成長ホルモン作用異常の分子機構

生长激素异常作用的分子机制

• 批准号: 08671161
• 负责人: 加治 秀介
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08671161/
• 关键词: 成長ホルモン; 成長ホルモン遺伝子; 成長ホルモン結合蛋白(GHBP); 成長ホルモン受容体遺伝子; 成長障害; インスリン様成長因子(IGF-1)

1.不活性型GHの病態解析臨床的に不活性型GHが疑われた症例のGH遺伝子にヘテロのミスセンス変異(D112G)を認め、蛋白レベルでは変異型GHが優位に発現していた。GST融合蛋白として大腸菌で作成した変異GHとGH結合蛋白(GHBP)とのcomplexの分子量はHPLCの結果1:1で野性型GH-GHBPの1:2と比較してダイマー化の障害が示唆された。変異GHではIM9細胞でのGH受容体(GHR),JAK2,STAT5のリン酸化の低下と、GHR細胞外ドメイン、thrombopoietin受容体細胞質ドメインのキメラcDNAを導入したBaF/3-GM細胞での代謝反応の低下を認めた。2.GHR異常症の病態解析(A)G724Tと981Cの1塩基欠失(981C-del)を認めた複合ヘテロ例の父と兄には981C-del、母にはG724TをPCR-direct sequence,PCR-RFLPで確認した。父のリンパ球よりGHR mRNAをRT-PCR、direct sequenceしたところ正常GHRのみ発現していた。G724Tは発現しても細胞外ドメインの一部で(E224X)、981C-delは十分に発現しないとすれば本症例の高度の成長障害(-7.6SD)と血中GHBP低値(検出感度以下)は説明しうる。(B)GH不応性とGHBP高値(896,871 pmol/l)を呈した低身長(-3.0,-3.5 SD)兄妹例でGHRイントロン9のsplice donor siteにGからAへのヘテロの変異を認めた。母と兄妹のリンパ球GHR mRNAはRT-PCR,direct sequenceよりexon9のskipとframe shiftによりexon10では3アミノ酸が置換された後、終止コドンとなった。今後本例ではヘテロでの発症とGHBP高値の原因解明のため変異GHRを作成し、in vitroでの検討が必要である。

1. No active type GH の analytical clinical pathological type に not active GH が suspected わ れ た cases の GH heritage 伝 son に ヘ テ ロ の ミ ス セ ン ス - vision (D112G) を confess め, protein レ ベ ル で は - different GH が primacy に 発 し now て い た. GST fusion protein と し て coliform で made し た - different GH と GH binding protein (GHBP) と の complex molecular weight の は HPLC results の 1:1 で wild type GH - GHBP の 1:2 と compare し て ダ イ マ ー change の handicap of が in stopping さ れ た. - different GH で は IM9 cells で の GH let body (GHR), JAK2, STAT5 の リ ン acidification の と, GHR extracellular ド メ イ ン, thrombopoietin let somatoplasm ド メ イ ン の キ メ ラ cDNA を import し た BaF / 3 - GM cells で の metabolism against 応 の low を recognize め た. 2. の GHR abnormal disease pathological parsing (A) G724T と の 1 salt base owe lost 981 c (981 c - del) を recognize め た composite ヘ テ ロ example の father brother と に は c - 981 del and female に は G724T を PCR - direct sequence, PCR - RFLP で confirm し た. よ father の リ ン パ ball り GHR mRNA を rt-pcr, direct sequence し た と こ ろ normal GHR の み 発 now し て い た. G724T は 発 now し て も extracellular ド メ イ ン の a で (E224X), c - 981 del は very に 発 now し な い と す れ ば cases this の の height growth handicap of SD (7.6) と low blood GHBP nt (below 検 out sensitivity) は illustrate し う る. (B) GH 応 sexual と GHBP high numerical (896871 pmol/l) を show し た low body length (3.0, 3.5 SD) brother and sister で GHR イ ン ト ロ ン 9 の splice donor site に G か ら A へ の ヘ テ ロ の - different を recognize め た. Mother と sibling の リ ン パ ball GHR mRNA は rt-pcr, direct sequence よ り exon9 の skip と frame shift に よ り exon10 で は 3 ア ミ ノ acid が replacement さ れ た after, termination コ ド ン と な っ た. In the future this example で は ヘ テ ロ で の 発 disease と GHBP high numerical の reason interpret の た め - different GHR を make し, in vitro で の beg が 検 necessary で あ る.

项目成果

Hidesuke Kaji: "Normal bone mineral density in patients with adult onset GH deficiency" Endocrinology and Mefabolism. (in press).

Hidesuke Kaji：“成人生长激素缺乏症患者的正常骨密度”内分泌学和分解代谢。

Satoko Wada: "Characterization of GH_3 cells overexpressing FGF-2" Journal of Neuroendocrinology. (in press).

Satoko Wada：“过度表达 FGF-2 的 GH_3 细胞的表征”神经内分泌学杂志。

Kazuo Chihara: "International Ceminar on Nutrition in Health and Disease" Lucila B. Raluco,Kazuo Chihara and Masato Kawabata, 4 (1996)

Kazuo Chihara：“国际健康与疾病营养研讨会” Lucila B. Raluco、Kazuo Chihara 和 Masato Kawabata，4 (1996)

Yutaka Takahashi: "Leptin induces tyrosine phosphorylation of cellular proteins in cluding STAT-1 in human renal adenocarcinoma cells,ACHN" Biochemical and Biophysical Research Communications. 228. 859-864 (1996)

Yutaka Takahashi：“瘦素诱导细胞蛋白酪氨酸磷酸化，包括人肾腺癌细胞中的 STAT-1，ACHN”生物化学和生物物理研究通讯。

Yutaka Takahashi: "Short stature caused by a mutant growth hormone with an antagonistic effect." Endocrine Journal. 43. S27-S32 (1996)

高桥丰：“由具有拮抗作用的突变生长激素引起的身材矮小。”