リンセンサー分子の同定と機能解析

磷传感器分子的鉴定和功能分析

• 批准号: 14657254
• 负责人: 宮本 賢一
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657254/
• 关键词: Phosphate; sensor; Transporter; Kidney; FGF23

無機リン酸(以下リン)には独自の代謝系やホルモンが存在する。我々はその候補分子のいくつかを同定し機能解析やノックアウトマウスを用いてリンセンサーの存在とその生理学的重要性を明らかにした。本研究では、リンセンサーのいくつかの候補分子の機能とリン利尿因子FGF23,MEPE、Stanniocalcin, phosphatoninの分泌調節機構を解明することでリンセンサーの候補分子からリン利尿因子分泌へのシグナル経路について検討した。リンセンサーは脳脊髄液のリン濃度維持に関与しており、そのシグナルは脳脊髄液関門から分泌されるFGF23,Stanninocalcin2, phosphatoninの量を調節して末梢組織(主に腎臓)に作用させるリン代謝ホルモン分泌を支配する受容体(センサー)である。この候補分子はPRP90、type IIc Na/Pi cotransporter, Pi receptor-like protein(PIP)、Pi-responsive factorなどが考えられる。そこでラットの第3脳室にリン溶液を注入することにより、数時間後にリンセンサーの機能を活性化させた。その結果、type IicNa/Pi transporter蛋白の著しいリン酸化およびPIP蛋白量の増大が見られた。さらにFGF23の分泌量を指標としてDNAマイクロアレーとリン酸化検出用2次元電気泳動法で反応する他の候補蛋白の挙動を調べた。しかし遺伝子発現レベルにおいてリン濃度に反応して著しく違いのある蛋白質は同定されなかった。またFGF23の昆虫細胞での量産および精製と特異抗体作製を試みているが、現在のところ、FGF23の血中濃度測定用の特異抗体は得られていない。今後、リンセンサー分子からのシグナルネットワークを、分子単位で確認する予定である。

Inorganic acids (hereinafter referred to as "inorganic acids") are not independent of metabolic systems. The importance of the physiology of the candidate molecules is clearly demonstrated. This study is aimed at clarifying the regulatory mechanisms of diuretic factors FGF23,MEPE, Stanniocalcin, and phosphatin in the secretion of candidate molecules for diuretic factors. The level of FGF23,Stanninocalcin2, and phosphatin in spinal fluid is regulated by the regulation of spinal fluid concentration and receptor secretion. PRP90, type IIc Na/Pi cotransporter, Pi receptor-like protein(PIP), Pi-responsive factor In the third chamber, the solution is injected and activated after a few minutes. As a result, significant acidification of type IicNa/Pi carrier protein and an increase in the amount of PIP protein were observed. The expression of FGF23 was measured by two-dimensional electrophoresis. The protein content of the protein was determined by the concentration of the protein. Production and purification of FGF23 in insect cells and preparation of specific antibodies In the future, the molecular structure of the molecule will be determined.

项目成果

Saito H: "Human fibroblast growth factor-23 mutants suppress Na+-dependent phosphate co-transport activity and 1α, 25-dihydroxyvitamin D3 production"J Biol Chem. 278. 2206-2211 (2003)

Saito H：“人成纤维细胞生长因子-23 突变体抑制 Na+ 依赖性磷酸盐共转运活性和 1α, 25-二羟基维生素 D3 的产生”J Biol Chem. 278. 2206-2211 (2003)

伊藤 美紀子: "無機リン酸トランスポーターファミリー"Annual Review 腎臓. 22-26 (2002)

Mikiko Ito：“无机磷酸盐转运蛋白家族”肾脏年度评论 22-26 (2002)。

桑波田 雅士: "リン代謝の最近の理解とリン調節薬の将来、透析療法ネクストII透析骨症は防げる"43-48 (2003)

Masashi Kuwabata：“磷代谢的最新认识和磷调节药物的未来，透析疗法 NEXT II 透析骨病是可以预防的”43-48 (2003)

Segawa H.: "Growth-related renal type II Na/Pi cotransporter"J Biol Chem. 277. 19665-19672 (2002)

Sekawa H.：“生​​长相关的肾 II 型 Na/Pi 协同转运蛋白”J Biol Chem。

桑波田 雅士: "生体の無機リン酸感受機構"腎と骨代謝. 15. 27-32 (2002)

Masashi Kuwabata：“生物体中的无机磷酸盐传感机制”肾脏和骨代谢。15. 27-32 (2002)。