リン利尿因子フォスファトニン感受ペプチドASARM受容体の同定

磷酸利尿因子磷蛋白敏感肽ASARM受体的鉴定

• 批准号: 17659256
• 负责人: 宮本 賢一
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659256/
• 关键词: フォスファトニン; 受容体; エンドサイトーシス; トランスポーター; 腎

リン利尿因子フォスファトニンは、リン代謝の中心的分子であり、その分子から分解されて放出されるAcidic serine asparate rich motof peptide ASARMペプチドは、カルシウム/リン代謝、エネルギー代謝(糖代謝)および腎機能や骨代謝などに重要なペプチドホルモンである。フォスファトニン感受ペプチドASARMは腎近位尿細管無機リン酸(以下リン)トランスポーター(Na/Pi cotransporter type IIa)に作用し、本分子の細胞膜から細胞質へのエンドサイトーシスを促進する。本研究では、ASARM受容体を同定する為に行った。ASARMによるtype IIaの腎近位尿細管細胞での発現抑制機構は、type IIa蛋白の第3細胞内ループにおけるdibasic motif (KRモチーフ)に認識される、メガリンを介するエンドサイトーシスに依存していた。我々はこのシグナル配列を認識する分子Na/Pi-Pex19を同定した。Na/Pi-Pex19の結合蛋白としてAP-2などの蛋白質がさらに必要であった。AP-2のμ2鎖はジチロシンモチーフやジロイシンモチーフを介して細胞膜蛋白を認識し、エンドサイトーシスを誘導した。そこで、Pex19とAP-2μ2鎖の結合モチーフについてyeast-two hybrid systemおよびpulldown assay法を行った結果、すでに知られている、IIa結合蛋白質であるNHERF1,PDZK1などに加えて、膜蛋白EST10876を同定した。EST10876は膜貫通1回のII型膜糖蛋白であり、細胞膜と細胞内器官に局在が確認された。EST10876の局在は、腎近位尿細管刷子縁膜に限局して確認された。ラベル化ASARMを用いて、EST10876クローンを発現させたCOS細胞との相互作用の検討を行い、EST10876とASARMとの結合を確認した。ただし、ASARMによるIIaエンドサイトーシスは、PTHなどに見られる迅速な分子移動が確認できないので、さらなる分子がエンドサイトーシスに必要と考えられた。また本クローンは、腎臓近位尿細管細胞に発現しているため、培養細胞系で各種RNAiを用いたノックダウン細胞において、ASARMとの結合は消失した。以上より、EST10879はASARM受容体として機能している可能性が考えられた。

Diuretic factors are released from Acidic serine asparate rich motof peptide ASARM molecules in the center of metabolism, metabolism, metabolism (glucose metabolism), kidney function and bone metabolism. ASARM is sensitive to the effects of perinephric acid (Na/Pi cotransporter type IIa) on renal proximal urinary tubule, and promotes the development of cytoplasmic membrane processes. This study was conducted on the same basis as ASARM receptor. ASARM type IIa protein expression inhibition mechanism in renal proximal urinary tubule cells, type IIa protein in the third cell of the intracellular dibasic motif (KR) recognition, and the role of the protein in the development of renal proximal urinary tubule cells. The molecular identity of Na/Pi-Pex19 is determined by the molecular identity of the molecule. Na/Pi-Pex-19 binding protein is essential. AP-2's μ2-lock chain is responsible for the recognition and induction of cell membrane proteins. Pex19 and AP-2μ2 lock binding assay were performed using the pulldown assay. The results were identical for Pex19 and AP-2 μ 2 binding proteins, NHERF1, PDZK1 and EST10876. EST10876 is a membrane penetration of type II membrane glycoprotein, cell membrane and intracellular organ. EST10876 was confirmed to be in the vicinity of the kidney and urine tubule. The interaction between COS cells and EST10876 was investigated during the study of ASARM and EST10876 binding. ASARM, ASARM In this case, the expression of ASARM in cultured cell lines was not detected. The above, EST10879, ASARM receptor and function are possible.

项目成果

Internalization of renal type IIc Na-Pi cotransporter in response to a high-phosphate diet.

• DOI: 10.1152/ajprenal.00097.2004
• 发表时间: 2005-03
• 期刊: American journal of physiology. Renal physiology
• 作者: H. Segawa;S. Yamanaka;Mikiko Ito;M. Kuwahata;M. Shono;Tadashi Yamamoto;K. Miyamoto

Characterization of inorganic phosphate transport in osteoclast-like cells

• DOI: 10.1152/ajpcell.00412.2004
• 发表时间: 2005-04-01
• 期刊: AMERICAN JOURNAL OF PHYSIOLOGY-CELL PHYSIOLOGY
• 影响因子: 5.5
• 作者: Ito, M;Matsuka, N;Miyamoto, K
• 通讯作者: Miyamoto, K

Circulating FGF-23 is regulated by 1alpha,25-dihydroxyvitamin D3 and phosphorus in vivo.

循环 FGF-23 在体内受 1α,25-二羟基维生素 D3 和磷的调节。

• 发表时间: 2005
• 期刊: J Biol Chem. 280(4)
• 作者: Nashiki K;Taketani Y;Takeichi T;Sawada N;Yamamoto H;Ichikawa M;Arai H;Miyamoto K;Takeda E.;Miyamoto K.;Matsuo A.;Segawa H;Saito H
• 通讯作者: Saito H

Role of membrane microdomains in PTH-mediated down-regulation of NaPi-IIa in opossum kidney cells

• DOI: 10.1111/j.1523-1755.2005.00505.x
• 发表时间: 2005-09-01
• 期刊: KIDNEY INTERNATIONAL
• 影响因子: 19.6
• 作者: Nashiki, K;Taketani, Y;Takeda, E
• 通讯作者: Takeda, E

Intestinal Na-Pi cotransporter adaptation to dietary Pi content in vitamin D receptor

肠道 Na-Pi 协同转运蛋白对维生素 D 受体中膳食 ​​Pi 含量的适应

• 发表时间: 2004
• 期刊: Am J Physiol Renal Physiol. 287
• 作者: Takefumi Itoh;Noritoshi Nagaya;Shinsuke Murakami;Kaoru Hamada;Kenji Kangawa;Hiroshi Kimura;Zhang Ying;Takada Takuma;Nishimoto Goro;Yaoita Eishin;Yoshida Yutaka;Katsuya Ken;Jun Zou;Saito H;Ito M;Ito M;Miyamoto K;Nashiki K;Ito M;Segawa H
• 通讯作者: Segawa H