補体第4成分(C4)、凝固第13因子遺伝子領域の塩基置換の解析

补体成分 4 (C4) 和凝血因子 13 基因区域的碱基替换分析

• 批准号: 04670364
• 负责人: 鈴木 広一
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Osaka Medical College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04670364/
• 关键词: 遺伝的多型; 変異; PCR; 凝固第XIII因子; 補体第4成分; PCR-RFLP; 遺伝子内交叉

遺伝的多型を示すタンパク質の遺伝子レベルでの変異を、補体第4成分(C4)及び凝固第13因子Aサブユニット(F13A)の遺伝子について検討した。F13Aについては、報告されている遺伝子構造から14個のコーディングエクソンすべてを遺伝子増幅法によって複製増幅できる14組のオリゴヌクレオチドを合成した。これらのプライマーを用いて、4つの対立遺伝子のホモ接合体をそれぞれのエクソンごとに増幅し、塩基配列の解析を行った。その結果、第12エクソンと第14エクソンに4つの対立遺伝子を特徴づける塩基置換のあることを明らかにした。すなわちエクソン12のアミノ酸残基564に対応するコドンにCTG/CCGの置換、エクソン14のアミノ酸650と651に対応するコドンにGTT-GAG/ATT/CAGの置換である。4つの対立遺伝子F13A*1A、*1B、*2A、*2Bのうち1A及び2Aと1B及び2Bの違い、すなわちAとBの違いはコドン564によって、1A及び1Bと2A及び2Bの違い、すなわち1と2の違いはコドン650と651によって規定されていることをはじめて明らかにした。さらに別のプライマーを合成してこれら2つのエクソンにおける塩基置換をPCR-RFLP法で検出する方法を確立し、DNAレベルでのF13Aタイピングも可能にした(以上、Am.J.Hum.Genetに投稿中)。塩基置換の部位と数から、4つの対立遺伝子のうち3つはそれぞれのエクソンの塩基置換によって生成したこと、残りの1つは他の3つのうちの2つの遺伝子内交叉によって生じたことが強く示唆され、現在遺伝子内交叉が生じた証拠を明らかにする実験を進めているところである。C4についてはPCR-RFLP法を用いた雑種アロタイプの検出方法を検討し、スクリーニング法として使用できる条件を確立したところである。

But 伝 polymorphism を shown す タ ン パ ク qualitative の heritage 伝 son レ ベ ル で の - 4 different を, complement components (C4) and び coagulation factor 13 A サ ブ ユ ニ ッ ト (F13A) の heritage 伝 son に つ い て beg し 検 た. F13A に つ い て は, report さ れ て い る heritage 伝 sub structure か ら 14 の コ ー デ ィ ン グ エ ク ソ ン す べ て を heritage 伝 child rights amplitude method に よ っ て copy rights of で き る 14 groups の オ リ ゴ ヌ ク レ オ チ ド を synthetic し た. こ れ ら の プ ラ イ マ ー を with い て, 4 つ の state heritage seaborne 伝 son の ホ モ gametes を そ れ ぞ れ の エ ク ソ ン ご と に raised し picture, salt base with column line analytical を の っ た. そ の results, 12 エ ク ソ ン と エ 14 ク ソ ン に 4 つ の state heritage seaborne 伝 ithream by を 徴 づ け る salt base displacement の あ る こ と を Ming ら か に し た. 12 の す な わ ち エ ク ソ ン ア ミ ノ acid residue 564 に 応 seaborne す る コ ド ン に CTG/CCG の replacement, エ ク ソ ン 14 の ア ミ ノ acid 650 と 651 に 応 seaborne す る コ ド ン に GTT GAG/ATT/the CAG の replacement で あ る. 4 つ の state heritage seaborne 伝 son F13A * 1 A, 1 B, 2 A, * * * 2 B の う ち 1 A び と 2 A and 1 B and 2 B の violations い び, す な わ ち と B の violations い は コ ド ン 564 に よ っ て, 1 A and 1 B び と 2 A and 2 B の violations い び, す な わ ち 1 と 2 の violations い は コ ド ン 650 と 651 に よ っ て rules さ れ て い る こ と Youdaoplaceholder0 を じめて Ming ら に に た た. さ ら に don't の プ ラ イ マ ー を synthetic し て こ れ ら 2 つ の エ ク ソ ン に お け る salt base displacement を PCR - RFLP method で 検 out す を established し る method, DNA レ ベ ル で の F13A タ イ ピ ン グ も may に し た (above, Am, J.H. Um Genet に contribute). Salt base displacement の part number と か ら, 4 つ の state heritage seaborne 伝 son の う ち 3 つ は そ れ ぞ れ の エ ク ソ ン の salt base displacement に よ っ て generated し た こ と and residual り の 1 つ は he の 3 つ の う ち の 2 つ の heritage 伝 child within cross に よ っ て raw じ た こ と が く and shown strong sucking さ れ, but now 伝 child born within cross が じ た card 拠 を Ming ら か に す る be 験 を into め て い る Youdaoplaceholder0 と ろである. C4 に つ い て を は PCR - RFLP method with い た 雑 kind ア ロ タ イ プ の 検 out method を beg し 検, ス ク リ ー ニ ン グ method と し て use で き を る conditions established し た と こ ろ で あ る.