特発性心筋症に対する遺伝子修正幹細胞を用いた細胞移植治療に関する基礎的研究

基因修饰干细胞细胞移植治疗特发性心肌病的基础研究

• 批准号: 14657159
• 负责人: 白土 邦男
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657159/
• 关键词: 遺伝子細胞治療; 特発性心筋症

平成15年度の研究実績を以下に述べる。1、前年に引き続きFLAGをタグとして挿入した正常ハムスターδサルコグリカンcDNAと同一ベクター上で別個にGFPを発現する発現遺伝子ベクターをハムスター骨髄細胞に導入する条件を検討した。ハムスターより単離した全骨髄細胞に対してリポフェクション法による遺伝子導入ではGFPを発現した細胞が確認された。2、GFPを発現した細胞をFluorescence activated cell sorterにて分離したところ、その数は全体の約70%程度であった。そしてGFP陽性細胞おいてFLAGにてタグした正常ハムスターδサルコグリカンcDNAの発現が確認された。次いで、Bio14.6心筋症ハムスター骨髄細胞にFLAGならびにGFPでタグした正常δサルコグリカン遺伝子を導入した。GFPの発現とδサルコグリカン蛋白の発現はコントロールと同様であった。3、GFP発現を指標に正常δサルコグリカン遺伝子を導入した骨髄細胞をラット心筋細胞と共培養したところ、心筋細胞形質を獲得したGFP陽性細胞は共培養した全骨髄細胞の約0.5%程度であった。これらの細胞でのδサルコグリガン蛋白の発現が確認された。4、正常δサルコグリカン遺伝子導入骨髄細胞をBio14.6心筋症ハムスターに経静脈的に投与し心筋組織を免疫染色にで検討したところ、GFP陽性の心筋細胞は少数であった。細胞移植を受けたBio14.6ハムスターでは軽度であるが心筋組織のリモデリング抑制効果が認められ、心機能改善も認められた。

In the 15th year of Pingcheng, the following studies have been made. 1. The year before last, the FLAG health care provider was enrolled in the normal health care unit. The other two GFP workers in the same hospital were enrolled in the conditional health care system. Please tell me that the whole bone cell is in good condition. The whole bone cell is confirmed by the GFP method. 2. GFP shows that the total number of Fluorescence activated cell sorter cells is about 70%. The GFP sex cell