チューブリン重合阻害剤の抗腫瘍効果発現機構に対する再検討

微管蛋白聚合抑制剂抗肿瘤作用机制的重新审视

• 批准号: 14657584
• 负责人: 河野 通明
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657584/
• 关键词: チューブリン重合阻害剤; 細胞質微小管; がん化学療法; 細胞周期; アポトーシス; c-Jun N-terminal Kinase; TNFα; TRAIL; チューブリン; 併用効果; JNK

1.ERK-MAPキナーゼ系が恒常的に活性化されている癌細胞において、MEK阻害剤処理で細胞をG1期に停止させる事で、チューブリン重合阻害剤のアポトーシス誘導作用が顕著に増強されるが、このような条件下では細胞周期非依存的にアポトーシスが誘導される事を見出した。これはチューブリン重合阻害剤の標的が、間期に存在する細胞質微小管である可能性を強く示唆するものである。2.チューブリン重合阻害剤処理じた癌細胞ではc-Jun N-terminal Kinase(JNK)の持続的な活性化が誘導された。また、JNK阻害剤(SP600125)添加した癌細胞においては、チューブリン重合阻害剤に応答したアポトーシス誘導が大幅に抑制される事を見出した。3.チューブリン重合阻害剤によるアポトーシス誘導は、タンパク合成阻害剤の共存下において顕著に抑制され、とのような条件下ではJNKの活性化が起こらなくなった。これより、細胞質微小管の機能阻害を契機としてJNK活性化に関与する何らかのタンパク質の発現が誘導される可能性を考え、具体的にはDeath Receptor経路(FasL、TRAIL、TNFα経路)に焦点をあて、RT-PCR法によって上記リガンド及びその受容体の発現量の変動を解析した。その結果、チューブリン重合阻害剤処理に応答して乱FasL、Fas、TRAIL、TNFα受容体の発現量には有意な変化が認められゆなかったが、一方、TNFα及びDR5 (TRAIL受容体)の発現が亢進する事を見出した。すなわち、ここではまずTNFα及びTRAIL経路が活性化され、それがJNKの活性化に連動し、最終的にアポトーシス誘導に至る可能性が示唆された。

1. ERK - MAP キ ナ ー ゼ department が constant に activeness さ れ て い る cancer に お い て, MEK resistance against tonic 処 で cells を G1 phase に stop さ せ で る, チ ュ ー ブ リ ン reclosing resistance against tonic の ア ポ ト ー シ ス entrainment が 顕 the に raised strong さ れ る が, こ の よ う な conditions で は cell cycle of interdependent に ア ポ ト ー シ ス が induction Youdaoplaceholder0 events を see た. こ れ は チ ュ ー ブ リ ン reclosing resistance against tonic が の mark, interphase に exist す る cytoplasm of tiny tube で あ る strong possibility を く in stopping す る も の で あ る. 2. チ ュ ー ブ リ ン reclosing resistance against tonic 処 Richard じ た cancer で は c - Jun N - terminal Kinase (JNK) の hold 続 な activeness が induced さ れ た. ま た, JNK resistance against tonic (SP600125) add し た cancer に お い て は, チ ュ ー ブ リ ン reclosing resistance against tonic に 応 answer し た ア ポ ト ー シ ス induced が に significantly inhibit さ れ る matter を show the し た. 3. チ ュ ー ブ リ ン reclosing resistance against tonic に よ る ア ポ ト ー シ ス induced は, タ ン パ ク synthetic resistance against tonic の coexist under に お い て 顕 the に inhibit さ れ, と の よ う な conditions で は JNK の activeness が up こ ら な く な っ た. こ れ よ り, function of the cytoplasm of tiny tube の resistance against を opportunity と し て JNK activation に masato and す る what ら か の タ ン パ ク qualitative の 発 now が induced さ れ る possibility を え test, concrete に は Death Receptor 経 road (FasL, TRAIL, TNF alpha 経 road) に focus を あ て, rt-pcr method に よ っ て written リ ガ ン ド and び そ の by let body の 発 amount is の - dynamic analytical し を た. そ の results, チ ュ ー ブ リ ン reclosing resistance against tonic 処 Richard に 応 answer し て disorderly FasL, Fas, TRAIL, TNF alpha by body の 発 now quantity に は intentionally な variations change が recognize め ら れ ゆ な か っ た が, one party, TNF alpha and び DR5 (TRAIL let body) の 発 now が hyperthyroidism す る matter を show the し た. す な わ ち, こ こ で は ま ず TNF alpha and び TRAIL 経 road が activeness さ れ, そ れ が JNK の activeness に し muscle, eventually に ア ポ ト ー シ ス induced に possibility to る が in stopping さ れ た.

项目成果

Tanimura, S.: "Specific blockade of the ERK pathway inhibits the invasiveness of tumor cells : down-regulation of matrix metalloproteinase-3/-9/-14 and CD44"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 304巻. 801-806 (2003)

Tanimura, S.：“特异性阻断 ERK 通路可抑制肿瘤细胞的侵袭性：基质金属蛋白酶-3/-9/-14 和 CD44 的下调”Biochem.Biophys.Res.Commun.. Vol. 304. 801 - 806（2003）

Kataoka, T.: "Synthesis and structure-activity relationships of thioflavone derivatives as specific inhibitors of the ERK-MAP kinase signaling pathway."Bioorg.Med.Chem.. 15巻(in press). (2004)

Kataoka, T.：“作为 ERK-MAP 激酶信号通路特异性抑制剂的硫黄酮衍生物的合成和结构活性关系。”Bioorg.Med.Chem.. vol. 15（印刷中）。

Kohno, M.: "Pharmacological inhibitors of the ERK signaling pathway : application as anticancer drugs"Prog.Cell Cycle Res.. 5巻. 219-224 (2003)

Kohno，M.：“ERK信号通路的药理学抑制剂：作为抗癌药物的应用”Prog.Cell Cycle Res..5卷219-224(2003)

河野通明: "チューブリン阻害活性の検定"癌と化学療法. 31巻(印刷中). (2004)

Michiaki Kono：“微管蛋白抑制活性的测定”《癌症与化疗》第 31 卷（出版中）。

Tanimura, S: "Prolonged Nuclear Retention of Activated Extracellular Signal-Regulated Kinase1/2 is Required for Hepatocyte Growth Factor-induced Cell Motility"J.Biol.Chem.. 277巻・31号. 28256-28264 (2002)

Tanimura, S：“肝细胞生长因子诱导的细胞运动需要激活的细胞外信号调节激酶 1/2 的长期核保留”J.Biol.Chem.. 第 277 卷，第 31 期。28256-28264 (2002)