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トリ初期胚を用いたマウス胚幹細胞のインスリン分泌細胞へのin ovo分化誘導

利用早期鸟类胚胎将小鼠胚胎干细胞卵内分化为胰岛素分泌细胞

基本信息

批准号：
14657274
负责人：
吉川正英
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Nara Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657274/
关键词：
ES細胞インスリン膵β細胞トリ胚

项目摘要

糖尿病は生活習慣病として先進諸国の大きな問題疾病となっている。その病因の根本は、インスリンの相対的あるいは絶対的な不足であり、理想となる究極の治療は膵臓インスリン産生細胞と全く同等のインスリンの調節性分泌のできる細胞移植によるインスリン分泌機能の完全代償と考えられる。その細胞源としてES細胞は、その分化全能性および無制限に供給可能な点において魅力的な候補である。本研究で、我々はES細胞(GFP標識)より胚様体(EB)を形成させ、発生初期(12体節期)のトリ胚の膵原基(前腸門背側)近傍の前腸上皮を擦過し、この部にEBを接着させた。手術は腹側より到達せねばならず加傷の大きさと前腸門上皮の擦過による隣接静脈洞出血のため、胚の多くは生存できなかったが、約10%の生存トリ胚の15-20%に、胆部に強い蛍光が観察された。しかし、そのほとんどは移植EB塊そのもの残存であった。ただし、興味深いことに、そのようなトリ胚では、わずかながら肝臓、膵臓、腸上皮にGFP蛍光を発する細胞の組み込みが観察された。極めて少ないとはいえ、トリの胚発生過程にマウスES細胞がとりこまれ臓器形成に至っていることは、機能的な細胞分化が達成できている可能性があり、異種細胞のin ovo分化誘導法の可能性を示唆するものと考える。また、この研究過程で経験した技術的問題は、より一層早期の杯盤期へのES細胞移入を着想させた。

Diabetes is a lifestyle disease. It's an advanced disease in many countries. The root cause of the disease is the opposite of the opposite, ideal and ultimate treatment of the opposite, the opposite of the opposite. ES cells have the ability to differentiate and offer unlimited potential. In this study, we found that ES cells (GFP marker) were cultured from embryonic body (EB) formation to early embryonic stage (12 somite stage), and the foregut epithelium near the embryonic body (dorsal foregut hilum) was brushed and followed by EB in the foregut. The operation was performed on the ventral side of the abdomen, and the wound was increased. The intestinal portal epithelium was abraded. The adjacent venous holes were bled. The embryo survived. About 10% survived. The embryo survived. 15-20% survived. The gallbladder was strongly observed.しかし、そのほとんどは移植EB块そのもの残存であった。The cells that emit GFP in the liver, intestine and intestine are observed. The possibility of differentiation of ES cells from organ formation to functional differentiation is discussed. This research process is a technical problem, and a layer of early stage and early stage ES cell migration is considered.