接触系凝固因子並びにフィブリン関連因子による癌転移抑制の解析

接触性凝血因子和纤维蛋白相关因子抑制癌症转移的分析

• 批准号: 05670925
• 负责人: 朝倉 伸司
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05670925/
• 关键词: 細胞接着抑制因子; 癌転移; 高分子キニノーゲン; beta_3-インテグリン; ビトロメクチンリセプター(VNR)

接触系凝固因子の1つである活性型高分子キニノーゲン(HKa)が血漿中に存在する最も強力な癌細胞接着抑制因子(Anti-cell adhesion ACA)であることを申請者らは見出した(J.Cell Biol.1992)。その作用機作として癌細胞接着に最も重要と考えられているbeta_3 integrin receptorligand相互作用の抑制であることが判明した。今回更に、、HKaのACAドメインを同定することを目的に、従来、HKaの凝固活性に重要と考えられている軽鎖ビトチジンリッチドメイン(HRD)をPET_<3a>ベクターを用いて、Expressすることに成功した(recombinant HRD,gamma-HRD)。次にこのgamma-HRDとHKaを癌細胞と同時に、ヒドロネクチン(VN)をcoatingしたプレートに入れると、gamma-HRDはHKaの持つACA活性を強く阻害した。又興味あることは、gamma-HRDはプレートにcoatingした場合、細胞接着を増加させる活性を有していた。HKaをcoatingした場合は、このような活性は有していない。更に、gamma-HRDの細胞接着活性はArg-Gly-Asp(RGD)ペプチドで抑制された。このことは、gamma-HRDは細胞表面上に存在する、インテグリン受容体のリガンドであることが示唆された。同時に抗ビトロネクチンリセプター抗体により、gamma-HRDの細胞接着活性は抑制された。以上の事実は、gamma-HRDの細胞側の受容体はbeta_3-インテグリン(Vitronectin receptor,VNR)であることを示唆している。更に、HKaのACA活性はbeta_3-インテグリンに特異的な反応であることを考慮するとHKaは、“disintegrin"として作用すると考えられる。disintegrinは従来、蛇毒より得られた血小板凝集抑制活性を持つRGDを含むペプチドである。ヒト血漿中にdisintegrin様活性を持つものは従来報告はなく、今回の発見は特筆に値すると考えられる(J.Cell Biol.submitted)。更に重要なドメインを同定するため、合成ペプチドを用いて検討中である。

Contact is の coagulation factor 1 つ で あ る activity type polymer キ ニ ノ ー ゲ ン (HKa) が に exist in plasma す る も most powerful な cancer cells and inhibiting factor (Anti - cell adhesion ACA) で あ る こ と を applicants ら は shows し た (John casteen ell Biol. 1992). そ の function machine for と し て cancer cells then に も most important と exam え ら れ て い る beta_3 integrin receptorligand interaction の inhibit で あ る こ と が.at し た. Now back to more に, HKa の ACA ド メ イ ン を with fixed す る こ と を purpose に, 従 to HKa の coagulation activity に important と exam え ら れ て い る 軽 lock ビ ト チ ジ ン リ ッ チ ド メ イ ン (HRD) を PET_ < > 3 a ベ ク タ ー を with い て, Express す る こ と に successful し た (recombinant (HRD,gamma-HRD). Time に こ の gamma - HRD と HKa を cancer cells と に, ヒ ド ロ ネ ク チ ン (.vn) を coating し た プ レ ー ト に into れ る と, gamma - HRD は HKa の hold つ ACA active を く strong resistance against し た. And tumblers あ る こ と は, gamma - HRD は プ レ ー ト に coating し た occasions, cells then を raised さ せ る active を have し て い た. In the case of HKaをcoating た た, the <s:1> and <s:1> ような ような activities <e:1> include <s:1> て な な <e:1>. Further に, gamma-HRD <s:1> cell subsequent activity に Arg-Gly-Asp(RGD)ペプチドで inhibition された. こ の こ と は, gamma - HRD は に exist on the cell surface す る, イ ン テ グ リ ン by let body の リ ガ ン ド で あ る こ と が in stopping さ れ た. At the same time, the に anti-ビ トロネ <s:1> チ <s:1> リセプタ された antibody によ <s:1> and gamma-HRD <s:1> subsequently inhibited the activity of <s:1> cells and された. Above の things be は, gamma - HRD の cells respond to let the body side の は beta_3 - イ ン テ グ リ ン (Vitronectin receptor, VNR) で あ る こ と を in stopping し て い る. More に, HKa の ACA active は beta_3 - イ ン テ グ リ ン に specific な anti 応 で あ る こ と を consider す る と HKa は "disintegrin" と し て role す る と exam え ら れ る. disintegrin <s:1> 従 and snake venom よ よ <s:1> have られた platelet aggregation inhibitory activity を and <s:1> RGDを contains むペプチドである. ヒ ト に in plasma disintegrin others active を hold つ も の は 従 to report は な く, today back to の 発 see は special pen に numerical す る と exam え ら れ る (John casteen ell Biol. Submitted). What is more に important is なドメ なドメ を を を, which is the same as that for するため and ペプチドを, て検 て検 is used to discuss である.

项目成果

Kazuki NIWA: "Fibrinogen Mitaka II : a hereditary dysfibrinogen with defective thrombin binding caused by an A alpha Glu-11 to Gly substitution." Blood. 82(12). 3658-3663 (1993)

Kazuki NIWA：“纤维蛋白原 Mitaka II：一种遗传性异常纤维蛋白原，由于 A α Glu-11 到 Gly 取代而导致凝血酶结合缺陷。”

Ryoichi UMEMOTO: "Cellular fibronectin in plasma its implications in fibrinogen-associated cryoprecipitation and other related reactions." Blood Coagulation and Fibrinolysis. 4. 127-131 (1993)

Ryoichi UMEMOTO：“血浆中的细胞纤连蛋白对纤维蛋白原相关冷沉淀和其他相关反应的影响。”

Yasuo WADA: "A new type of congenital dysfibrinogen,fibrinogen Bremen,with an Aalpha Gly-17 to Val substitution associated with hemorrhagic diathsis and delyed wound healing." Thromb.Haemostas.70(3). 397-403 (1993)

Yasuo WADA：“一种新型先天性纤维蛋白原异常，纤维蛋白原 Bremen，其 Aalpha Gly-17 被 Val 取代，与出血性透析和伤口愈合延迟有关。”