フイブリン形成機構の糸球体腎炎発症への関わり、特に接着分子としての分子機作の解析

纤维蛋白形成机制参与肾小球肾炎发生发展的机制分析，特别是作为粘附分子的分子机制

• 批准号: 09671174
• 负责人: 朝倉 伸司
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09671174/
• 关键词: soluble fibrin-monomer; fibrin-monomer; mesangial cell; cell adhesion

今回科学研究助成金を頂き、我々は,Fibrinogen(Fbg)をThrombinで処理しFibrin clotを得、2M NaBr液に溶解しFibrin monomer(FM)とし、FMの重合を阻止するためGPRP-peptide(0.5mM)含有TBSを用い、Fbn-monomer(FM)を固相化する新しいアッセイ系を開発した。このアッセイ系での細胞接着活性は(1)RGD-peptideにより阻害された。(2)E-domain(Aα-16-R-C)のMutant Fbg由来のFMには細胞接着活性は認められなかった。以上の事実からFbgが細胞接着活性を発現するためには、Fbgの中央E domainを被覆するAα鎖C末領域(αC)がE domainより遊離し、E domainに連続して存在する接着活性中心の露呈が必須あることを示唆している。Soluble fibrin monomer complex(SF)は基本的にはFMと同様な立体構造上に、Fbg2分子が結合することにより、全く新しい特異的構造(neoantigen)が出現する。本研究室での共同研究者であるSoeらはSFに特異的に反応するモノクロナール抗体(JIF-43)を作製し、assay systemを確立した(Blood,88:2109-2117,1996)。以上の事実をふまえてSFとFMとの構造相同性より、実際に炎症に伴い、出現するSFが、炎症の代表である、糸球体腎炎でどのような役割を演じているかを検討する目的で、培養メサンギウム細胞のSFへの細胞接着活性を測定した。驚くべきことに、SFはFMに比べて、著明な細胞接着活性がみとめられ、Aα鎖C末領域に存在するRGD細胞接着ドメインを欠損するFragment XとFM複合体には上記活性が認められず、SFでの細胞接着促進活性はFMに結合するFbg側に存在することが判明した。この事実を世界的科学雑誌であるJ.Biol.Chem.に投稿中である(J.Biol.Chem.submitted)。

This time, the scientific research assistance is gold, I am, Fibrinogen (Fbg) Thrombin is processed, Fibrin clot is obtained, 2M NaBr solution is dissolved, Fibrin GPRP-peptide (0.5mM) contains TBS monomer(FM) and FM superposition blocker. The activity of このアッセイ-based での cells is blocked (1) RGD-peptide により blocks された. (2) Mutant Fbg of E-domain (Aα-16-R-C) is derived from FM cells and active cells. The above is true. Fbg cells are active and active. Fbg's central E domain is covered. The existence of the domain and the presence of the active center must be followed by the presence of the active center. Soluble fibrin monomer complex (SF) has a basic three-dimensional structure with the same structure as FM, a combination of Fbg2 molecules, and a completely new and unique structure (neoantigen). Our laboratory's co-investigator, Yoko Soeki, has produced and assayed a specific anti-JIF-43 antibody (JIF-43). system is established (Blood, 88:2109-2117, 1996). The above are the same as the structure of the above items, FMとのstructural similarity, 実记にinflammatoryに companion, appearance, inflammationのrepresentative, 糸ball Nephritis of the body was cut and cut for the purpose of performing the test, and the cells were cultured and the activity of the cells was measured. Fragment of surprise くべきことに, SFはFM に比べて, Akira cell then activity がみとめられ, Aα lock C end field にexistence RGD cell then ドメインを lack of damage The activity of the X-FM complex is recognized, and the SF cells are then promoted to be active. The FM is combined with the Fbg side, and the presence of the activity is confirmed.この事実をThe scientific journal of the world であるJ.Biol.Chem.にsubmission in progress (J.Biol.Chem.submitted).

项目成果

ARAI,Koichi: "Role of the kringle domain in plasminogen activation with staphylokinase." J.Biochem.123. 71-77 (1998)

ARAI，Koichi：“三环结构域在葡萄球菌激酶激活纤溶酶原中的作用。”