74kDaサブユニットを持つ新しいプロテインホスファタ-ゼの活性調節機構の研究

74kDa亚基新型蛋白磷酸酶活性调控机制研究

• 批准号: 02680160
• 负责人: 碓井 裕史
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02680160/
• 关键词: プロテインホスファタ-ゼ; ヒト赤血球; 蛋白質脱リン酸化; 蛋白質リン酸化; 酵素活性制御; cAMP依存性プロテインキナ-ゼ; プロテインキナ-ゼC; 74kDaサブユニット

1.ヒト赤血球サイトゾ-ル画分より精製したホスファタ-ゼIはタイプ2Aに属し,その分子量は180,000で、34kDaの触媒サブユニットαと63及び74kDaの調節サブユニットβ,δを各1分子ずつ含有している。cAMP依存性プロテインキナ-ゼ(Aキナ-ゼ)及びプロテインキナ-ゼC(Cキナ-ゼ)により、ホスファタ-ゼIの74kDa δサブユニットのセリン残基が定量的にリン酸化された。このリン酸化反応におけるホスファタ-ゼIに対するKmは、Aキナ-ゼで0.27μM、Cキナ-ゼで0.15μMで赤血球内の同酵素の推定濃度(0.2μM)にほぼ等しい。2.ホスホリラ-ゼキナ-ゼ,Ca^<2+>・カルモデュリン依存性プロテインキナ-ゼII,ミオシン軽鎖キナ-ゼ,cGMP依存性プロテインキナ-ゼ及びカゼインキナ-ゼIによるδサブユニットのリン酸化は認められなかった。3.リン酸化されたδサブユニットのトリプシン消化ペプチドの比較により、A及びCキナ-ゼに共通のリン酸化部位と、Cキナ-ゼに特有なリン酸化部位が認められた。4.Aキナ-ゼあるいはCキナ-ゼによるδサブユニットのリン酸化により、リン酸化H1ヒストンに対する脱リン酸活性は20ー40%上昇した。一方、リン酸化ミオシン軽鎖に対する脱リン酸活性は、Cキナ-ゼによるδサブユニットのリン酸化で50%促進されたが、Aキナ-ゼによるリン酸化では20%抑制された。異なるキナ-ゼによるδサブユニットのリン酸化が、異なる活性制御を行なうことが示唆された。

1. Erythrocytes are purified and purified. The molecular weight of the catalyst is 180,000 kDa and the molecular weight of the catalyst is 63 kDa and the molecular weight of the catalyst is 74kDa. cAMP is dependent on the existence of A protein that is acidic to a certain amount of 74 kDa δ- The estimated concentration of isoenzyme in erythrocytes (0.2μM) was 0.27μM, 0.15μM, and 0.27 μ M. 2. 3. Comparison of the common acid sites and the specific acid sites of the A, C and C groups. 4. The activity of dechlorination was increased by 40%. The activity of dechlorination is 50% promoted and 20% inhibited by dechlorination. The difference between the two is that the acid is not active and the active is not active.

项目成果

Hirofumi Usui: "Functions and properties of subunits in type 2A protein phosphatases from human erythrocytes" Advances in Protein Phosphatases. (1991)

Hirofumi Usui：“人红细胞 2A 型蛋白磷酸酶亚基的功能和特性”蛋白磷酸酶进展。

Kazuyoshi Azuma: "Purification and characterization of a rat liver membrane tyrosineーprotein kinase,the possible protooncogene cーyes product,p60^<cーyes>" Journal of Biological Chemistry. (1991)

Kazuyoshi Azuma：“大鼠肝膜酪氨酸蛋白激酶（可能的原癌基因 c-yes 产物）的纯化和表征，p60^<c-yes>”《生物化学杂志》（1991 年）。

Haruhisa Tsukamoto: "Tyrosine protein kinases in membrane fractions from rat cerebral cortex" Journal of Biochemistry. 104. 807-816 (1988)

Haruhisa Tsukamoto：“大鼠大脑皮层膜组分中的酪氨酸蛋白激酶”生物化学杂志。

Hirofumi Usui: "Phosphorylation of 74kDa δ subunit in a human erythrocyte type 2A protein phosphatase by cAMPーdependent protein kinase" Journal of Biological Chemistry.

Hirofumi Usui：“cAMP 依赖性蛋白激酶对人红细胞 2A 型蛋白磷酸酶中 74kDa δ 亚基的磷酸化”《生物化学杂志》。

Hirofumi Usui: "Three distinct forms of type 2A protein phosphatase in human erythrocyte cytosol" Journal of Biological Chemistry. 263. 3752-3761 (1988)

Hirofumi Usui：“人红细胞胞浆中 2A 型蛋白磷酸酶的三种不同形式”《生物化学杂志》。