74kDaサブユニットを持つ新しいプロテインホスファタ-ゼの活性調節機構の研究
74kDa亚基新型蛋白磷酸酶活性调控机制研究
基本信息
- 批准号:02680160
- 负责人:
- 金额:$ 1.02万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
- 财政年份:1990
- 资助国家:日本
- 起止时间:1990 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
1.ヒト赤血球サイトゾ-ル画分より精製したホスファタ-ゼIはタイプ2Aに属し,その分子量は180,000で、34kDaの触媒サブユニットαと63及び74kDaの調節サブユニットβ,δを各1分子ずつ含有している。cAMP依存性プロテインキナ-ゼ(Aキナ-ゼ)及びプロテインキナ-ゼC(Cキナ-ゼ)により、ホスファタ-ゼIの74kDa δサブユニットのセリン残基が定量的にリン酸化された。このリン酸化反応におけるホスファタ-ゼIに対するKmは、Aキナ-ゼで0.27μM、Cキナ-ゼで0.15μMで赤血球内の同酵素の推定濃度(0.2μM)にほぼ等しい。2.ホスホリラ-ゼキナ-ゼ,Ca^<2+>・カルモデュリン依存性プロテインキナ-ゼII,ミオシン軽鎖キナ-ゼ,cGMP依存性プロテインキナ-ゼ及びカゼインキナ-ゼIによるδサブユニットのリン酸化は認められなかった。3.リン酸化されたδサブユニットのトリプシン消化ペプチドの比較により、A及びCキナ-ゼに共通のリン酸化部位と、Cキナ-ゼに特有なリン酸化部位が認められた。4.Aキナ-ゼあるいはCキナ-ゼによるδサブユニットのリン酸化により、リン酸化H1ヒストンに対する脱リン酸活性は20ー40%上昇した。一方、リン酸化ミオシン軽鎖に対する脱リン酸活性は、Cキナ-ゼによるδサブユニットのリン酸化で50%促進されたが、Aキナ-ゼによるリン酸化では20%抑制された。異なるキナ-ゼによるδサブユニットのリン酸化が、異なる活性制御を行なうことが示唆された。
1. ヒ ト red blood corpuscle サ イ ト ゾ - ル painting よ り refined し た ホ ス フ ァ タ - ゼ I は タ イ プ 2 a に し, そ の は molecular weight 180000 で, 34 kda の catalyst サ ブ ユ ニ ッ ト alpha と 63 and 74 kda び の adjust サ ブ ユ ニ ッ ト beta, and delta 1 molecular ず を つ contains し て い る. CAMP dependency プ ロ テ イ ン キ ナ - ゼ (A キ ナ - ゼ) and び プ ロ テ イ ン キ ナ - ゼ C (C キ ナ - ゼ) に よ り, ホ ス フ ァ タ - 74 kda ゼ I の delta サ ブ ユ ニ ッ ト の セ リ ン residues が quantitative に リ ン acidification さ れ た. こ の リ ン acidification anti 応 に お け る ホ ス フ ァ タ - ゼ I に す seaborne る Km は, A キ ナ - ゼ で 0.27 mu M, C キ ナ - ゼ で 0.15 mu M で red blood corpuscle の の presumed with enzyme concentration (0.2 microns) に ほ ぼ etc し い. 2. ホ ス ホ リ ラ - ゼ キ ナ - ゼ, Ca ^ 2 + > < · カ ル モ デ ュ リ ン dependency プ ロ テ イ ン キ ナ - ゼ II, ミ オ シ ン 軽 lock キ ナ - ゼ, cGMP dependency プ ロ テ イ ン キ ナ - ゼ and び カ ゼ イ ン キ ナ - ゼ I に よ る delta サ ブ ユ ニ ッ ト の リ ン acidification は recognize め ら れ な か っ た. 3. リ ン acidification さ れ た delta サ ブ ユ ニ ッ ト の ト リ プ シ ン digestion ペ プ チ ド の is に よ り, A and C キ び ナ - ゼ に common の リ ン と acidification parts, C キ ナ - ゼ に な unique リ ン が acidification parts recognition め ら れ た. 4. A キ ナ - ゼ あ る い は C キ ナ - ゼ に よ る delta サ ブ ユ ニ ッ ト の リ ン acidification に よ り, リ ン acidification H1 ヒ ス ト ン に す seaborne る リ off ン acid active は 20 ー 40% し た. One party, リ ン acidification ミ オ シ ン 軽 lock に す seaborne る リ off ン acid active は, C キ ナ - ゼ に よ る delta サ ブ ユ ニ ッ ト の リ ン acidification で 50% promote さ れ た が, A キ ナ - ゼ に よ る リ ン acidification で は 20% inhibition さ れ た. Different な る キ ナ - ゼ に よ る delta サ ブ ユ ニ ッ ト の リ ン acidification が, different な る active suppression を line な う こ と が in stopping さ れ た.
项目成果
期刊论文数量(5)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Hirofumi Usui: "Functions and properties of subunits in type 2A protein phosphatases from human erythrocytes" Advances in Protein Phosphatases. (1991)
Hirofumi Usui:“人红细胞 2A 型蛋白磷酸酶亚基的功能和特性”蛋白磷酸酶进展。
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Kazuyoshi Azuma: "Purification and characterization of a rat liver membrane tyrosineーprotein kinase,the possible protooncogene cーyes product,p60^<cーyes>" Journal of Biological Chemistry. (1991)
Kazuyoshi Azuma:“大鼠肝膜酪氨酸蛋白激酶(可能的原癌基因 c-yes 产物)的纯化和表征,p60^<c-yes>”《生物化学杂志》(1991 年)。
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- 作者:
- 通讯作者:
Haruhisa Tsukamoto: "Tyrosine protein kinases in membrane fractions from rat cerebral cortex" Journal of Biochemistry. 104. 807-816 (1988)
Haruhisa Tsukamoto:“大鼠大脑皮层膜组分中的酪氨酸蛋白激酶”生物化学杂志。
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- 作者:
- 通讯作者:
Hirofumi Usui: "Phosphorylation of 74kDa δ subunit in a human erythrocyte type 2A protein phosphatase by cAMPーdependent protein kinase" Journal of Biological Chemistry.
Hirofumi Usui:“cAMP 依赖性蛋白激酶对人红细胞 2A 型蛋白磷酸酶中 74kDa δ 亚基的磷酸化”《生物化学杂志》。
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Hirofumi Usui: "Three distinct forms of type 2A protein phosphatase in human erythrocyte cytosol" Journal of Biological Chemistry. 263. 3752-3761 (1988)
Hirofumi Usui:“人红细胞胞浆中 2A 型蛋白磷酸酶的三种不同形式”《生物化学杂志》。
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