ヒト成長ホルモン遺伝子の構造異常に関する研究

人类生长激素基因结构异常的研究

• 批准号: 05807089
• 负责人: 加治 秀介
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05807089/
• 关键词: Kowarski症候群; 成長ホルモン遺伝子; 成長ホルモン不応症; 成長ホルモン受容体遺伝子

GH分泌不全や痩せのない家族性低身長例で、内因性GHに対する反応不良、即ち血漿IGF-1が低値の症例を何例か経験した。外因性GHに対する反応性から臨床的にKowarski症候群(生物学的不活性型GH)やLaron症候群を鑑別し、それぞれGHおよびGH受容体遺伝子異常の解析を試みた。上記の基準を満たす3例について、まずNB2細胞の増殖活性を指標とするbioassay系でGHの生物活性(BA)を測定した。BAとIRMAによるGH値の比は対照;1.15±0.40、症例1;1.25±0.03、症例2;0.54±0.18、症例3;0.46±0.25と2例でBAの有意な低下を認めた。次に患者末梢血よりDNAを抽出、GH-1遺伝子に特異的なプライマーを用いてPCR法で増幅し、得られた断片をサブクローニング後dideoxy法でsequenceした。また複数クローンで異常があればPCR産物を直接sequence法でも確認した。症例1、2ではエクソン部分に異常を認めなかった。症例3では第2イントロンの1170と1171番目の塩基間に12塩基の挿入を認めた。エクソン部は現在確認中である。スプライス異常を考え症例2と3については末梢血リンパ球よりRNAを抽出しRT-PCRで増幅したcDNAについても解析中である。異常が確認できたら、変異GHを発現しBAの検討を予定している。一方Noonan症候群の1例で外因性に急性投与したGHに対し血漿IGF-Iの反応不良を呈したためGH受容体遺伝子を解析したところコドン561のACU(threonin)がCCU(proline)に変わるmissense変異を6クローン中3クローンに認めた。またこのPCR断片の半分が本来なら同部を切断可能なStu Iで切断できずヘテロな点突然変異と考えた。現在GH受容体遺伝子のexon部を中心に他の構造異常の有無、及び家族の検索を進めている。またこの変異の機能的意義についても異常遺伝子を発現させ、インスリン遺伝子転写活性などを指標に検討する予定である。

GH secretion insufficiency や hand-picked せ の な い familial low measuring example で, endogenous GH に す seaborne る 応 bad, namely ち が low plasma IGF - 1 nt の disease patients what を か 経 験 し た. External GH に す seaborne る anti 応 sex か ら clinical に Kowarski syndrome (biological activity type GH) や Laron syndrome を identify し, そ れ ぞ れ GH お よ び GH by let body heritage 伝 child abnormal の parsing を try み た. Written の benchmark を against た す 3 cases に つ い て, ま ず NB2 を の raised breeding activity index と す る bioassay system で GH の determination of biological activity (BA) を し た. BAとIRMAによるGH value <s:1> comparison with による; 1.15±0.40, Symptom 1; 1.25±0.03, Symptom 2; 0.54±0.18, Symptom 3; 0.46±0.25と2 cases でBA <s:1> intentionally な low を recognize めた. Time に peripheral blood in patients with よ り を DNA extraction, GH - 1 heritage 伝 son に specific な プ ラ イ マ ー を with い て PCR method to で raised し picture, ら れ た fragment を サ ブ ク ロ ー ニ ン グ dideoxy method after で sequence し た. Youdaoplaceholder0 complex number <s:1> ロ <s:1> で で で で abnormal があればPCR product を direct sequence method で で confirmation of た. Symptoms 1 and 2で エ エ ソ ソ ソ <s:1> Partial に abnormality を recognition めな に った. Symptom 3で で the second トロ トロ トロ 1170と1171 order <s:1> between bases に12 bases を insert を recognize めた. Youdaoplaceholder0 ソ ソ である is currently confirming である. ス プ ラ イ ス abnormal を え test cases 2 と 3 に つ い て リ は peripheral blood ン パ ball よ を り RNA extraction し rt-pcr で rights of し た cDNA に つ い て も parsing で あ る. Anomaly が confirmation で たら たら, mutation GHを occurrence <s:1> BA 検 検 request を determination て て る る る. 1 side Noonan syndrome の で external に cast with acute し た GH に し seaborne plasma IGF -i の against bad 応 を is し た た め GH by let body heritage 伝 son を parsing し た と こ ろ コ ド ン 561 の ACU (threonin) が CCU (proline) に - わ る missense - 6 different を ク ロ ー 3 ク ン Youdaoplaceholder0 に に に recognize めた. ま た こ の PCR fragment の half が originally な ら を cut with department may な Stu I で cut で き ず ヘ テ ロ な point suddenly - different と exam え た. Now, whether there are any structural abnormalities in the 伝 sub-nucleus exon division を center に of the GH acceptor, and whether the び family <e:1> 検 is を in めて る る る る. ま た こ の - the meaning of the different function of の に つ い て も abnormal heritage 伝 son を 発 now さ せ, イ ン ス リ ン heritage 伝 son planning write activity な ど を index に beg す 検 る designated で あ る.

项目成果

Hidesuke Kaji: "Regulation of the GH receptor and GH-binding protein mRNA" Proceedings of the Society for Experimental Biology and Medicine. (in press).

Hidesuke Kaji：“GH 受体和 GH 结合蛋白 mRNA 的调节”实验生物学和医学学会会刊。

Hidesuke Kaji: "The regional distribution of thyrotripin-releasing hormone receptor messenger ribonucleic acid in the brain." Necroscience Letters. 151. 81-84 (1993)

Hidesuke Kaji：“促甲状腺素释放激素受体信使核糖核酸在大脑中的区域分布。”

Yasufumi Shigeyoshi: "Distribution of mRNAs for CCK-B receptorin Mastomys Brain:Northern and in situ hybridization studies" Brain Research. (in press).

Yasufumi Shigeyoshi：“Mastomys 大脑中 CCK-B 受体 mRNA 的分布：Northern 和原位杂交研究”大脑研究。

Toshiyuki Uchiyama: "Negative regulation of hypothalamic growth hormone releasing factor mRNA by GH and IGF-I" Neuroendocrinology. (in press).

Toshiyuki Uchiyama：“GH 和 IGF-I 对下丘脑生长激素释放因子 mRNA 的负调节”神经内分泌学。

Shinichiro Ohashi: "“Paradoxical"GH suppression by secretagogues in acromegaly?" Hormone and Metabolic Research. 25. 393-394 (1993)

Shinichiro Ohashi：“肢端肥大症中促分泌素的“矛盾”GH 抑制？” 25. 393-394 (1993)。