モルヒネの分子作用機構解析のための神経細胞種特異的なオピオイド受容体発現動物作製

创建表达神经元细胞类型特异性阿片受体的动物，用于分析吗啡的分子作用机制

• 批准号: 14657024
• 负责人: 佐藤 公道
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657024/
• 关键词: μオピオイド受容体; モルヒネ; ノルアドレナリン神経; トランスジェニックマウス; ノックアウトマウス; dopamine-β-hydroxylase; 鎮痛作用; 薬物依存

モルヒネの鎮痛作用機序として、延髄諸核からの下行性抑制系の賦活化や一次感覚神経終末からの伝達物質遊離抑制が重要であるが、これらの作用機序の各々が、全身性に投与されたモルヒネによる個体レベルでの鎮痛作用発現にどの程度の割合で寄与しているかは明らかでない。また、精神的薬物依存に深く関与する中脳ドパミン神経系賦活化は、抑制性GABA作動性神経を抑制することによる「脱抑制」によることが、これまでの薬理学的・電気生理学的研究により示唆されているが、分子レベルにまで踏み込んだ研究成果は報告されていない。身体的依存形成における青斑核ノルアドレナリン神経系の関与についても同様である。そこで、これらの問題に対し分子レベルでの解答を得るため、一次感覚神経、GABA神経系およびノルアドレナリン神経系、それぞれの神経系にだけ特異的にμオピオイド受容体を発現する遺伝子改変マウスの作製を着想するに至った。本研究では、ノルアドレナリン神経特異的プロモーターであるdopamine-β-hydroxylaseプロモーター下にμオピオイド受容体を発現するトランスジェニックマウスとμオピオイド受容体ノックアウトマウスをかけ合わせることにより、ノルアドレナリン神経のみでμオピオイド受容体を発現する遺伝子改変マウスの作製を行った。本遺伝子改変マウスにおいてモルヒネの有意な鎮痛作用は認められなかった。一方、tail-suspension法を用いた解析において、μオピオイ受容体ノックアウトマウスで観察される行動量の増加が、μオピオイ受容体をノルアドレナリン神経特異的に発現させることにより野性型と同等のレベルまで減少していた。Tail-suspension法における行動量はストレス応答と関連していることが知られていることから、ノルアドレナリン神経系に発現しているμオピオイ受容体がストレス応答の調節に関与していることが示唆された。

モ ル ヒ ネ の analgesic action machine sequence と し て, delay marrow nuclear か ら の descending inhibition is の fu activation や a sense 覚 god 経 terminal か ら の 伝 material free inhibit が important で あ る が, こ れ ら の function machine sequence の 々 が, systemic に cast with さ れ た モ ル ヒ ネ に よ る individual レ ベ ル で の analgesic action 発 now に ど の degree の で send and cutting し て い る か は Ming Youdaoplaceholder0 ら でな ら. ま た, deep spiritual 薬 content dependent に く masato and す る in 脳 ド パ ミ ン god 経 fu activation は, inhibitory GABA actuation sex god 経 を inhibit す る こ と に よ る "disinhibition" に よ る こ と が, こ れ ま で の 薬 neo-confucianism, electricity 気 physiology research に よ り in stopping さ れ て い る が, molecular レ ベ ル に ま で tread み 込 ん だ research report は さ れ て い な Youdaoplaceholder0. The dependence of the body forms the における locus comulosus ノ ノ アドレナリ アドレナリ <s:1> the neurotic system <s:1> is related to the に に て て て である である. そ こ で, こ れ ら の problem に し seaborne molecular レ ベ ル で の answer を have る た め, a feeling 覚 god 経, GABA 経 department お よ び ノ ル ア ド レ ナ リ ン 経, god そ れ ぞ れ の god 経 department に だ け specific に mu オ ピ オ イ ド by let body を 発 now す る heritage 伝 child change - マ ウ ス の cropping think を す る に to っ た. This study で は, ノ ル ア ド レ ナ リ ン god 経 specific プ ロ モ ー タ ー で あ る dopamine - beta hydroxylase プ ロ モ ー タ ー に under mu オ ピ オ イ ド by let body を 発 now す る ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク マ ウ ス と mu オ ピ オ イ ド by let body ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス を か け close わ せ る こ と に よ り, ノ ル ア ド レ ナ リ ン god 経 の み で mu オ ピ オ イ ド by let body を 発 now す る heritage 伝 child change - マ ウ ス の cropping を line っ た. The 伝 seed of this work has been modified to have an な analgesic effect, a められな recognized, and a められな った った. One party, the tail - suspension method を with い た parsing に お い て, mu オ ピ オ イ by let body ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス で 観 examine さ れ る action in の raised add が, mu オ ピ オ イ by let body を ノ ル ア ド レ ナ リ ン god 経 specific に 発 now さ せ る こ と に よ り wild type と equal の レ ベ ル ま で reduce し て い た. Amount of Tail - suspension method に お け る action は ス ト レ ス 応 answer と masato even し て い る こ と が know ら れ て い る こ と か ら, ノ ル ア ド レ ナ リ ン god 経 department に 発 now し て い る mu オ ピ オ イ by let body が ス ト レ ス 応 answer の adjust に masato and し て い る こ と が in stopping さ れ た.

项目成果

Ide, S.et al.: "Buprenorphine antinociception is abolished, but naloxone-sensitive reward is retained, in μ-opioid receptor knockout mice"Neuropsychopharmacology. (in press). (2004)

Ide, S. 等人：“在μ-阿片受体基因敲除小鼠中，丁丙诺啡的镇痛作用被废除，但纳洛酮敏感的奖赏得以保留”《神经精神药理学》（2004 年出版）。

Watanabe, T. et al.: "Effects of excitotoxic lesions of the central or basolateral uncleus of the amygdala on naloxone-precipitated withdrawal-induced conditioned place aversion in morphine-de-pendent rats"Brain Res.. 958. 423-428 (2002)

Watanabe, T. 等人：“杏仁核中央或基底外侧叔叔的兴奋性毒性损伤对吗啡依赖性大鼠中纳洛酮诱发的戒断诱导的条件性位置厌恶的影响”Brain Res.. 958. 423-428（

Watanabe, T. et al.: "Involvement of glutamate receptors within the central nucleus of the amygdala in nalox-one-precipitated morphine withdrawal-induced conditioned place aversion in rats"Jpn.J.Pharmacol.. 88. 399-406 (2002)

Watanabe，T.等人：“杏仁核中央核内的谷氨酸受体参与纳洛酮沉淀吗啡戒断诱导的大鼠条件性位置厌恶”Jpn.J.Pharmacol.. 88. 399-406 (2002

Takami, S. et al.: "TAK-779, a nonpeptide CC chemokine receptor antagonist, protects the brain against focal cerebral ischemia in mice"J. Cereb. Blood Flow Metab.. 22. 780-784 (2002)

Takami, S. 等人：“TAK-779 是一种非肽 CC 趋化因子受体拮抗剂，可保护大脑免受小鼠局灶性脑缺血的影响”J.

Ozawa, T. et al.: "Effect of gene transfer of GLT-1, a glutamate transporter, into the locus coeruleus by recombinant adenoviruses on morphine physical dependence in rats."European Journal of Neuroscience. 19. 221-226 (2004)

Ozawa, T. 等人：“通过重组腺病毒将 GLT-1（一种谷氨酸转运蛋白）基因转移到蓝斑对大鼠吗啡身体依赖性的影响。”《欧洲神经科学杂志》。