セラマイドによる白血病細胞アポトーシス誘導時のsrcファミリイの意義

src家族在神经酰胺诱导白血病细胞凋亡中的意义

• 批准号: 07670179
• 负责人: 岡崎 俊朗
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Osaka Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07670179/
• 关键词: セラミド; アポトーシン; src

我々は、HL-60細胞の分化誘導過程における脂質を介した細胞内シグナル伝達機構解明のため、分化誘導時のスフィンゴ脂質の役割について研究し、従来は膜構成成分としてのみ考えられていたセラマイドがヴィタミンD3による分化誘導時約2時間後にスフィンゴミエリンが減少し最低値となり、一方その分解産物であるセラマイドが増加し最高値となること-すなわち“スフィンゴミエリン サイクル"(スフィンゴミエリン【tautomer】ホスフォリルコリン+セラマイド)が存在することを見いだした。今回、分化療法時の白血病細胞の病態を解明するため分化誘導過程におけるセラマイドを介した細胞内シグナル伝達機構におけるタイロシン蛋白燐酸化/脱燐酸化の関与につき検討した。(1)タイロシンカイネース阻害剤、ハ-ビイマイシンAやタイロシンフォスファターゼ阻害剤、バナデ-トのセラマイドによるHL-60細胞分化誘導への効果を検討したところ、ハ-ビイマイシンAではNBT活性により判定した分化誘導はほとんど影響されなかったがバナデ-ト処理により増強された。また、細胞増殖に対しては高濃度で両者供に抑制を示した。(2)セラマイドによるHL-60細胞分化誘導時のタイロシン蛋白燐酸化/脱燐酸化を抗タイロシン抗体により検討したところ、95KDa、45KDa付近の蛋白が1時間以内にリン酸化されていた。95KDa付近の蛋白については分子量95KDaであるvavの可能性を考え抗vav抗体にて免疫沈降後に抗タイロシン抗体によりウエスタンブロティングを試みた。結果はvav蛋白が早期にタイロシンのリン酸化を受けていることが判明した。以上よりセリン/スレオニン蛋白リン酸化のみでなくタイロシン蛋白リン酸化、とりわけvavを介したシグナル伝達系のセラマイド/SMサイクルでの重要性を示唆した。

I 々 は, the HL 60 cells の induction process に お け る lipid を interface し た intracellular シ グ ナ ル 伝 of agencies interpret の た め, differentiation induced の ス フ ィ ン ゴ lipid の servants cut に つ い て research し, 従 は membrane composition と し て の み exam え ら れ て い た セ ラ マ イ ド が ヴ ィ タ ミ ン D3 に よ る after induction about 2 time に ス フ ィ ン ゴ ミ エ リ ン が reduce し lowest numerical と な り, one party そ の decomposition product で あ る セ ラ マ イ ド が raised し requirement by the highest numerical と な る こ と - す な わ ち "ス フ ィ ン ゴ ミ エ リ ン サ イ ク ル" (ス フ ィ ン ゴ ミ エ リ ン ホ tautomer 】 【 ス フ ォ リ ル コ リ ン + セ ラ マ イ ド) exist が す る こ と を see い だ し た. Today when back, differentiation therapy の の leukemia cell pathological を interpret す る た め induction process に お け る セ ラ マ イ ド を interface し た intracellular シ グ ナ ル 伝 of institutions に お け る タ イ ロ シ ン protein 燐 acidification/off 燐 acidification の masato and に つ き beg し 検 た. (1) タ イ ロ シ ン カ イ ネ ー ス resistance against tonic, ハ - ビ イ マ イ シ ン A や タ イ ロ シ ン フ ォ ス フ ァ タ ー ゼ resistance against tonic, バ ナ デ - ト の セ ラ マ イ ド に よ る - HL 60 cell differentiation induced へ の unseen fruit を beg し 検 た と こ ろ, ハ ビ イ マ イ シ ン A で は NBT active に よ り determine し た induction は ほ と ん ど influence さ れ な か Youdaoplaceholder0 -ト handle によ ったがバナデ enhance された. Youdaoplaceholder0, cell proliferation に against a high concentration of <s:1> て て で for に inhibition を shows た た. (2) セ ラ マ イ ド に よ る - HL 60 cell differentiation induced の タ イ ロ シ ン protein 燐 acidification/take off 燐 acidification を タ イ ロ シ ン antibody に よ り beg し 検 た と こ ろ, 95 kda, pay nearly の 45 kda protein が 1 time within に リ ン acidification さ れ て い た. Pay nearly 95 kda protein の に つ い て は molecular weight 95 kda で あ る vav の possibility を exam え vav antibody resistance に て resistance に immune sink タ イ ロ シ ン antibody に よ り ウ エ ス タ ン ブ ロ テ ィ ン グ を try み た. Early results は vav protein が に タ イ ロ シ ン の リ ン acidification を by け て い る こ と が.at し た. Above よ り セ リ ン / ス レ オ ニ ン protein リ ン acidification の み で な く タ イ ロ シ ン protein リ ン acidification, と り わ け vav を interface し た シ グ ナ ル 伝 da is の セ ラ マ イ ド / SM サ イ ク ル で の importance を in stopping し た.

项目成果

Hirofumi Sawai: "Requiremint of AP-1 for ceramide-induced apoptosis in human leukemia HL-60 cells." The Journal of Biological Chemistry. 270. 27326-27331 (1995)

Hirofumi Sawai：“神经酰胺诱导人白血病 HL-60 细胞凋亡需要 AP-1。”

Ogawa K: "High expression of c-kit in K562Y0 cells due to the prolonged half-life of its mRNA: The effects of modification with serine/threonine kinase signals." Blood. 85. 1496-1503 (1995)

Okawa K：“由于 mRNA 的半衰期延长，c-kit 在 K562Y0 细胞中高表达：丝氨酸/苏氨酸激酶信号修饰的影响。”

岡崎 俊朗: "セラミドを介した情報伝達系とその生物学的意義" 生化学. 67. 298-303 (1995)

Toshiro Okazaki：“神经酰胺介导的信息转导系统及其生物学意义”生物化学 67. 298-303 (1995)。