セラマイドによる白血病細胞分化誘導時のタイロシン蛋白燐酸化/脱燐酸化の解析

神经酰胺诱导白血病细胞分化过程中泰乐菌素蛋白磷酸化/去磷酸化分析

• 批准号: 06670174
• 负责人: 岡崎 俊朗
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Osaka Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06670174/
• 关键词: セラマイド; 分化誘導過程; 蛋白燐酸化; 脱燐酸化; ハ-ビイマイシンA; バナデ-ト

セラマイドによる白血病細胞分化誘導時のタイロシン蛋白燐酸化/脱燐酸化の解析今回、我々は分化療法時の白血病細胞の病態を解明するため分化誘導過程でのセラマイドを介した細胞内シグナル伝達機構における、タイロシン蛋白燐酸化/脱燐酸化の関与につき以下の計画にそって研究を行った。計画(1)タイロシンカイネース阻害剤、ハ-ビイマイシンAやタイロシンフォスファターゼ阻害剤、バナデ-トのセラマイドによるHL-60細胞分化誘導への効果の検討。(2)セラマイドによるHL-60細胞分化誘導時のタイロシン蛋白燐酸化/脱燐酸化を抗タイロシン抗体により検討。(3)変化の認められたタイロシン蛋白燐酸化/脱燐酸化に関与する燐酸化/脱燐酸化酵素の活性および性質の検討。結果と考察(1)タイロシンカイネース阻害剤、ハ-ビイマイシンAによりHL-60細胞のセラマイドによる分化誘導はほとんど影響を受けないが、タイロシンフォスファターゼ阻害剤、バナデ-トにより増強される傾向があった。(2)セラマイドによるHL-60細胞分化誘導時に、60Kd、80Kdおよび100Kd付近のタイロシン蛋白の燐酸化が処理後5分以降より認められた。(3)変化していた蛋白を同定するために、現在srcを含めた細胞質性タイロシンカイネースファミリィ(fyn、lyn、yesなど)を免疫沈降法を使用し、その後にフォスフォタイロシンに対する抗体によるウエスタブロティング法によりそれらのリン酸化を検討中。

Analysis of Phosphorylation/Dephosphorylation of Leukemia Protein during Differentiation Induction of Leukemia Cells in the Past and Future Research Projects on the Relationship between Phosphorylation/Dephosphorylation of Leukemia Protein during Differentiation Therapy and Differentiation Induction in Leukemia Cells Project (1) Study of HL-60 cell differentiation induced by inhibitor of growth and development of HL-60 cells. (2)Study on phosphorylation/dephosphorylation of protein in HL-60 cells induced by apoptosis (3)Study of phosphorylation/dephosphorylation of protein and phosphorylation/dephosphorylation enzyme activity in protein Results: (1) HL-60 cells were induced to differentiate by the inhibitor of cell growth and the inhibitor of cell differentiation. (2)When HL-60 cells were induced to differentiate, the phosphorylation of protein was reduced by 5 minutes after treatment with 60, 80 and 100Kd. (3)In the case of protein isoforms, the protein is now src and contains cytoplasmic proteins (fyn, lyn, yes). Immunoprecipitation methods are used to detect antibodies.

项目成果

岡崎 俊朗: "セラミドと情報伝達-白血病細胞のアポトーシス誘導過程における重要性" 医学のあゆみ. 171. 913-916 (1994)

Toshiro Okazaki：“神经酰胺和信息转导 - 其在诱导白血病细胞凋亡过程中的重要性”《医学史》171. 913-916 (1994)。

Okazaki T: "Characteristics and partial purification of a novel cytosolic magnesium-independent,neutral sphingomyelinase activated in the early signal transduction of 1 α.25-dihydroxyvitamin D3-induced HL-60 cell differentiation." J Biol Chem. 269. 4070-4

Okazaki T：“在 1 α.25-二羟基维生素 D3 诱导的 HL-60 细胞分化的早期信号转导中激活的新型胞质非镁依赖性中性鞘磷脂酶的特征和部分纯化。J Biol Chem。”