マウスとスンクスのcDNAライブラリーを用いた歯種決定因子の探索

歯の発生研究には多くの課題があるが、とりわけ歯種の決定機構の解明は重要課題のひとつである。しかし、従来からよく利用されている動物であるマウス(齧歯類)は切歯と臼歯の2種しか歯種を持たないという点で特殊な動物であり、マウスを使う限り、歯種の決定機構の研究には自ずと限界がある。一方、スンクス(食虫類)は実験動物としては未知の点が多く、扱いが難しいところがあるものの、全ての歯種が揃っている点で他に代え難い。こうした点から、マウスとスンクスの比較研究を行いつつ、スンクスの歯種決定に関与する遺伝子の探索を行ない、下記のような成果を得た。1.スンクスの歯列形成の正常発生段階表の作成スンクスの歯列形成の詳細な記載が無いことから、正常発生段階表(normal stage)の作成に着手した。スンクス胎仔のE16-20の時期を中心に、顎顔面部の6μm厚連続切片を作成し、これをもとにコンピュータによる立体構築と顕微鏡下での詳細な観察を行った(山中ほか、第45回歯科基礎医学会、盛岡、2004年9月、ポスター発表)。2.遺伝子発現解析昨年度までに作成したライブラリから、Bmp4,Fgf8,Msx1のクローニングに成功し、whole mount in situ hybridizationによって顎顔面における発現パターンを明らかにした。そして、上顎と下顎における領域形成の差、発現の時期などを明らかにし、歯胚の歯種決定の時期を決定した(田畑・植村、第16回国際解剖学会・京都・2004年8月、シンポジウム発表)。

歯の発生研究には多くの課題があるが、とりわけ歯種の決定機構の解明は重要課題のひとつである。しかし、従来からよく利用されている動物であるマウス(齧歯類)は切歯と臼歯の2種しか歯種を持たないという点で特殊な動物であり、マウスを使う限り、歯種の決定機構の研究には自ずと限界がある。一方、スンクス(食虫類)は実験動物としては未知の点が多く、扱いが難しいところがあるものの、全ての歯種が揃っている点で他に代え難い。こうした点から、マウスとスンクスの比較研究を行いつつ、スンクスの歯種決定に関与する遺伝子の探索を行ない、下記のような成果を得た。1.スンクスの歯列形成の正常発生段階表の作成スンクスの歯列形成の詳細な記載が無いことから、正常発生段階表(normal stage)の作成に着手した。スンクス胎仔のE16-20の時期を中心に、顎顔面部の6μm厚連続切片を作成し、これをもとにコンピュータによる立体構築と顕微鏡下での詳細な観察を行った(山中ほか、第45回歯科基礎医学会、盛岡、2004年9月、ポスター発表)。2.遺伝子発現解析昨年度までに作成したライブラリから、Bmp4,Fgf8,Msx1のクローニングに成功し、whole mount in situ hybridizationによって顎顔面における発現パターンを明らかにした。そして、上顎と下顎における領域形成の差、発現の時期などを明らかにし、歯胚の歯種決定の時期を決定した(田畑・植村、第16回国際解剖学会・京都・2004年8月、シンポジウム発表)。