イネにおいて、嫌気ストレスに誘導される酵素に関する育種学的研究

水稻厌氧胁迫诱导酶的育种研究

• 批准号: 04660003
• 负责人: 高野 哲夫
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04660003/
• 关键词: 乳酸脱水素酵素; アルコール脱水素酵素; 嫌気ストレス; cDNA; イネ; 突然変異

オオムギ乳酸脱水素酵素(LDH)cDNAの1部分をPCR法によって合成した。これをプローブに用いて、イネcDNAライブラリーをスクリーニングし、イネLDHcDNAをクローニングし、塩基配列を決定した。cDNAクローンは1412bpで、1062bpのタンパク質翻訳領域、110bpの5'非翻訳領域、および240bpの3'非翻訳領域からなる。イネLDHの一次構造がcDNA配列から推定された。そのアミノ酸配列は353残基で、分子量は38168ダルトンと計算された。タンパク質翻訳領域におけるイネcDNA塩基配列は、オオムギおよびヒトとそれぞれ75%、54%の相同性を示した。また、アミノ酸配列の相同性は、オオムギおよびヒトとそれぞれ85%および45%であった。ADH、LDHなどの酵素の発現と嫌気条件への適応能力との関連を明かにしていく上での実験材料を得る目的でこれらの酵素の発現に関する突然変異体のスクリーニングを行った。イネ品種金南風へのNMU処理による約1000系統の突然変異系統からのスクリーニングの結果、ADH活性の欠失した突然変異体が単離された。この変異体では、通常3種類あるアイソザイムのすべてが欠失しており、LDHなどの他の酵素に変異はみられなかった。また、水中で発芽を行った結果、発芽はしたがその後の子葉鞘の生長が著しく劣り、ADHの発現誘導もみられなかった。しかし、好気条件下での生長は正常であり、水田での栽培によってもADH欠失個体には稔性があった。

One part of LDH cDNA was synthesized by PCR. This is the first time that a gene has been cloned into a human genome. cDNA fragments are 1412bp, 1062bp, 110bp, 5', 240bp, and 3' non-inverted regions. The primary structure of LDH was constructed by cDNA alignment and putative sequencing. The molecular weight of the amino acid sequence was calculated at residue 353. 75% and 54% identity of the cDNA sequence were shown in the sequence of cDNA sequences. The similarity of the acid sequence is 85% and 45% respectively. ADH, LDH, enzyme production, reaction conditions, adaptability, and correlation between the production of materials and the production of enzymes. The NMU treatment of the new variety Jinnanfeng was about 1000 times, and the results of the sudden change of ADH activity were different. These enzymes are usually classified into three categories: LDH, LDH, and other enzymes. The growth of the seed sheath after the germination of the bud in the water is not good, and the emergence of the bud is not good. Under good conditions, it grows normally, but in paddy fields it lacks fertility.

项目成果

T.Li: "Molecular cloning of rice lactate dehydrogenase cDNA" Japan J.Breed.43. (1993)

T.Li：“水稻乳酸脱氢酶cDNA的分子克隆”Japan J.Breed.43。