肝細胞移植による血友病遺伝子治療に関する研究

肝细胞移植血友病基因治疗研究

• 批准号: 05454290
• 负责人: 吉岡 章
• 金额: $ 4.03万
• 依托单位: Nara Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 1994
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05454290/
• 关键词: 血友病; 第VIII因子; 第IX因子; 肝臓; 移植; イヌ; ラット

1.血友病A及び血友病Bの遺伝子解析(1)血友病A:国際的database(1994年版)の作成に協力し、ミッセンス変異(150例)、ナンセンス変異(27例)、スプライス異常(10例)、小欠失(41例)、挿入(13例)、大欠失(8例)を集計した。(2)FVIII Hiroshimaの解析:蛋白生化学的及び分子生物学的手法によりArg-1689のCysへの置換を明らかにし、加えて第VIII因子活性化機構の異常について解析した。(3)血友病B:国際的database(1994年版)の作成に協力し、全症例(1,142例)のうち、476の異常がユニークで、他は既報告と同一部位の異常であった。(4)FIX Kiryuの解析:蛋白生化学的及び分子生物学的手法により、Val-313のAspへの置換を、さらに三次元のキメラモデルよりその立体構造の異常を明らかにした。2.実験動物(ラット・イヌ)の血漿第VIII因子の定量(1)ヒト第VIII因子欠乏血漿を用いた凝固1段法にて正常ラット・イヌ血漿中の第VIII因子活性の定量法を確立した。(2)抗ヒト第VIII因子モノクローナル抗体を用いたサンドウィッチELISAにてイヌ血漿中の第VIII因子抗原の定量が可能であることを示した。(3)血友病Aイヌ血漿の第VIII因子抗原は低値を示した。3.イヌ肝移植の局所免疫抑制法移植後の全身性免疫抑制に伴う種々の問題点を解決する一方策として局所、即ち、門脈へのシクロスポリンA(CsA)の投与効果を検討した。門脈投与群(3mg/kg/day×2週間)は全身投与群や無治療群に比して有意に長期生存した。前者の血清ビリルビン値やGPTは安定しており、後2者ではほとんどが上昇し、拒絶された。従って、CsA門脈投与は肝移植後早期の免疫抑制療法として有用と考えられる。

1. Analysis of hemophilia An and hemophilia B (1) hemophilia A: international database (1994 edition), hemophilia A (1994), hemophilia A, hemophilia B, hemophilia A, hemophilia A, hemophilia B, hemophilia A, hemophilia B, (2) FVIII Hiroshima analysis: methods of protein biochemistry and molecular biology, such as protein biochemistry and molecular biology, were used in Arg-1689 biochemistry and molecular biology, and factor VIII activation mechanism was used to analyze protein biochemistry and molecular biology. (3) hemophilia B: the international database (1994 edition) made a "coordination", the total disease (1142 cases), the disease (476 cases), the disease (476 cases), the disease (1994 edition), the hemophilia B (1994 edition). (4) FIX Kiryu analysis: the techniques of protein biochemistry and molecular biology, such as Val-313 biochemistry and molecular biology, were used to analyze the three-dimensional structure of protein biochemistry and molecular biology. two。 The activity of factor VIII in blood was determined by quantitative method of factor VIII in blood. (2) the quantity of factor VIII antigen in blood may be detected by anti-factor VIII antigen. (2) the anti-factor VIII antigen may be expressed by anti-factor VIII antigen in blood. (3) the antigen of factor VIII of hemophilia A was lower than that of hemophilia A. 3. After orthotopic liver transplantation, systemic immunosuppression is associated with a variety of problem points. One way to solve the problem is to determine the number of local immunosuppressive agents (CsA) after liver transplantation. The whole body investment (3mg/kg/day × 2 years) was better than the intention of long-term survival in patients with no treatment. The former was infected with serum GPT and diazepam, while the latter two were treated with antisepsis and refused to be treated. The use of immunosuppression and CsA therapy in the early stage after liver transplantation is very useful.

项目成果

〓岡 章: "最新内科学大系21・血小板・凝固・線溶異常" 中山書店, 372 (1992)

冈晃：《最新内科医学21：血小板、凝血和纤维蛋白溶解异常》中山书店，372（1992）

E,G,D.Tuddenham: "Haemophilia A:database of nucleotide substitutions,deletions,insertions and rearragements of the FVIII gene,second elition" Nucleic Acids Research. 22. 3511-3533 (1994)

E、G、D.Tuddenham：“血友病 A：FVIII 基因的核苷酸取代、删除、插入和重排数据库，第二次淘汰”核酸研究。

Zhou Jie-Min(周浩民): "Expression of human factor IX cDNA in mice by implants of genetically modified skin fibroblasts from hemophilia B patient" Science in China(Series B). 36. 1082-1092 (1993)

周杰民：“通过植入B型血友病患者的转基因皮肤成纤维细胞在小鼠中表达人因子IX cDNA”中国科学（B系列）36。1082-1​​092（1993）。

Yoshiyuki Nakajima: "Cytoimmunologic monitoring using DNA analysis in canine liver transplantation" Transplantation. 55. 480-483 (1993)

Yoshiyuki Nakajima：“在犬肝移植中使用 DNA 分析进行细胞免疫学监测”移植。

吉岡 章: "図解血球-生理・病態・臨床 血小板 止血・凝固・線溶" 中外医学社, 139(41) (1994)

Akira Yoshioka：“血细胞图解 - 生理学、病理学、临​​床血小板、止血、凝血、纤溶” 中外医学社，139(41) (1994)