葉の老化とRuBP CarboxyLaseの分解

叶片衰老和 RuBP 羧化酶降解

• 批准号: 60480051
• 负责人: 大平 幸次
• 金额: $ 4.22万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
• 财政年份: 1985
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1985 至 1987
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-60480051/
• 关键词: コムギ; タンパク分解; 葉; プロテアーゼ; Ribulose Bisphosphate CarboxyLase; RuBisCO; 老化; 葉緑体; Ribulose Bisphosphate Carboxylase

コムギ葉よりプロトプラストを調製し, さらにPercollを用いた密度勾配遠心法による葉緑体を高度に精製した. またコムギ葉を機械的に破砕し, その破砕液から葉緑体を高度に精製した. これら葉緑体画分には, アミノペプチダーゼ活性, エンドペプチダーゼ活性, ヘモグロビン分解活性が認められた. 得られた画分への他のオルガネラの混入をマーカー酵素の活性を指標に調べたところ, ミトコンドリア, パーオキシゾームのわずかな混入が示唆された. しかし, 液胞や細胞質の混入の可能性は認められなかった. また得られた葉緑体のインタクトネスを測定したところ70〜90%と高い値を示した.これら葉緑体を用いてRuBPカルボキシラーゼ蛋白の分解について検討した. プロトプラストより調製した葉緑体のRuBPカルボキシラーゼの分解活性は, 機械的手法による調製した葉緑体に較べずっと強く, 葉緑体の調製法による違いが明確に認められた. 機械的に調製した葉緑体のRuBPカルボキシラーゼ分解活性について免疫的手法等を用いて更に詳しく検討した. その結果, RuBPカルボキシラーゼを, 緑葉体の破壊液と数時間インキュベートすると, その分解物が出現してくることが認められ, しかも分解物の数とそれぞれの分子量は, インキュベーション時のpHにより若干異なっていることが示された. 又, プロテアーゼ阻害剤による影響をみたところ, ロイペプチンによる阻害が顕著であった. これらの結果は, 葉緑体にRuBPカルボキシラーゼを分解するプロテアーゼが存在することを示唆している.

コ ム ギ leaf よ り プ ロ ト プ ラ ス ト を modulation し, さ ら に Percoll を with い た density hook with far art に よ る chloroplast を highly に refined し た. ま た コ ム ギ leaf を mechanical に broken 砕 し, そ の 砕 breaking liquid か ら chloroplast を highly に refined し た. こ れ ら chloroplast draw points に は, ア ミ ノ ペ プ チ ダ ー ゼ activity, Youdaoplaceholder0 ゼ ドペプチダ ゼ ゼ activity, ヘモグロビ <s:1> decomposition activity が recognize められた. Have ら れ た draw points へ の he の オ ル ガ ネ ラ の mixed with を マ ー カ を の ー enzyme activity index に adjustable べ た と こ ろ, ミ ト コ ン ド リ ア, パ ー オ キ シ ゾ ー ム の わ ず か な mixed with が in stopping さ れ た. し か し, Vacuole や cytoplasm は の の with possibility to recognize め ら れ な か っ た. ま た have ら れ た chloroplast の イ ン タ ク ト ネ ス を determination し た と こ ろ 70 ~ 90% と い numerical を shown し た. こ れ ら chloroplast を with い て RuBP カ ル ボ キ シ ラ ー ゼ protein decomposition に の つ い て beg し 検 た. プ ロ ト プ ラ ス ト よ り modulation し た chloroplast の RuBP カ ル ボ キ シ ラ ー ゼ の は decomposition activity, the technique of mechanical に よ る modulation し た chloroplast に more べ ず っ と く, chloroplast の regulation law に よ る) い が に clearly recognize め ら れ た. Mechanical に modulation し た chloroplast の RuBP カ ル ボ キ シ ラ ー ゼ decomposition activity に つ い て immune methods such as を with い て に more detailed し く beg し 検 た. そ の results, RuBP カ ル ボ キ シ ラ ー ゼ を, green body の 壊 breaking liquid と several time イ ン キ ュ ベ ー ト す る と, そ の decomposition が appear し て く る こ と が recognize め ら れ, し か も decomposition の number と そ れ ぞ れ の は, molecular weight イ ン キ ュ ベ ー シ ョ ン の when pH に よ り several different な っ て い る こ と が shown さ れ た. Again, プ ロ テ ア ー ゼ resistance against tonic に よ る influence を み た と こ ろ, ロ イ ペ プ チ ン に よ る resistance against が 顕 the で あ っ た. こ れ ら は の results, chloroplast に RuBP カ ル ボ キ シ ラ ー ゼ を decomposition す る プ ロ テ ア ー ゼ が exist す る こ と を in stopping し て い る.

项目成果

Mae,T.;Kamei,C.;Makino,A.;Ohira,K: Plant Physiol.

Mae,T.；Kamei,C.；Makino,A.；Ohira,K：植物生理学。

Mae,T.;Makino,A.;Ohira;K.;分筆: "Plant Senescence:Its Biochemistry and Physiology" University of California, (1987)

Mae,T.；Makino,A.；Ohira；K.；作者：“植物衰老：其生物化学和生理学”加州大学，(1987)

Mae,T.,Hoshino,T.,& Ohira;K.: Soil Sci.Plant Natr.,. 31. 589-600 (1985)

梅,T.,星野,T.,

Makino,A.;Mae,T.;Ohira,K.: Agric.Biol.Chem. 50. 1911-1912 (1986)

Makino，A.；Mae，T.；Ohira，K.：农业生物化学。

Makino,A;Mae,T;& Ohira;K.: Agric.Biol.Chem.,. 50. 1911-1912 (1986)

牧野，A；前，T；