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グルタミン酸によってコンダクタンスが低下する網膜双極細胞のシナプス機構

谷氨酸降低视网膜双极细胞电导的突触机制

基本信息

批准号：
04454140
负责人：
金子章道
金额：
$ 4.42万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至 1993
项目状态：
已结题

项目摘要

これまでグルタミン酸受容体とそれに結びついたイオンチャネルにはNMDA型をはじめとするいくつかのタイプが知られているが、いずれもグルタミン酸によってコンダクタンスが上昇するタイプであり、コンダクタンスが低下するタイプはほとんど知られていない。そこで、本研究では以下の2つの課題を研究目的とした。1.ON型双極細胞の応答発生に関与する細胞内情報伝達機構の解明:グルタミン酸でコンダクタンスが低下する応答はサイクリックGMPを細胞内メッセンジャーとする情報伝達機構によるものと思われ、Gタンパク、ホスホジエステラーゼを介する視細胞の光応答と類似の機構が存在するものと考えられた。そこで、ウシ網膜二次ニューロンに存在する百日咳毒素基質タンパクを検索し、そのADPリボシル化に対するグルタミン酸の作用を検討した。暗順応したウシ剥離網膜より蔗糖密度勾配遠沈法によって得た膜画分を百日咳毒素によりADPリボシル化を行うと、39〜40kDaに標識されたバンドが見られた。マグネシウムイオン存在下でグルタミン酸またはそのアナログのAPBを添加するとこのADPリボシル化が抑制された。2.コンダクタンス増加型の応答のシナプス機構:一方、OFF型双極細胞のシナプスで動作しているコンダクタンス増加型のシナプス機構も、電気生理学的手法によって解析した。記録した双極細胞の内、約5%がグルタミン酸に対し内向き電流を示す。OFF型双極細胞であった。グルタミン酸に対する感受性は樹状突起で最も高く、Kdは約20muMであった。グルタミン酸応答の平均反転電位は-6.6-mVであった。NMDAやアスパラギン酸は無効であり、この応答はAM、PA/KA型のグルタミン酸受容体チャネルを介するものと考えられた。

The NMDA type of acid receptor can be divided into two groups: the first group and the second group. The second group is the NMDA type and the third group is the NMDA type. The purpose of this study is to investigate the following 2 topics. 1. Explanation of intracellular information transmission mechanism related to the development of ON bipolar cells: the existence of intracellular information transmission mechanism related to the development of ON bipolar cells: the existence of intracellular information transmission mechanism related to the development of ON bipolar cells. Therefore, the presence of pertussis toxin matrix protein in the secondary retina of the retina and the role of glutaric acid in the conversion of ADP were investigated. In the dark, it is possible to separate the membrane from the sucrose by using the distance precipitation method, and the 39 ~ 40kDa marker is used to detect the pertussis toxin. The following table shows how to add ADP to the APB. 2. The mechanism of the increase in the number of cells: the method of electrophysiology. About 5% of the bipolar cells were recorded as inward currents. OFF-type bipolar cells. The sensitivity to acid is highest and Kd is about 20 μ M. The average reverse potential of the sample was-6.6-mV. NMDA is the most effective way to improve the quality of the product.