用いて、サイトゾ-ルのcaseinーphosphorylating activityのGLUT4のtranslocationへの効果を現在検討中である。

3T3-L1 adipocytes are used in the regulation of glucose transport and the regulation of glucose transport. 1. The inhibition of 2-deoxyglucose on basic uptake was inhibited by the inhibitor (maximum inhibition was about 80%, IC_<50>was about 25μM). 2. Cell analysis, determination of glucose transporter, muscle/fat glucose transporter (GLUT4) GLUT4 decreases due to the increase in cell size, and GLUT4 decreases due to the increase in cell size. That is, the inhibition of GLUT4 intracellular membrane translocation by insulin stimulated 2-deoxy-uptake is shown in the following ways: 3. ML-9 is a protein binding agent, and a protein binding agent.従って、MLー9はインスリン受容体のチロシンキナ-ゼよりあとのステップに働いてtranslocationを抑制していると考えられた。4. The cells are in a state of acidification. A party, ML-9 and processing, the casein phosphorylating activity in the group is rising. 5. The effects of cell permeation and GLUT4 relocation of cell-based casein-phosphorylating activity in JITONEN are now under discussion.