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I型コラーゲンプロモーター・トランスジェニックマウスを用いた毛乳頭細胞の機能解析

使用 I 型胶原启动子转基因小鼠进行真皮乳头细胞的功能分析

基本信息

批准号：
10876054
负责人：
上原孝吉
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Tokyo University of Agriculture and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

毛乳頭細胞は毛の発生・成長を制御している特殊な間葉系細胞で、毛の原基である毛母細胞とは基底膜を介して接しており、これらの細胞は様々な情報シグナルの交換を行っていると考えられているが、その特性については未だ不明な点が多い。今回、I型コラーゲンのプロモーター領域およびその下流にホタル・ルシフェラーゼ或いはβ-ガラクトシダーゼをレポーター遺伝子として別々に組み込んだコンストラクトを同時に遺伝子導入したトランスジェニックマウスを用いて毛の成長と毛乳頭細胞の動態との関連について検討してきた過程で、X-galを用いた組織化学染色により、成長期における毛乳頭細胞がβ-ガラクトシダーゼの発現を示すことを見いだしたので報告する。I型コラーゲン遺伝子プロモーター・トランスジェニックマウスから経時的に背部皮膚および口唇部(ヒゲ)を採取し、Xgalによるブロック染色を施した後、パラフィン包埋、薄切切片を作製した。また、試料採取と同時に各々のマウス尻尾よりシフェラーゼを抽出し、その酵素活性を測定した。毛乳頭細胞は生後一週目で既にX-gal陽性を示した。毛周期の休止期に移行した毛乳頭細胞ではX-gal陰性であったが、成長期において毛根部が真皮深部へ侵入していく過程において、再び毛乳頭細胞はX-gal陽性所見を示した。この結果より、毛周期が成長期にある場合、毛乳頭細胞においてI型コラーゲン遺伝子・プロモーターの活性化が起こっていることが判明した。I型コラーゲン以外の他の細胞外マトリックス蛋白質遺伝子も活性化している可能性があるため、現在、いくつかの細胞外マトリックス蛋白質についてin situ hybridizationを行い、さらに、このトランスジェニックマウスのヒゲより毛乳頭細胞を単離、細胞培養系の確立を試みている。

Hair papilla cells control hair development and growth in a special mesenchymal lineage. Hair primordia are connected to the basement membrane of hair follicle cells. Hair papilla cells exchange information with each other. In the present study, type I hair growth and development of dermal papilla cells were studied by histochemical staining. The results showed that type I hair growth and development of dermal papilla cells were related to the development of dermal papilla cells. The development of β-papilla cells in the growth stage is shown in the report. The skin of the back and the lips of the mouth are taken, Xgal is stained, embedded, and sliced. The enzyme activity of the sample was determined by measuring the enzyme activity of the sample. The hair papilla cells were X-gal positive in the first week after birth. X-gal negative results were observed in the hair papilla cells during the anagen phase, and X-gal positive results were observed in the hair papilla cells during the growth phase. The results show that the hair cycle is different from the growth period, and the hair papilla cells are different from the type I hair cycle. The possibility of activation of extracellular proteins other than those of type I is discussed in detail below: isolation of dermal papilla cells, establishment of cell culture lines.