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単クローン抗体を用いた牛毛ケラチン可溶化生成物の特性解析

使用单克隆抗体表征牛毛角蛋白溶解产品

基本信息

批准号：
04660302
负责人：
上原孝吉
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Tokyo University of Agriculture and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

牛毛ケラチン可溶化生成物を抗原として作製した単クローン抗体(MA617)の免疫化学的特性について詳細に検討を加えた。まず、本抗体の各種動物毛に対する反応性の差異を等電点電気泳動1SDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動とイムノブロットの組み合せにより解析した。その結果、本抗体の認識するトリコサイト由来サイトケラチンのサブユニットは、酸性/タイプIケラチンファミリーに属していたが、その認識サブユニットの種類、数において動物種による差異が認められた。特に、ラットについては酸性/タイプIケラチンファミリーHa1からHa4のうち、Ha1とHa4のみに特異的に反応し、Ha2とHa3には反応しなかった。このことから、本抗体の認識するエピトープは、mRNAのオルターネイティブ・スプライシングの結果、Ha1及びHa4サブユニット上に保存されたと理解された。次いで、各動物から採取した皮膚組織のメタカルン固定/パラフィン切片について、本抗体を用いた免疫組織化学的解析を行ったところ、生化学的検索結果と同様に動物種による差異が認められた。すなわち、本抗体の認識するエピトープの毛髄質、毛皮質、毛小皮、内根鞘及び外根鞘における分布に動物種差を認めた。さらに、ラット同胎齢の皮膚組織を用いて本抗体の認識するトリコサイト由来サイトケラチンの発現を解析したところ、背部皮膚では胎齢18日、ヒゲでは胎齢17日よりその発現が確認され、その発現は毛包の形成に同調して観察された。以上の結果より、本抗体の免疫化学的特性がより詳細に明らかになり、この結果をふまえて、今後、牛毛ケラチン可溶化生成物の免疫化学的解析を進め、その高度利用の道を探る予定である。

The immunochemical properties of MA617, a soluble antigen, were discussed in detail. The difference in reactivity of the antibody to various animal hair was analyzed by isoelectric electrophoresis. The results show that the antibody is recognized by the type and number of animal species. Ha1 The results of this study indicate that the expression of H1 and H4 in the antibody is related to the expression of H1 and H4. The results of immunohistochemical analysis and biochemical analysis of the antibody were similar to those of the animal species.すなわち、本抗体の认识するエピトープの毛髄质、毛皮质、毛小皮、内根鞘及び外根鞘における分布に动物种差を认めた。The antibody was used to identify the origin and development of hair follicles in the skin tissue of the fetus and the back skin on the 18th and 17th. The above results show that the immunochemical properties of this antibody are detailed, and the results are discussed in detail. In the future, the immunochemical analysis of the solubilized product of bovine hair is to be further developed, and the way to highly utilize it is to be determined.